江苏省自然科学基金(BK2010217)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 小鼠骨髓巨噬细胞雌激素膜表面受体的检测被引量：1
- 2012年
- 目的使用不同方法检测小鼠骨髓巨噬细胞(BMM)雌激素膜受体,突破雌激素作用机制的传统观念,为临床更好地防治相关疾病提供新思路。方法六周龄C57BL/6j雄性小鼠,体外诱导培养BMM。收集细胞,与17β-estradiol-BSA-FITC或BSA-FITC孵育,用激光共聚焦扫描显微镜和流式细胞仪检测其与巨噬细胞的结合状况。将巨噬细胞与17β-estradiol-BSA-FITC孵育的同时,分别加入十倍浓度的17β-estradiol、17β-estradiol-BSA、Tamoxifen、Testosterone,用流式细胞仪检测不同处理组荧光强度的变化。结果激光共聚焦扫描显微镜显示17β-estradiol-BSA-FITC结合于巨噬细胞膜上,而BSA-FITC对照组未检测到相应荧光。流式细胞仪检测显示17β-estradiol、17β-estradiol-BSA竞争性抑制17β-estradiol-BSA-FITC与巨噬细胞的结合,而Tamoxifen、Testosterone对17β-estradiol-BSA-FITC与巨噬细胞的结合无影响。结论小鼠骨髓巨噬细胞表面存在雌激素膜受体。
- 刘立民谢可鸣孙晓东王祖峰
- 关键词：巨噬细胞雌激素膜受体
- 雌二醇对内毒素诱导的骨髓巨噬细胞白介素-10的表达影响及机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的研究雌二醇对内毒素诱导的小鼠骨髓巨噬细胞白介素-10(IL-10)的表达调控作用及其相关机制,以期为临床更好地防治相关炎性疾病提供新思路。方法选用4周龄C57BL/6j雄性小鼠,体外培养骨髓巨噬细胞。收集细胞,用激光共聚焦扫描显微镜检测雌激素受体。将细胞与内毒素孵育的同时,分别加入雌二醇,他莫昔芬及雌二醇,24h后收集培养液,用ELISA法检测IL-10的含量,并提取细胞蛋白,用Western blotting法检测各处理组核转录因子κB(NF-κB)的激活情况。结果激光共聚焦扫描显微镜检测结果显示小鼠骨髓巨噬细胞表达雌激素受体。ELISA检测结果显示内毒素诱导细胞表达IL-10,雌二醇本身对IL-10的表达无影响,却可抑制内毒素诱导的IL-10表达,而此抑制作用被他莫昔芬拮抗。同时,Western blotting检测到内毒素激活细胞NF-κB通路,雌二醇抑制内毒素诱导的NF-κB活化,而此抑制作用可被他莫昔芬拮抗。结论雌二醇通过雌激素受体抑制内毒素诱导的小鼠骨髓巨噬细胞IL-10的表达,此抑制作用与雌激素抑制内毒素对细胞NF-κB通路的激活有关。
- 刘立民王祖峰
- 关键词：雌激素白介素-10核转录因子-ΚB
