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过量表达cyp71av1和cpr基因提高青蒿中青蒿素的含量被引量：14: 2008年; 青蒿素是从青蒿植株地上部分提取的一种含有过氧桥结构的倍半萜内酯,是目前最有效的治疗疟疾的药物。为了提高青蒿中青蒿素的含量,根据GenBank中青蒿紫穗槐二烯氧化酶(CYP71AV1)和细胞色素P450还原酶(CPR)的基因序列设计特异引物,从青蒿cDNA中扩增出了cyp71av1和cpr基因片段,分别连上CaMV35S启动子和NOS终止子,然后将cyp71av1和cpr基因的表达盒依次插入到植物表达载体pCAM-BIA2300中,获得含有cyp71av1和cpr基因的植物表达载体p2300-GYR。通过农杆菌介导法转化青蒿,获得了20株转基因植株,PCR检测以及Southern杂交分析证实外源基因已被成功地导入青蒿基因组中。采用HPLC-ELSD测定转基因青蒿中青蒿素的含量,结果表明,大部分转基因青蒿中青蒿素的含量高于对照植株,其中,转基因青蒿中青蒿素含量最高约为对照的2.4倍。该研究证明过量表达cyp71av1和cpr基因是提高青蒿中青蒿素含量的有效方法。; 景福远张凌李美芽唐克轩; 关键词：青蒿青蒿素

丝状真菌的遗传工程研究进展被引量：8: 2010年; 丝状真菌在化学、医药和工业酶制剂等领域具有广泛的应用。提高丝状真菌的生产能力一直是真菌遗传改良的最终目标。随着现代分子生物学的发展,基于DNA水平和RNA水平的分子遗传操作技术被引入到真菌遗传改良之中,部分丝状真菌的生产能力得到了大幅度的提高,但是目前仍然无法对大量具有重要经济价值的真菌进行分子改良,主要原因之一是缺乏相应的转基因方法。本文综述了目前应用于真菌的转基因方法,以及利用这些方法在DNA水平和RNA水平上改良丝状真菌的最新研究进展。; 张田唐克轩; 关键词：丝状真菌代谢工程

在毕赤酵母中表达人溶菌酶蛋白的研究被引量：8: 2008年; 将化学合成的人溶菌酶基因hLYZ(444bp)构建到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZ上;载体质粒用Sac I线性化后电击法转化毕赤酵母菌株GS115,在含Zeocin的抗性培养基筛选后PCR鉴定获得了9株重组菌株。重组菌株经甲醇诱导后取表达上清液进行SDS-PAGE电泳和Western blot分析。结果显示,重组hLYZ在毕赤酵母中成功表达,在诱导60h时表达量最高。用镍亲和层析柱纯化重组hLYZ,用Bradford法测得其含量约为324mg·L-1。比浊法活性测定结果显示所表达的重组人溶菌酶活性达到4473U·mL-1。本研究利用毕赤酵母分泌型表达载体成功表达了重组人溶菌酶,并探索了简单有效的纯化和活性测定方法,为利用毕赤酵母系统规模化生产重组人溶菌酶奠定了技术基础。; 胡乔赵凌侠唐克轩; 关键词：人溶菌酶毕赤酵母生物活性

甜牛至精油含量和成分的周年变化研究被引量：3: 2010年; 甜牛至(Origanum majorana L.)是唇形科牛至属多年生草本芳香植物,其精油具有多种保健功效,其植物分部于欧洲、北非及亚洲各国,通常精油提取时间在5～10月,2000年在上海引种成功。为了研究其在上海地区不同季节的精油含量及成分的变化规律,设计了实验。实验过程对2008年11月份到2009年10月份上海交通大学农业工程训练中心的甜牛至植物进行了测量,精油提取以及精油成分的分析。结果表明,甜牛至精油含有率每百克鲜重(下同)一年中在0.048～0.420 mL范围内变动,2月份精油含有率最低,为0.048 mL,8月份精油含油率最高,为0.420 mL。通过GC-MS对各月甜牛至精油的成分进行了定性定量分析,从鉴定出来的化学成分中含有率在1%以上的成分按含有率的多少排序为:4-松油醇、芳樟醇、γ松油烯、α-松油烯、桧烯、α-松油醇、水合桧烯、β-石竹烯、异松油烯、对孟二烯一醇、二环大根香叶烯和月桂烯,其中4-松油醇的含量最高,在20.802%～32.460%范围内,月桂烯含量最低,在1.099%～2.023%范围内。以上结果为甜牛至在上海地区的产业化发展提供一定的参考。; 朱雯琪姚雷; 关键词：精油含量精油成分周年变化

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上海市科学技术委员会资助项目(055407060)