国家自然科学基金(30100138)
- 作品数：4 被引量：20H指数：3
- 相关作者：林矫矫蔡幼民傅志强刘金明李浩更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所中国农业科学院上海兽医研究所中国科学院上海生命科学研究院更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 噬菌体展示日本血吸虫SSj14单抗的模拟抗原表位及其免疫保护性研究被引量：9
- 2006年
- 为获得日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟抗原表位,研究其对日本血吸虫的免疫保护作用。用纯化的SSj14单抗筛选噬菌体随机12肽库,对33个克隆进行ELISA验证,获得30个阳性克隆,DNA序列分析表明这30个克隆分属11个多肽序列,分析比较发现这些多肽具有“H_NQ_X_S_PF_X_X_L_A_T”的相似基序。进而选取3个阳性单克隆及混合阳性噬菌体克隆进行Western_blotting实验,证明都有良好的抗原性。用它们免疫BALBc鼠,并攻击血吸虫尾蚴,观察免疫鼠抗血吸虫感染的保护效果和IL_12的变化,结果表明:筛选获得的噬菌体阳性克隆具有良好的免疫原性,能诱导免疫鼠产生高滴度的抗血吸虫的特异性抗体;和对照组鼠相比,免疫小鼠,分别获得13.84%～52.83%的减虫率,34.17%～65.47%的肝脏减卵率以及28.89%～73.78%的粪便减卵率;三次免疫之后,和对照组相比,免疫小鼠体内IL_12水平均有升高。为发展日本血吸虫疫苗提供了新思路、新途径。
- 王欣之傅志强黄劭鹏朱国强蔡幼民林矫矫
- 关键词：日本血吸虫噬菌体展示模拟抗原白细胞介素12
- 日本血吸虫Sj32KD抗原基因的克隆、表达及诊断应用被引量：9
- 2007年
- 目的开展日本血吸虫中国大陆株Sj32KD抗原基因研究,探讨其作为诊断抗原的潜力。方法应用PCR方法克隆Sj32KD抗原基因,并在大肠杆菌系统中进行表达,利用H is亲和层析方法纯化融合蛋白,并应用重组的Sj32KD抗原检测羊日本血吸虫病。结果克隆了ORF为1 272bP的日本血吸虫中国大陆株Sj32KD抗原基因,成功构建表达质粒Sj32-pET28 a,并在BL21(DE3)菌株中获得了分子量为47KD的特异性表达产物。应用Sj32KD重组抗原应用于检测羊日本血吸虫病,结果阴性血清的特异性为85.71%,阳性血清的敏感性为95.45%。结论成功克隆表达了日本血吸虫Sj32KD抗原,原核表达融合蛋白有一定的诊断应用潜力。
- 傅志强刘金明李浩苑纯秀蔡幼民林矫矫
- 关键词：日本血吸虫SJ32克隆表达
- 日本血吸虫保护性单克隆抗体SSj14识别模拟表位的筛选及其免疫原性分析
- 2007年
- 为分析日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟表位,观察其免疫保护作用,利用SSj14单抗筛选富集噬菌体的随机六肽库,应用免疫印迹法确定阳性克隆并分析其核苷酸序列,采用竞争ELISA法分析阳性克隆的抗原性,用筛选的阳性噬菌体克隆免疫小鼠进行日本血吸虫病免疫保护试验,计算减虫效果,并用ELISA法检测小鼠免疫前后的特异性抗体水平。结果显示,经3轮富集筛选后,免疫印迹法鉴定到4个阳性克隆,它们对SSj14单抗的抑制率分别为20.0%、40.8%、58.6%、61.5%,并分别在小鼠中诱导了7.42%、9.43%、11.74%、22.30%的减虫率。用噬菌体克隆免疫的小鼠均产生了较高水平的特异性抗体。结果表明,筛选到的阳性噬菌体克隆和SSj14单抗有较高的亲和力,并诱导了抗小鼠日本血吸虫的部分保护效果。
- 傅志强蔡学忠刘金明石耀军李浩吴祥甫蔡幼民林矫矫
- 关键词：日本血吸虫噬菌体展示模拟表位
- 日本血吸虫抱雌沟蛋白基因表达的性别与时相差异性研究被引量：3
- 2004年
- 用Southernblotting ,Northernblotting技术对所克隆的日本血吸虫抱雌沟蛋白编码基因SjGcp进行了性别和时期差异表达研究。结果显示日本血吸虫抱雌沟蛋白基因为雄虫特异性表达基因 ,在感染后第
- 金亚美林矫矫程国锋吴祥甫蔡幼民
- 关键词：日本血吸虫性别
