湖北省自然科学基金(2011CDB491)
- 作品数:4 被引量:35H指数:3
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- 青蒿琥酯抑制肝星状细胞microRNA-154/β-catenin治疗肝纤维化的机制研究被引量:17
- 2016年
- 目的探讨青蒿琥酯抑制肝星状细胞microRNA-154/β-catenin治疗肝纤维化的机制。方法培养大鼠肝星状细胞,用不同浓度(0、5、10、20、30、40μg/mL)青蒿琥酯作用于大鼠肝星状细胞,采用免疫印迹法(Western blot)检测青蒿琥酯作用后细胞内β-eatenin蛋白的表达;实时定量RT-PCR检测青蒿琥酯作用后细胞内的miR-154和β-eatenin mRNA的相对表达。结果 0-40μg/mL青蒿琥酯作用细胞24 h后,免疫印迹法结果显示,β-catenin蛋白量逐渐降低,并呈剂量相关性(P<0.05);实时荧光定量PCR结果显示青蒿琥酯作用后,β-catenin mRNA表达量及miR-154表达量逐渐降低,并呈剂量相关性(P<0.05)。结论青蒿琥酯可能是通过抑制microRNA-154表达作用于Wnt/β-catenin信号通路及来抑制肝纤维化的发生,microRNA-154与Wnt/β-catenin信号通路可能存在一定的相关性。
- 张英张洪彭锐魏丹芸
- 关键词:青蒿琥酯肝星状细胞WNT/Β-CATENIN信号通路肝纤维化
- 青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达的影响被引量:12
- 2015年
- 目的:探讨青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞增殖并可促进细胞凋亡的作用机制。方法:大鼠肝星状细胞体外培养,分别用含梯度质量浓度(0,1,5,12.5,25,37.5μg·ml-1)青蒿琥酯的培养基培养24 h。采用Western blot方法检测青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞HSC-T6内Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响;采用实时荧光定量PCR方法检测随着药物浓度的变化在RNA水平上的变化。结果:0-37.5μg·ml-1的青蒿琥酯作用大鼠肝星状细胞24 h后蛋白β-catenin和GSK-3β(ser9)逐渐降低(P〈0.05)并且有一定的剂量相关性,而GSK-3β逐渐升高(P〈0.05)。实时定量PCR结果提示,1-37.5μg·ml-1的青蒿琥酯能抑制β-catenin的表达,且呈剂量相关性。但是GSK-3β在低剂量青蒿琥酯(1-12.5μg·ml-1)的时候并无明显变化(P〉0.05),在高剂量青蒿琥酯(12.5-37.5μg·ml-1)抑制GSK-3β的表达(P〈0.05)。结论:青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞与Wnt/β-catenin信号通路相关。
- 张洪齐倩熊远果张英彭锐
- 关键词:青蒿琥酯大鼠肝星状细胞WNT/Β-CATENIN
- 青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响被引量:10
- 2013年
- 目的:探讨青蒿琥酯(Artesunate,Art)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖和凋亡的影响。方法:选用活性良好的HSCT6细胞进行体外培养,应用倒置显微镜观察药物作用后的细胞形态改变;用CCK-8测定不同浓度、不同时间Art对该细胞增殖的抑制作用的影响;用AnnexinⅤ和PI双染的流式细胞术检测HSC-T6的细胞凋亡率的影响。结果:①倒置显微镜结果显示,Art作用过的贴壁细胞数目变少、突触变短变细、细胞表面变皱、由星形变成圆形。②12.5~200μg·ml^(-1)的Art在0~72 h范围内对HSC的增殖有明显的抑制作用(P<0.01),抑制率有时间和剂量依赖性。③流式细胞仪结果显示随着剂量、时间的增加,凋亡率显著增加(P<0.05)。结论:Art能抑制HSC-T6细胞的增殖,并可促进细胞凋亡。
- 张洪詹慧沈瑶齐倩
- 关键词:青蒿琥酯增殖凋亡
- 苦豆碱对活化的LX-2细胞增殖及凋亡的影响被引量:1
- 2021年
- 目的研究苦豆碱对活化的人肝星状细胞LX-2增殖及凋亡的影响。方法CCK-8法检测给药24 h和48 h时苦豆碱对于转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))诱导后的LX-2细胞增殖的影响以及给药24 h时苦豆碱对于人正常肝细胞L-02生长的影响,设置给药质量浓度为20、40、60、80、100μg·mL^(-1),同时设置阴性对照组,流式细胞术检测苦豆碱作用于LX-2细胞24 h后,细胞周期及细胞凋亡的变化,RT-qPCR法和Western blot法测定细胞外基质Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ)mRNA及蛋白的表达,实验均设置阴性对照组、TGF-β_(1)组、TGF-β_(1)+苦豆碱(20、60、100μg·mL^(-1))组。结果CCK-8法结果显示,除给药质量浓度为20μg·mL^(-1)的给药组,其余各给药组细胞OD值较TGF-β_(1)诱导组显著降低(P<0.01,P<0.001),并且具有剂量依赖性;苦豆碱在60μg·mL^(-1)内对L-02细胞的生长抑制率均小于20%;流式结果表明,给药组细胞G1期比例显著提高(P<0.001),且除给药质量浓度为20μg·mL^(-1)的给药组,其余给药组细胞凋亡比例显著提升(P<0.001);RT-qPCR及Western blot结果显示,苦豆碱能够明显抑制Collagen-ⅠmRNA和蛋白表达(P<0.001)。结论苦豆碱能够抑制活化的LX-2细胞增殖,促进其周期阻滞及细胞凋亡,并减少Collagen-ⅠmRNA及蛋白的表达,同时对正常肝细胞毒性较小。
- 范月莹张洪冯豆宋玲谭佳杰
- 关键词:苦豆碱