江苏省自然科学基金(BK2010282)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 相关作者：姚登兵姚敏董志珍蔡敏汪晓莺更多>>
- 相关机构：南通大学德岛大学江苏省神经再生研究重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目南通大学自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- CPT-Ⅱ基因4号外显子质粒构建与变异分析被引量：1
- 2011年
- 背景:肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(Carnitine palmitoyltransferase-Ⅱ,CPT-Ⅱ)位于细胞线粒体内膜上,是脂肪酸氧化过程中起关键作用的酶之一。目前关于流感病毒感染与CPT-Ⅱ基因变异尚未见报道。目的:构建CPT-Ⅱ第4号外显子(E4)表达质粒及其核苷酸变异分析。方法:从流感病毒感染2例患者外周血中提取DNA,以PCR法扩增CPT-Ⅱ基因的第4号外显子,将其片段插入pGEM-T载体,以T4DNA连接酶,构建T-CPT-ⅡE4,转化大肠杆菌DH5α细胞,增菌,制备质粒,EcoRI酶切、测序和变异分析。结果与结论:成功构建重组表达质粒pGEM-T-CPT-ⅡE4,经DNA测序,证实质粒中插入CPT-Ⅱ第4号外显子完整序列,全长1305个核苷酸,编码435个氨基酸;与Genebank源序列对照比较,发现含有两个变异位点:1618(GTC→ATC)和1858(TTT→TCT),对应氨基酸为V368I和F448L。
- 姚登兵姚敏王理董志珍姚登福
- 关键词：基因扩增流感病毒A
- 甲型流感病毒感染对鼠脑组织线粒体脂代谢功能的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨甲型流感病毒(IAV,H3N2)感染对脑组织线粒体脂肪酸代谢功能的影响。方法:以鼠适宜A型流感病毒株(Aichi/2/68)接种不同鼠龄C57BJ/6j(wt/wt)新生鼠、幼鼠和成鼠;以逆转录PCR和实时定量PCR扩增感染组织IAV基因和测序证实,定量脑组织脂质水平并分析线粒体功能。结果:病毒接种鼠的肺组织均可检出大量IAV核酸,部分新生鼠和幼鼠脑、肝组织也可检出IAV核酸;IAV感染后第3天,新生鼠开始出现死亡,幼鼠第7天出现死亡;感染后第10天对照鼠和感染后的成鼠无死亡,幼鼠组死亡14只(17.5%);新生鼠组死亡48只(60.0%);病毒感染后脑组织总脂、游离肉毒碱明显升高(P<0.001)、短链肉毒碱明显减少(P<0.001),长链肉毒碱略为增加。结论:流感病毒感染明显影响脑组织脂肪在线粒体的氧化与代谢。
- 姚敏汪晓莺董志珍姚登兵
- 关键词：甲型流感病毒基因扩增线粒体脂代谢
- 肉碱棕榈酰基转移酶Ⅱ缺陷症的生化学研究被引量：5
- 2010年
- 目的:分析肉碱棕榈酰基转移酶Ⅱ(CPTⅡ)缺陷症患者细胞生化学特性,为研究CPTⅡ缺陷导致能量代谢障碍分子机制提供基本数据。方法:通过基因组序列分析,确定CPTⅡ基因突变类型;通过检测CPTⅡ残基酶活性和酶促动力学特征,分析正常和缺陷CPTⅡ残基酶两者活性与CPTⅡ基因突变类型间关系;测定两者线粒体脂肪酸β-氧化和ATP生成水平;分析两者细胞膜电位。结果:生化学特性分析结果显示CPTⅡ缺陷症患者细胞的CPTⅡ残基酶活性明显降低,且呈热不稳定性;细胞线粒体脂肪酸β-氧化和ATP生成水平显著不足;细胞膜电位显著较低。结论:CPTⅡ是一个热不稳定蛋白酶,CPTⅡ缺陷导致CPTⅡ残基酶活性明显降低,脂肪酸β-氧化和ATP生成水平显著不足。
- 蔡敏姚敏木户博姚登兵
- 关键词：酶活性三磷酸腺苷膜电位
- 大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期的基因表达变化
- 2012年
- 目的:探讨Wallerian溃变早期激活神经损伤修复与再生的分子机制。方法:建立大鼠损伤坐骨神经模型,通过表达谱基因芯片和生物信息学方法,全面系统分析大鼠坐骨神经损伤后远端Wallerian溃变早期的基因表达变化,运用RT-PCR、Western Blot和Immunohistochemistry等方法验证和鉴定表达谱基因芯片分析结果。结果:大鼠坐骨神经损伤后,坐骨神经远端在Wallerian溃变早期即有1546个显著表达差异基因和21种显著性差异基因表达趋势;基因功能注释和信号通路分析显示,Wallerian溃变早期有58种信号通路被激活,形成Wallerian溃变早期的信号调控网络。结论:大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期即有大量基因的表达变化和多种信号途径的激活,本研究可为神经损伤修复与再生提供理论基础。
- 郭炜旻沈君心梁佳佳何凤莲邓宏健徐菲姚登兵
- 关键词：坐骨神经基因芯片信号通路
