安徽省优秀青年科技基金(2002-02)
- 作品数:8 被引量:30H指数:3
- 相关作者:傅先明牛朝诗汪业汉罗其中李健更多>>
- 相关机构:安徽省立医院上海第二医科大学附属仁济医院安徽省精神卫生防治中心更多>>
- 发文基金:安徽省优秀青年科技基金安徽省自然科学基金安徽省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 骨髓间质干细胞的分离培养及向神经细胞分化的研究被引量:17
- 2004年
- 目的 研究骨髓间质干细胞的分离培养方法及其向神经元细胞分化的条件及可行性。方法 取大鼠骨髓 ,采用贴壁培养筛选法 ,分离培养骨髓间质干细胞 ,经 β 巯基乙醇诱导 ,骨髓间质干细胞可向神经元样细胞分化 ,免疫细胞化学方法对分化细胞进行鉴定。结果 分离的骨髓间质干细胞可体外增殖 ,经 β 巯基乙醇诱导 ,骨髓间质干细胞可向神经元细胞分化 ,细胞突起增多 ,具有神经元的形态学特征 ;分化后的细胞表达神经元标志物 -神经元特异性烯醇化酶 (NSE)和神经微丝 (NF)。结论 骨髓组织中存在着骨髓间质干细胞 ,易分离和培养 ,体外可增殖 ,可横向分化为神经元 。
- 牛朝诗李健傅先明汪业汉
- 关键词:骨髓间质干细胞细胞分离细胞培养神经细胞细胞分化
- 反义基因片段抑制胶质瘤细胞IGF-IR基因表达的研究被引量:4
- 2002年
- 目的 探讨反义基因片段对胶质瘤细胞胰岛素样生长因子-I受体(IGF-IR)基因表达抑制作用的可行性。方法 应用RT-PCR技术和免疫细胞化学方法,并经图象分析以检测反义寡核苷酸作用后细胞IGF-IR基因的表达水平的变化。结果 反义寡核苷酸能有效地降低IGF-IR mRNA表达,并随着反义核苷酸浓度的增加,其mRNA水平逐渐减少。正义核酸组与空白对照组相比较,IGF-IR mRNA水平无显著性差异。免疫细胞化学方法和生物图象分析研究发现:反义核酸组细胞IGF-IR蛋白低表达或不表达,而空白对照组和正义核酸组细胞均呈高表达。结论 针对IGF-IR基因mRNA序列起始密码子及下游序列所设计的反义寡核苷酸能有效阻止mRNA的翻译功能,使其蛋白产物表达下调,达到封闭或减弱该基因表达的目的。
- 牛朝诗傅先明汪业汉罗其中
- 关键词:反义基因神经胶质瘤胰岛素样生长因子-1RT-PCR技术免疫细胞化学
- 精神分裂症患者社会功能的神经心理学研究被引量:1
- 2006年
- 目的:探讨精神分裂症患者的社会功能。方法:应用神经心理学方法,对精神分裂症患者社会问题解决能力进行研究。结果:精神分裂症患者社会问题解决能力较正常对照明显下降。结论:精神分裂症患者社会问题解决能力的损害可能是社会功能障碍的重要基础。
- 朱春燕汪凯李晓驷董毅靳胜春凤兆海
- 关键词:精神分裂症社会功能神经心理学
- 神经干细胞及其在中枢神经系统疾病中的应用被引量:3
- 2003年
- 牛朝诗傅先明汪业汉
- 关键词:神经干细胞中枢神经系统疾病神经修复神经前体细胞神经祖细胞
- 多聚凝胶介导IGF-IR反义寡核苷酸治疗体内胶质瘤的实验研究被引量:3
- 2004年
- 目的探讨反义寡核苷酸阻断IGF-IR基因表达对裸鼠移植胶质瘤的抑制作用。方法首先建立胶质瘤裸鼠移植模型,随机分为4组:空白对照组、多聚凝胶组、正义核酸组和反义核酸组,反义核酸组在瘤内注射多聚凝胶包裹的反义寡核苷酸,其他每组均作相应的瘤内注射处理。利用多聚凝胶缓释反义寡核苷酸的作用,观察肿瘤的抑制情况、肿瘤病理和IGF-IR表达结果。结果反义核酸组用反义核苷酸开始治疗后的第1周、第2周和第3周,肿瘤的生长速度明显减慢,与空白对照组相比,抑制率分别为65.2%、76.38%和69.6%;而多聚凝胶组和正义核酸组肿瘤生长速度与空白对照组相比无明显差异,其抑制率在各时间点均低于10%。肿瘤的组织病理发现多聚凝胶组、正义核酸组如同空白对照组(野生型),肿瘤细胞密集分布,呈明显的恶性增殖表现,而反义核酸组肿瘤细胞稀疏,可见部分细胞呈凋亡改变,细胞染色质浓聚边缘化。在空白对照组(野生型)、多聚凝胶组和正义核酸组IGF-IR蛋白均呈高表达,而反义核酸组IGF-IR的表达明显减弱。结论IGF-IR的反义寡核苷酸对体内胶质瘤的生长具有明显的抑制作用,并能诱导部分肿瘤细胞凋亡。因此,IGF-IR可作为胶质瘤基因治疗的靶。
- 牛朝诗傅先明汪业汉罗其中
- 关键词:IGF-IR胶质瘤反义寡核苷酸反义核酸凝胶
- IGF-IR反义寡核苷酸对胶质瘤细胞增殖的影响被引量:2
- 2003年
- 目的根据胰岛素样生长因子-受体(IGF-IR)基因序列设计了IGF-IRmRNA起始密码子下游的硫代磷酸型反义寡核苷酸和正义寡核苷酸,研究其对C6胶质瘤细胞的增殖作用。方法实验分为反义核酸组、正义核酸组和空白对照组,经细胞计数、MTT法研究反义核苷酸对胶质瘤细胞生长和增殖的抑制作用,并应用免疫细胞化学方法检测胶质瘤细胞IGF-IR和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。结果反义寡核苷酸能有效地降低IGF-IR基因的表达,抑制体外培养的胶质瘤细胞的增殖,其抑制作用24h显效,96h仍有作用,反义寡核苷酸的抑制效果与其作用浓度有关。而正义寡核苷酸对其无抑制作用。同时可见反义寡核苷酸抑制增殖作用中,能明显下调PCNA蛋白的表达。结论IGF-IR介导的IGF-I~IGF-IR的自(旁)分泌环对胶质瘤生长极其重要,通过IGF-IR反义寡核苷酸治疗能较有效地抑制胶质瘤细胞的增殖。
- 牛朝诗傅先明汪业汉罗其中
- 关键词:脑胶质瘤细胞增殖胰岛素样生长因子-1受体增殖细胞核抗原
- 反义IGF-Ⅰ R基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的流式细胞仪分析和电镜观察被引量:1
- 2003年
- 目的探讨反义胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的作用及其形态学的变化。方法根据IGF-ⅠRcDNA序列设计其正义、反义基因片段,并对部分碱基进行硫代磷酸修饰。实验分为空白对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组,应用流式细胞仪检测DNA含量,根据DNA直方图分析凋亡细胞发生率。应用透射电镜观察凋亡细胞的形态学变化。结果经反义寡核苷酸5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L等4种浓度处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(16.06±3.86)%、(24.52±4.84)%、(36.69±5.53)%和(43.85±5.72)%;而经同样浓度正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(3.76±1.22)%、(3.14±1.15)%、(2.51±0.93)%和(3.26±1.15)%;空白对照组(野生型)的自然凋亡率为(1.01±0.89)%。反义寡核苷酸组与空白对照组相比差异有显著性意义(P<0.05),而正义寡核苷酸组与空白对照组之间差异则无显著性意义(P>0.05)。透射电镜观察显示,凋亡细胞表现为细胞体积缩小,染色质凝聚,并聚集于核膜下呈新月状或块状,胞膜内陷形成膜包裹的核碎片或细胞器,最后出泡形成凋亡小体。结论反义IGF-ⅠR基因片段可诱导胶质瘤细胞发生凋亡。
- 牛朝诗傅先明汪业汉
- 关键词:反义寡核苷酸类脱噬作用
- 骨髓间质干细胞分化为神经细胞及移植应用的研究被引量:2
- 2004年
- 牛朝诗李健傅先明汪业汉
- 关键词:骨髓间质干细胞移植神经细胞细胞分化中枢神经系统损伤