国家自然科学基金(81374033)
- 作品数：12 被引量：51H指数：4
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- 芒果苷改善高果糖所致HepG2细胞内甘油三酯沉积机制研究
- 2015年
- 目的研究芒果苷改善高果糖诱导的Hep G2细胞内甘油三酯沉积的可能机制。方法低糖(1 g/L葡萄糖)条件下培养的Hep G2细胞分为对照组(1 g/L葡萄糖,无果糖)、果糖组(1 g/L葡萄糖+30 mmol/L果糖)、果糖+芒果苷组(同时加入葡萄糖浓度1 g/L+30 mmol/L果糖+不同剂量的芒果苷,使其药物终浓度分别为6.25、12.5、25、50μmol/L),药物干预24 h之后,油红O染色观察细胞内脂滴的沉积情况,酶法测定细胞内甘油三酯(TG)的含量,Real-time PCR检测碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)、固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、肝型丙酮酸激酶(LPK)、二酯酰甘油酰基转移酶2(DGAT-2)mRNA表达的变化。结果油红O染色结果显示,与对照组相比,果糖组的Hep G2细胞脂滴显著增多,细胞内TG含量也明显升高(P<0.05)。与果糖组对比,低剂量的芒果苷对果糖导致的细胞内脂滴的沉积无影响,较高剂量的芒果苷(25μmol/L和50μmol/L)使细胞内的脂滴数量明显减少,细胞内TG含量显著降低(P<0.05),以50μmol/L的芒果苷干预效果最好。Real-time PCR结果显示,与对照组相比,果糖组Hep G2细胞ChREBP、SREBP-1c、LPK、DGAT-2 mRNA明显升高,50μmol/L芒果苷能够下调Hep G2细胞ChREBP、LPK、DGAT-2 mRNA的高表达(P<0.05),但对SREBP-1c mRNA表达影响不明显。结论芒果苷能够改善高果糖诱导的Hep G2细胞内TG的沉积,可能与抑制脂质合成相关基因ChREBP、LPK、DGAT-2 mRNA的表达密切相关。
- 郑旭李丹阳赵元阳周良曹文富曹纬国姚玲王建伟
- 关键词：芒果苷果糖CHREBP
- 6-姜辣素改善老年大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的研究被引量：3
- 2022年
- 研究6-姜辣素改善自然衰老糖脂代谢紊乱大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的作用。将27只老年雄性SD大鼠随机分为3组(每组9只):老年模型组(aged)、6-姜辣素低剂量组(G-L,0.05 mg·kg^(-1))和6-姜辣素高剂量组(G-H,0.2 mg·kg^(-1)),另6只青年雄性SD大鼠作为青年对照组(NC),各组大鼠灌胃给药7周。ELISA法检测血浆游离脂肪酸(NEFA)和胰岛素的含量,计算脂肪组织胰岛素抵抗指数(Adipo-IR);采用HE染色法检测附睾周围脂肪组织(eWAT)脂肪细胞的大小;Western blot法检测附睾周围脂肪组织中脂联素(adiponectin,APN)信号通路、胰岛素信号通路和炎症因子相关蛋白如脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)、腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化AMPK(苏氨酸172位点)(AMPKα;)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、总蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(丝氨酸473位点)(p-Akt^(Ser473))、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)、磷酸化JNK1/2(苏氨酸183/络氨酸185位点)(p-JNK^(Thr183/Try185))、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的蛋白质表达;real-time PCR法检测它们基因的表达水平。结果显示,高剂量6-姜辣素给药7周可显著降低禁食血浆NEFA和胰岛素的含量,降低脂肪组织胰岛素抵抗指数;高剂量6-姜辣素组显著升高eWAT中APN、AdipoR1、PGC-1α、PI3K蛋白和mRNA的表达,以及p-AMPK;、p-Akt^(Ser473)的相对表达,显著降低eWAT中TNF-α、IL-1、IL-6蛋白和mRNA的表达,以及p-JNK1、p-JNK2的相对表达;结果说明6-姜辣素能够改善糖脂代谢紊乱大鼠的脂肪组织胰岛素敏感性,其机制可能与增强PI3K/Akt信号通路、抑制脂肪组织的炎症、增加脂肪组织APN的合成、增强AdipoR1的表达并激活其下游AMPK/PGC-1α信号通路有关。
- 詹权操刘宇哲席雨蒙曾颜田伽瑜刘丽李冬JOHJI Yamahara王建伟
- 关键词：胰岛素抵抗APN脂联素受体1
- 6-姜烯酚改善老年大鼠肝脏胰岛素抵抗作用的研究被引量：2
- 2021年
- 目的:研究6-姜烯酚对老年大鼠肝脏胰岛素抵抗(IR)的作用及其机制。方法:用网络药理学方法查找6-姜烯酚作用靶点和IR相关基因,构建6-姜烯酚——IR基因调控网络并使用分子对接技术进行验证。20月龄SD雄性大鼠随机分为模型对照组、6-姜烯酚0.5 mg/kg组;另取3月龄SD雄性大鼠作为正常对照组。RT-PCR和Western blot法检测肝脏中相关基因和蛋白的表达。结果:6-姜烯酚作用靶点与IR基因密切相关,且主要富集在PI3K/AKT信号通路上;且与正常对照组相比,模型对照组大鼠肝脏磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS1)、总脂肪酸转位酶(t-CD36)和细胞膜脂肪酸转位酶(m-CD36)的表达显著上调,磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、葡萄糖转运蛋白(GLUT)2和细胞浆脂肪酸转位酶(p-CD36)的表达显著下调,6-姜烯酚0.5 mg/kg可提高模型对照组大鼠肝脏胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)mRNA的表达(P<0.05);6-姜烯酚0.5 mg/kg显著逆转了这些蛋白的表达。结论:6-姜烯酚可改善老年大鼠肝脏IR,其机制可能与抑制IRS1(ser307)的磷酸化、促进AKT(ser 473)的磷酸化、抑制细胞膜CD36的表达和调节其质-膜转位、以及上调GLUT 2的表达有关。
- 席雨蒙轩晨张军张军靳雅倩郭红丽姚玲姚玲罗先钦王建伟
- 关键词：衰老肝脏胰岛素抵抗葡萄糖转运蛋白
- 芒果苷改善高果糖所致自发性高血压大鼠肾间质纤维沉积的可能机制被引量：4
- 2015年
- 目的探讨芒果苷(mangiferin,MA)对高果糖引起的自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHRs)肾间质纤维沉积的影响及其可能的机制。方法 24只SHRs按随机单位组设计分组法分为对照组、果糖组、果糖+低剂量芒果苷(5 mg/kg)组和果糖+高剂量芒果苷(15 mg/kg)组。实验周期为7周,7周末处死大鼠,取血浆、肾脏组织。检测血浆葡萄糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(non-esterified fatty acid,NEFA)和肾组织甘油三酯含量,Masson染色后半定量评估肾间质纤维沉积的程度,Real-time PCR检测肾组织单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、CD68、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白α-Ⅳ链[collagen alpha-4(Ⅳ)chain,col4a4]、转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、尿激酶纤溶酶原激活物(urokinase plasminogen activator,u PA)mRNA的表达,免疫组化检测肾脏u PA、PAI-1蛋白表达水平。结果与对照组比较,果糖组SHRs肾间质胶原纤维沉积率显著增加(P<0.01),而芒果苷(15 mg/kg)明显减轻果糖引起的SHRs肾间质胶原纤维沉积(P<0.05)。各组肾脏甘油三酯含量没有变化;肾组织MCP-1、CD68、α-SMA、col4a4、TGF-βmRNA也没有明显变化,但芒果苷(15 mg/kg)明显逆转果糖引起的u PA/PAI-1 mRNA比值的降低(P<0.05),同时降低高果糖引起PAI-1蛋白表达水平升高。结论芒果苷能改善高果糖所致SHRs肾脏间质纤维沉积,其机制可能与调控肾组织PAI-1、u PA有关。
- 周良赵元阳邢小忙潘永全姚玲李春丽姜蓉林雪梅王建伟
- 关键词：芒果苷
- 6-姜烯酚改善db/db小鼠胰岛素敏感性研究
- 2021年
- 目的:研究6-姜烯酚对db/db小鼠肝脏组织胰岛素敏感性的影响及机制。方法:将24只db/db小鼠(雌雄各半)随机分为模型组、6-姜烯酚低剂量组(10mg·kg^(-1))、6-姜烯酚高剂量组(40mg·kg^(-1)),另取BKS小鼠8只(雌雄各半)作为正常对照组,连续灌胃给药3周。于2周末行葡萄糖耐量OGTT实验,取血测定血浆葡萄糖、胰岛素含量,计算HOMA-IR及HOMA-IS指数;第3周末处死动物取肝脏组织,RT-PCR法及Western blot检测肝脏组织糖异生及胰岛素信号相关基因及蛋白的表达。结果:6-姜烯酚下调db/db小鼠禁食血浆葡萄糖、胰岛素水平,降低胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),升高胰岛素敏感性指数(HOMA-IS)。同时,6-姜烯酚逆转了db/db小鼠肝脏糖异生的关键基因(磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK和葡萄糖6-磷酸酶G6PC)高表达(P<0.05),明显升高了线粒体质量控制蛋白1α(PGC-1α)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的表达。结论:6-姜烯酚能改善db/db小鼠胰岛素敏感性,可能与调节糖异生关键酶PEPCK、G6PC和PGC1-α、GLUT2胰岛素信号通路有关。
- 王猛马朋靳雅倩王同壮张军姚玲曹文富曹文富
- 关键词：DB/DB小鼠胰岛素敏感性
- 生姜乙醇提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用机制研究被引量：10
- 2016年
- 目的观察姜提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用,并探讨其可能的作用机制。方法取SD大鼠24只,随机分为4组,每组6只,即正常对照组(给予正常饮食饮水),模型组(给予10%果糖水),姜提取物低、高剂量组20,50 mg·kg^(-1),给予姜提取物灌胃,连续28 d。用酶法和ELISA检测血浆葡萄糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和胰岛素含量,苏木精-伊红(HE)染色和油红-O染色观察肝脏组织中的脂肪沉积程度,RT-PCR和Western blot法检测肝脏相关基因和蛋白表达。结果姜提取物逆转了果糖过量消耗引起的大鼠肝脏甘油三酯的过度堆积(P<0.05)、肝细胞空泡化的增加和肝脏油红-O染色面积的增加(P<0.05)。然而,姜提取物并不影响大鼠食物摄入量和体质量。姜提取物能够抑制肝脏二脂酰甘油酰基转移酶(DGAT)-2 mRNA和蛋白的过表达(P<0.05),但对肝X受体(LXR)、DGAT-1、单酰甘油酰基转移酶(MGAT)-1、MGAT-2、激素敏感脂肪酶(HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)mRNA的表达无影响。结论姜提取物可能通过抑制介导肝脏甘油三酯生物合成的关键酶DGAT-2的过表达,从而改善果糖所致大鼠脂肪肝。
- 陈婷姚玲柯大智左国伟曹纬国王尚马朋蒋丽蓉Johji YamaharaYuhao Li王建伟
- 关键词：姜提取物脂肪肝果糖
- 高果糖引起的脂肪肝大鼠肾脏脂质合成相关基因和蛋白的表达被引量：8
- 2014年
- 大量研究表明,高果糖可引起脂肪肝,但对肾脏脂质代谢的影响尚不清楚。该实验研究给予10%果糖水5周后诱导的脂肪肝大鼠肾脏的脂质代谢情况,并探讨其可能机制。将16只雄性SD大鼠随机分为正常组(con)和果糖组(fru),果糖组给予10%(W/V)果糖水,第5周末称体重、取血、处死,检测血浆GLU、TG、TC和INSULIN含量。取肾脏、肝脏和白色脂肪称重,采用形态学方法观察肝脏和肾脏脂质沉积情况,酶法测其TG、TC含量,以Real time-PCR检测肾脏、肝脏中脂质合成和脂质氧化相关基因水平,以Western blot检测肾、肝细胞核脂质合成转录因子的蛋白表达。结果显示,果糖组大鼠血浆TG、INSULIN明显升高,并出现肥胖体征,肝脏脂质沉积严重,其调控脂质合成的两个关键的转录因子ChREBP和SREBP1c mRNA和核蛋白表达都明显升高,并且它们靶向的脂质合成相关酶FAS、ACC1、SCD1 mRNA表达也显著增加。但是,在肾脏中,高果糖没有引起TG含量的变化,调控脂质重新合成的基因和蛋白的表达也未发生变化。因此,与果糖致脂肪肝不同,高果糖饮食并没有造成肾脏的脂质沉积和脂质合成相关基因、蛋白的变化。
- 刘长金刘磊柯大智林雪梅姜蓉胥文春左国伟王建伟
- 关键词：果糖肾脏脂质代谢
- 绞股蓝叶水提物对糖尿病大鼠降血糖作用研究被引量：16
- 2020年
- 目的探讨绞股蓝Gynostemmapentaphyllum叶水提物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠的降血糖作用及其机制。方法采用ip STZ的方法制备糖尿病大鼠模型,将21只造模成功的SD雄性大鼠随机分为模型组和绞股蓝叶水提物低、高剂量(100、500 mg/kg)组,另取7只正常大鼠作为对照组,分别于给药2周末和3周末禁食取血,检测血浆葡萄糖(空腹血糖)、三酰甘油(TG)的浓度,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测骨骼肌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)m RNA的表达,Western blotting检测骨骼肌GLUT-4总蛋白表达,免疫荧光染色观察GLUT-4蛋白在骨骼肌肌膜上的表达分布情况。结果与对照组比较,模型组大鼠的饮食、饮水量明显增加,而体质量以及骨骼肌的质量明显下降;血浆TG和空腹血糖以及骨骼肌中TNF-αmRNA的表达明显升高,而骨骼肌GLUT-4 mRNA、GLUT-4总蛋白及骨骼肌肌膜上GLUT-4蛋白的表达明显降低;与模型组比较,高剂量的绞股蓝叶水提物明显降低了STZ诱导的糖尿病大鼠的空腹血糖,逆转了骨骼肌TNF-αmRNA和肌膜GLUT-4蛋白的表达。结论绞股蓝叶水提物能够降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖,其作用机制可能与增加骨骼肌肌膜GLUT-4蛋白表达和抑制骨骼肌炎症有关。
- 王同壮王尚马朋姚玲王猛LI Yu-haoJOHJI Yamahara蒋丽蓉王建伟
- 关键词：绞股蓝葡萄糖转运蛋白4肿瘤坏死因子Α三酰甘油
- 6-姜烯酚通过抑制SCD1表达改善db/db小鼠肝脏脂肪变性的研究被引量：2
- 2021年
- 目的探讨6-姜烯酚对db/db小鼠肝脏脂质代谢的影响及机制。方法将24只db/db小鼠随机分为模型组、6-姜烯酚低剂量组(10 mg·kg^-1)和6-姜烯酚高剂量组(40 mg·kg^-1),每组8只,雌雄各半;另取8只BKS小鼠(雌雄各半)作为正常对照组;灌胃给药,每日1次,连续21 d。采用酶法检测肝脏组织甘油三酯(TG)含量;采用油红O染色法检测肝脏组织脂质沉积情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、二酰基甘油酰基转移酶2(DGAT2)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、酰基辅酶A氧化酶(ACOX)及肉碱棕榈酰基转移酶1a(CPT1a)的mRNA表达;采用Western Blot法和免疫荧光染色法检测肝脏组织SCD1蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组小鼠肝脏组织的TG含量和油红O染色面积以及SREBP-1c、ACC、FAS、DGAT2、SCD1 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01),ACOX、CPT1a mRNA表达显著下调(P<0.05)。与模型组比较,6-姜烯酚高剂量组的小鼠肝脏组织TG含量和油红O染色面积明显减少(P<0.01),SCD1在mRNA水平和蛋白水平的表达均显著下调(P<0.05,P<0.01),与免疫荧光染色法检测结果一致。结论6-姜烯酚能够改善db/db小鼠的肝脏脂质沉积,其机制可能与下调SCD1的表达有关。
- 靳雅倩马朋王同壮张军张军王猛姚玲左国伟
- 关键词：DB/DB小鼠
- 基于网络药理学研究6-姜辣素改善L6成肌细胞糖脂代谢紊乱的作用机制被引量：3
- 2022年
- 运用网络药理学研究6-姜辣素改善糖脂代谢紊乱的作用机制,并通过高果糖高油酸培养的L6大鼠成肌细胞模型进行验证。借助TCMSP数据库、SwissTargetPrediction数据库、GeneCards数据库,对6-姜辣素作用糖脂代谢紊乱的靶点进行预测,运用软件Cytoscape 3.7.1构建化合物靶点-疾病网络关系,采用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,利用R包进行GO功能富集和KEGG通路富集分析;运用KEGG Mapper对富集基因进行基因映射。结合GO富集分析、KEGG通路分析和基因映射结果,该研究选择PI3K-AKT信号通路、mTOR、NF-κB-p65、ERK分子进一步进行体外实验验证。通过高果糖高油酸构建L6大鼠成肌细胞糖脂代谢紊乱模型,对细胞进行甘油三酯(TG)测定和油红染色,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测6-姜辣素对PI3K-AKT信号通路、mTOR、NF-κB-p65、ERK分子的基因、蛋白表达的影响。网络药理学分析共得到6-姜辣素治疗糖脂代谢紊乱靶点113个,GO富集分析发现与蛋白质激酶活性关系密切,KEGG富集共筛选出20条相关信号通路,包括PI3K-AKT信号通路、乙型肝炎、丙型肝炎、人类巨细胞病毒感染、自噬等。体外实验表明6-姜辣素能减少高果糖高油酸诱导的L6细胞脂质积累,减少炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α的表达,上调AKT的基因和蛋白磷酸化水平,下调mTOR、NF-κB-p65、ERK的磷酸化水平。这些结果提示6-姜辣素能够改善高果糖高油酸诱导的L6大鼠成肌细胞糖脂代谢紊乱,其机制可能与激活PI3K-AKT-mTOR轴改善胰岛素敏感性和抑制NF-κB-p65、ERK的磷酸化降低炎症反应有关,这为后续的基础研究提供理论基础。
- 曾颜田珈瑜詹权操刘宇哲李冬王尚王建伟
- 关键词：糖脂代谢紊乱网络药理学
