国家自然科学基金(30870871)
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
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- 相关机构：复旦大学复旦大学上海医学院新乡医学院更多>>
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- 干扰转酮醇酶的短发卡RNA表达载体的构建与筛选
- 2011年
- 目的筛选出干扰小鼠转酮醇酶(TK)的短发卡RNA(shRNA)表达载体。方法针对TK基因序列设计4条TK干扰序列:hMGFP-shRNA1、hMGFP-shRNA2、hMGFP-shRNA3、hMGFP-shRNA4,PstⅠ酶切鉴定其序列。然后利用质粒转染小鼠肝癌细胞株Hepa1-6,用逆转录-聚合酶链式反应和酶活性方法检测转染TKshRNA后Hepa1-6细胞内TK mRNA和蛋白表达变化。结果经酶切凝胶电泳证实shRNA载体构建正确,质粒筛选实验表明hMGFP-shRNA1质粒对TK基因的抑制作用最强。结论成功构建表达靶向TK的shRNA重组质粒载体。
- 郭静刘瑞赵蕾钟春玖丰慧根
- 关键词：短发卡RNARNA干扰
- 转酮醇酶的研究进展(英文)被引量：8
- 2009年
- 转酮醇酶(Transketolase,TK)是一种焦磷酸硫胺素(thiamine diphosphate,ThDP)依赖性酶,负责催化磷酸戊糖通路中碳水化合物转化的一个关键反应。此酶属于同源二聚体,在单体间的接触界面上存在两个活性部位。与所有的焦磷酸硫胺素依赖性酶一样,TK活性不仅依赖于焦磷酸硫胺素的存在,还需要二价阳离子。TK存在于所有研究过的生物体中。迄今为止,在人类基因组中,已经确定了一个TK基因和两个TK相似基因,即转酮醇酶基因(TKT)、转酮醇酶样基因-1(transketolase like-1,TKTL-1)和转酮醇酶样基因-2(transketolase like-2,TKTL-2)。据报道,TKTL-1在肿瘤发生中起着重要的作用,同时对肿瘤患者的营养搭配及未来的治疗等方面有着重要的提示。在神经变性疾病、糖尿病和癌症中均发现转酮醇酶样基因变异体的存在,转酮醇酶的活性也有所降低。这些资料为更好地研究这些疾病的发病机理提供了新的线索,并有助于建立新的预防和治疗手段。
- 赵静钟春玖
- 关键词：神经变性性疾病
- 韦尼克脑病脑区选择性损害与转酮醇酶活性下降相关的实验研究被引量：11
- 2009年
- 目的:研究硫胺素缺乏时转酮醇酶(TK)及其他硫胺素相关酶活性的改变,探讨韦尼克脑病脑区选择性损害的病理机制。方法:将雄性C57BL/6小鼠分为正常饲料对照组及硫胺素剥夺(TD)饲料组,硫胺素剥夺饲料组分为9d组和14d组,每组12只动物。实验结束后将动物处死取脑,检测TK、丙酮酸脱氢酶(PDH)、α-酮戊二酸脱氢酶(KGDH),及磷酸戊糖旁路关键酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)活性,测定磷酸戊糖旁路产物辅酶Ⅱ(NADPH及NADP+)的含量。结果:硫胺素缺乏显著降低小鼠脑TK活性(P<0.05),但对PDH、KGDH活性未产生显著影响,且早期海马TK活性显著性降低,皮层TK活性无明显下降,海马G6PD活性有上升趋势但无统计学意义,脑NADPH合成显著下降。结论:转酮醇酶活性下降及其相关的磷酸戊糖代谢旁路功能障碍参与了韦尼克脑病中线脑区选择性损害的病理机制。
- 赵艳玲潘晓黎赵静钟春玖
- 关键词：硫胺素缺乏韦尼克脑病酶活性
