国家高技术研究发展计划(2008AA02Z437)
- 作品数：10 被引量：87H指数：6
- 相关作者：蔡道章张荣凯赵庆曾春陈郁鲜更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院中山大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胶原／羟基磷灰石支架负载软骨细胞修复兔膝关节骨软骨缺损被引量：10
- 2010年
- 目的探讨胶原复合梯度羟基磷灰石（Col／HA）双相支架负载软骨细胞修复兔膝关节骨软骨缺损的可行性及疗效。方法构建Col／HA双相支架，将软骨细胞种植于支架培养1周，再将软骨细胞-支架复合体移植修复兔膝关节股骨髁的骨软骨缺损，并对骨软骨缺损的修复进行检测。结果光镜及扫描电镜观察显示软骨细胞在Col／HA支架中贴附良好，表型维持稳定，分泌胞外基质。大体观察和组织学检测显示，植入体内16周后实验组软骨层呈透明软骨样修复，软骨下骨缺损有新骨构建；对照组骨软骨缺损修复不良，组织学检测以纤维性组织或纤维软骨组织形成。Wakitani评分显示实验组修复组织优于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论双相Col／HA复合支架可作为骨软骨组织工程支架，负载软骨细胞可修复兔膝关节骨软骨缺损，重建关节软骨的结构和功能。
- 卢华定曾春蔡道章吴刚王昆温小粤
- 关键词：胶原羟基磷灰石软骨细胞骨软骨缺损
- 人膝骨关节炎血清生物学标志物的筛选被引量：6
- 2012年
- 目的:比较膝骨关节炎患者与正常人血清蛋白质组的差异,筛选其能用于骨关节炎诊断、治疗或发病机制研究的血清生物学标志物。方法:利用双向荧光差异凝胶电泳技术比较膝骨关节炎患者血清(4例)与健康志愿者血清(4例)蛋白图谱的差异,使用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱及生物信息学相关技术对获得的差异蛋白进行鉴定和初步分析,并用Western blotting进一步验证所鉴定的蛋白。结果:成功建立了骨关节炎血清差异蛋白质组学的研究方法;通过质谱分析初步鉴定出8个差异蛋白,其中5个蛋白在膝骨关节炎组表达上调,3个蛋白在膝骨关节炎组表达下调。Western blotting进一步验证得到α2-巨球蛋白在膝骨关节炎组表达上调,与双向荧光胶内差异凝胶电泳技术联合质谱分析的结果一致。结论:膝骨关节炎患者血清与正常人血清蛋白表达存在明显差异,其中α2-巨球蛋白可作为骨关节炎潜在的疾病相关生物学标志物进一步研究,为骨关节炎的诊断、治疗和发病机制的研究提供新的线索和实验基础。
- 曾花蔡道章陈郁鲜曾春叶志强庄泽黎明涛胡坤华
- 关键词：骨关节炎血清生物学标记物
- 基于线粒体PCR基因芯片的骨关节炎发病机制被引量：2
- 2012年
- 背景:软骨细胞具有修复受损软骨组织和维持软骨完整性的重要作用。线粒体功能障碍与细胞凋亡、老化和骨关节炎的病理过程密切相关。目的:通过线粒体PCR芯片技术研究骨性关节炎软骨细胞中线粒体基因的差异表达。方法:收集骨性关节炎患者及正常成人车祸后截肢者的关节软骨细胞,经过细胞的提取和培养、RNA提取和质量检测、mRNA提取和cDNA合成等处理后进行实时定量PCR检测。结果与结论:所检测到的84个与线粒体相关的待检测基因中有18个线粒体基因在骨性关节炎中发生了显著改变。以骨性关节炎患者软骨细胞线粒体基因相对正常成人软骨细胞线粒体基因的表达倍数表示基因表达的改变情况,其中倍数改变和倍数调节均大于2的上调基因有BBC3,BCL2,SLC25A37等15个,倍数改变小于0.5和倍数调节小于-2的下调基因有CPT1B,SLC25A16,SLC25A24共3个。18个线粒体差异基因功能分类如下:膜极化和电位:BCL2,BCL2L1,TP53,UCP1,UCP3;线粒体转运功能:BCL2,BCL2L1,CPT1B,FXC1(TIMM10B),MFN2,STARD3,TP53,UCP1,UCP3;小分子转运功能:SLC25A16,SLC25A2,SLC25A24,SLC25A31,SLC25A37;靶蛋白:FXC1(TIMM10B),MFN2;线粒体蛋白转入:COX18,FXC1(TIMM10B);内膜转运:FXC1(TIMM10B),TIMM17B;线粒体裂变和融合:COX18,MFN2;线粒体局限化:MFN2;凋亡基因:BBC3,BCL2,BCL2L1,SOD2,P53。结果表明,骨性关节炎软骨细胞中线粒体发生了明显的能量代谢功能障碍。
- 潘剑英沈俊张荣凯李智富蔡道章
- 关键词：骨性关节炎线粒体凋亡发病机制代谢
- 一种提取大鼠膝关节软骨下骨总RNA的方法被引量：7
- 2012年
- 在关于骨性关节炎软骨下骨的研究中，大鼠膝关节骨关节炎模型最常使用。从细小的大鼠膝关节分离并抽提出高质量的软骨下骨总RNA样品十分困难。我们使用微动力磨钻液氮下打磨分离大鼠膝关节软骨下骨，结合Trizol与硅胶离心柱提取软骨下骨总RNA的纯化方法，是一种简单、可靠、实用的提取完整和高纯度软骨下骨总RNA的新方法。
- 张荣凯李国威方航陈郁鲜宋炎成赵庆蔡道章
- 关键词：软骨下骨总RNA膝关节关节分离骨性关节炎关节炎模型
- MMP3在早期骨关节炎模型软骨下骨的表达及其意义被引量：19
- 2011年
- 目的:研究早期骨关节炎软骨下骨基质金属蛋白酶3(MMP3)的表达情况,为阐述其在骨关节炎致病中的重要作用提供依据。方法:大鼠分为实验组(n=30)和对照组(n=30)。实验组切除右膝内侧半月板并切断内侧副韧带,对照组仅切开关节囊。于术后1、2、4周取右膝关节标本,病理检查验证造模成功后,采用qPCR技术及免疫组化技术从基因水平及蛋白水平全面分析软骨下骨MMP3的表达情况。结果:(1)术后1周,软骨下骨的MMP3在实验组的表达量明显升高,是对照组的8.34倍(P<0.05);术后2周,MMP3在实验组的表达量也升高,是对照组的4.85倍(P<0.05),但相对于术后1周,表达量有所下降;术后4周,2组的MMP3表达量无显著差异;(2)术后1周与术后2周,实验组软骨下骨区检测到大量的MMP3阳性细胞,以小单核细胞及多核巨细胞为主,术后4周实验组、对照组及阴性对照组织切片均未检测到MMP3阳性细胞。结论:软骨下骨MMP3表达在早期骨关节炎致病机制中起了重要作用。
- 张荣凯方航卢华定陈郁鲜宋炎成曾春赵庆蔡道章
- 关键词：骨关节炎软骨下骨基质金属蛋白酶3
- 以关节不稳建立的大鼠骨关节炎模型被引量：25
- 2013年
- 背景:骨性关节炎是一种复杂的多病因退变性关节疾病。早期进行骨性关节炎的防治尤其重要。但获取足量的适合研究的早期骨性关节炎的人类骨标本十分困难。目的:观察关节不稳方法建立骨关节炎模型大鼠的关节软骨组织学变化。方法:10周龄雄性SD大鼠随机分为2组:实验组切除右膝内侧半月板及内侧副韧带,对照组仅切开关节囊。于术后1,2,4,6,8周取右膝关节标本,行病理组织学检查分析大鼠骨关节炎病程的变化情况。结果与结论:①术后2,4,6,8周,实验组关节软骨退变程度呈现轻度糜烂、溃疡磨损、严重磨损、骨赘形成等病理变化。②术后1,2,4,6,8周,实验组关节软骨评分均明显高于对照组(P<0.05)。结果显示该实验采用内侧副韧带切断+内侧半月板切除方法成功建立了大鼠膝关节骨关节炎模型,且造模后4周内的病理、形态学改变类似于人类早期膝关节骨关节炎表现,是研究早期骨关节炎的理想模型。
- 张荣凯杨禄坤叶志强吴兆亚赵庆蔡道章
- 膝关节骨关节炎患者与正常人群的血清差异表达蛋白被引量：3
- 2009年
- 【目的】用蛋白组学方法,通过对膝关节骨关节炎患者及正常人群血清蛋白的比较,寻找差异表达蛋白并探讨其与骨关节炎致病机理的关系。【方法】选取2007年10月到12月10例在中山大学附属第三医院骨科住院治疗的膝关节骨关节炎患者为实验组;10名性别相同,年龄、身体质量指数值相约的健康志愿者为对照组,分析2组双向电泳结果,并对差异表达蛋白进行质谱鉴定。【结果】通过双向电泳图普比较发现7个差异表达蛋白,其中6个在关节炎组中呈低表达,1个呈高表达。经质谱鉴定为分别为:6个低表达蛋白分别为对氧磷酶1、对氧磷酶3、α-1-微球蛋白/bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素,高表达蛋白为载脂蛋白L1。【结论】膝关节骨关节炎血清表达差异蛋白:对氧磷酶1、对氧磷酶3、α-1-微球蛋白/bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素、载脂蛋白L1可能与骨关节炎的发病或病情进展具有一定的相关性。
- 陈瑞强曾春王昆谢沛根戎利民徐义春蔡道章
- 关键词：骨关节炎膝关节蛋白质组
- 脂蛋白基因在早期骨关节炎软骨下骨的表达被引量：8
- 2014年
- 目的:研究早期骨关节炎软骨下骨脂蛋白相关的基因表达改变情况。方法:大鼠分为实验组(15只)和对照组(15只)。实验组切除右膝内侧半月板及内侧副韧带,对照组仅切开关节囊。于术后1、2、4周取右膝关节标本,采用全基因表达谱芯片技术研究软骨下骨全基因表达,利用差异基因分析的方法分析脂蛋白相关的基因表达改变情况。结果:软骨下骨Apoa5表达于建模术后1周上调,术后2周下调;Apoc2表达于术后2周上调;Apol3表达于术后1周上调,术后4周下调;Lrp1于术后1、2周下调;Lrp5于术后2周下调;Gpihbp1、Lpl、Tfpi、Vldlr表达于术后1周均上调;Lrpap1、RGD1309808于术后4周均下调。结论:脂蛋白相关基因的表达改变在早期膝关节骨关节炎的软骨下骨变化中可能起了重要作用。
- 张荣凯杨禄坤黄丽娟赵庆蔡道章
- 关键词：芯片分析技术软骨脂蛋白类
- 早期骨关节炎软骨下骨趋化因子信号通路的表达被引量：5
- 2013年
- 背景:趋化因子广泛存在于炎症反应组织当中,起诱导炎症细胞趋向炎症组织参与免疫应答的作用,大量的实验研究表明,趋化因子在骨关节炎致病过程中起了重要作用。目的:分析早期骨关节炎软骨下骨的趋化因子信号通路表达改变情况,为阐述其在骨关节炎致病机制中的重要作用提供依据。方法:30只SD大鼠随机均分为实验组和对照组。实验组切除右膝内侧半月板及内侧副韧带,对照组仅切开关节囊。于造模后1,2,4周取右膝关节标本,采用全基因表达谱芯片技术研究软骨下骨全基因表达,利用差异基因分析、信号通路分析的方法分析趋化因子信号通路的表达改变情况。结果与结论:①发现一系列与趋化因子信号通路相关的差异表达基因。②实验组与对照组相比较,趋化因子信号通路在造模后1周差异有显著性意义(P<0.05),造模后2,4周差异无显著性意义(P>0.05)。说明趋化因子信号通路在极早期膝关节骨关节炎的软骨下骨改变中起重要作用。
- 张荣凯叶志强陈琰方航张颂阳吴兆亚赵庆蔡道章
- 关键词：软骨下骨趋化因子信号通路半月板炎症组织
- 机械应力相关基因在骨关节炎软骨下骨的表达被引量：5
- 2013年
- 背景:机械应力改变是骨关节炎发生发展的关键因素。目的:观察机械应力相关基因在关节不稳所致的骨关节炎大鼠模型中软骨下骨的表达情况,为阐述机械应力因素在骨关节炎发病中的重要作用提供依据。方法:将SD大鼠分为实验组和对照组,每组30只。实验组行右膝内侧半月板及内侧副韧带切除术,对照组仅切开关节囊。分别于术后1,2,4周取右膝关节标本,提取软骨下骨的RNA,并采用全基因表达谱芯片技术研究软骨下骨全基因表达,根据现有文献报道,探索机械应力相关基因在该大鼠模型软骨下骨中的表达情况,并通过qRT-PCR对结果进行验证。结果与结论:发现3个重要的与机械应力相关的差异表达基因:Postn,Ihh,Bmp5,并由qRT-PCR得到验证:实验组中,Postn在术后第1周显著高表达,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),术后第2周也出现高表达的趋势,但与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。Bmp5也在术后第1周显著高表达,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),第2周及第4周也有高表达的趋势,但与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。Ihh在术后第1周及第2周同时出现高表达,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结果可见机械应力因素是骨关节炎发病的重要因素,深入研究与其相关的基因或其通路,可能为揭示骨关节炎发病机制提供更多的依据,从而发现早期诊断及早期治疗的靶点。
- 方航张荣凯陈郁鲜宋炎成蔡道章
- 关键词：骨关节炎软骨下骨IHH全基因组
