公共文化服务平台

干扰selk对小鼠巨噬细胞非特异性免疫应答的影响: 目的探究硒蛋白K(selk)基因沉默对小鼠巨噬细胞增殖、吞噬和迁移的影响,阐明selk对预防手足口等病毒性疾病感染的免疫效应机制.方法制作并包装小鼠巨噬细胞selk慢病毒干扰株,将细胞分为未转染巨噬细胞(Mφ)、空载...; 王淼黄飞雁满云翔傅玉才张仁利; 关键词：巨噬细胞增殖迁移

2009年深圳地区肠道病毒71型毒株VP4基因进化分析被引量：1: 2013年; 目的对深圳地区手足口病（hand，foot and mouth disease，HFMD）肠道病毒71型分离株（enterovirus71，EV71）的VP4基因遗传进化进行分析。方法2009年采集深圳市儿童医院就诊的HFMD患者的粪便标本491份，选取其中8份经细胞培养鉴定为阳性的EV71毒株用RT-PCR扩增VP4基因，利用MEGA4．0软件进行遗传进化分析。结果2009年深圳地区8株EV71VP4基因全长207bp，编码69个氨基酸；8株EV71VP4基因核苷酸同源性为94．2％-98．1％，与深圳2001至2004年分离的17株EV71毒株核苷酸同源性在89．9％～98．1％，与GenBank中其他EV71病毒株VP4的核苷酸同源性为79．2％-100％；其中与亚洲流行株阜阳株（EU703812）核苷酸的同源性最高（100％），其次是C4代表株及2004年深圳株（AY895144）为94．2％～97．1％。除了印度株和其中1株EV71的VP4编码的氨基酸在第54位（ACA）不同之外，其余7株EV71VP4编码的氨基酸序列之间以及与GenBank报道的其他序列同源性达100％。8株EV71VP4基因核苷酸与c4代表株相比有17处不同，除1处以外其余全在简并密码位点上；轻重症病例毒株之间VP4基因序列未见明显改变。进化树显示8株EV71均属于C4基因亚型。结论2009年深圳市流行的EV71属于C4基因亚型，流行的EV71VP4基因非常保守，不属于变异区段，绝大部分核苷酸的变异属无义突变，VP4基因编码的氨基酸变异几乎为0。; 冼慧霞陈龙阳帆罗敏吴春利杨洪张海龙姚相杰何雅青; 关键词：肠道病毒属种系发生

硒蛋白K基因干扰对T淋巴细胞内质网钙稳定蛋白的影响被引量：1: 2017年; 目的探讨SelK mRNA干扰效果及其硒蛋白K(SelK)基因干扰后对细胞内质网钙稳态蛋白(endoplasmicreticulum calcium homeostasis protein,CHERP)的表达,观察T淋巴细胞内Ca^(2+)浓度的变化。方法从SelK m RNA(NM_019979.2)的编码序列中符合设计要求的靶位点设计特异性干扰SelK mRNA的RNAi片段,构建shRNA干扰载体靶向干扰SelK RNA,用核酸序列分析方法分析重组片段的正确性,利用荧光定量PCR和Westeron blot鉴定SelK mRNA的干扰效果,采用Real time-PCR的方法检测SelK干扰后细胞内的CHERP的变化。结果阳性重组载体可以被BamH I酶切。酶切片段序列分析重组子质粒结果与所设计片段完全一致,正确率为100.0%。三个ShRNA表现了不同的干扰效果,sh222、sh102和sh101的干扰效率分别为12.13%、16.46%和42.37%,在核酸水平上重组质粒sh101对SelK的干扰效果最佳,与sh222和sh102相比,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot检测重组质粒sh101在蛋白水平上的干扰效率为45.4%,干扰组细胞中CHERP的表达与对照组相比抑制率达到40.0%。结论重组质粒sh101对SelK在核酸和蛋白质水平上都有较好的干扰效率,SelK干扰对细胞中CHERP的表达有抑制的作用,或因此打乱了内质网与胞质中的钙离子平衡,从而影响到了细胞内游离的钙离子浓度,是导致T淋巴细胞激活的因素之一。; 杨永平李瑞敏黄亚兰刘渠金玉娟张仁利黄达娜

2011-2012年深圳市呼吸道腺病毒分子分型及其流行特征被引量：17: 2014年; 目的了解2011—2012年深圳地区致病性呼吸道腺病毒（AdV）的病原体基因亚型和遗传进化及其流行特征．分析深圳地区呼吸道腺病毒的流行规律和传播途径。方法收集2011年1月至2012年12月深圳地区31个流感样病例监测哨点2822份样本，先用荧光定量PCR方法筛查流感样病例，筛查后的阴性样本进一步进行呼吸道腺病毒等13种常见呼吸道病毒的核酸检测。对检测出的109份腺病毒阳性标本进行病毒分离，感染Hep-2受体细胞后共获得71份AdV稳定细胞毒株，用腺病毒六邻体基因作为靶基因，扩增其中的50份腺病毒阳性标本，纯化扩增产物后直接用于序列分析，在GenBank上进行序列比较，确定其病毒亚型并进行系统进化分析。结果2011—2012年深圳市腺病毒感染患者的高发年龄段人群为小于7岁的儿童，1～2岁婴幼儿发病率最高；4-6月和10—12月为每年发病高峰期。在2822份流感样病例咽拭子标本中，经定量PCR方法确定为AdV核酸阳性共109份，核酸阳性率为3．86％，从109份核酸阳性样本中分离病毒7l份，病毒分离率为68．93％。50份分离的呼吸道腺病毒分子分型结果为1型AdV6例，占12％；2型AdV4例，占8％；3型AdV27例，占54％；4型AdV3例，占6％；5型AdV4例，占8％；7型AdV5例，占10％；另外有复合型AdV（HAdV—un）1例，占2％。结论近两年来深圳地区呼吸道Adv感染以3型为主，腺病毒引起的呼吸道疾病主要发生在每年的4—6月，感染人群主要是1~2岁婴幼儿。; 刘滕颖子吕星黄达娜房师松吴春利阳帆王昕伍伟华彭博张仁利; 关键词：腺病毒分子分型

广东省深圳市流感流行特征分析被引量：8: 2016年; 目的掌握深圳市流感流行规律，了解甲流大流行以后流感的流行趋势。方法对深圳市流感样病例监测数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析。结果深圳市的流感样病例百分比（1LI％）为4．67％，呈逐年下降趋势，ILI年龄构成以0-4岁为主（占54．2％）。流感病毒分离平均阳性率为10．6％，按月分析流感病毒分离阳性率与ILI％变化趋势呈正相关（r=0．447，P=0．001）。全市报告了482起ILI暴发疫情，以乙型流感为主（占63．9％）。2010年深圳市季节性流感出现了春季和夏季流行高峰，分别以乙型Victoria系和甲型H1N1亚型为优势株；2011年为冬春季和秋季高峰，以甲型H1N1和季节性H3亚型为优势株；2012年出现了冬春季和夏季高峰，以乙型（Victoria系和Yamagata系）和季节性H3亚型为优势株；2013年出现了春、秋、冬季三个流行高峰，分别以甲型H1N1、季节性H3和乙型Yamagata系为优势株。结论深圳市季节性流感每年均出现2—3个流行高峰，分别在冬春季和夏秋季，每年流行高峰出现的时间不同，每年流行的型别不同。; 王昕房师松吕星彭博武伟华张仁利; 关键词：流感甲型H1N1流感

prM抗体在登革抗体依赖增强作用中的研究进展: 2016年; 登革病毒感染在热带和亚热带地区是一种常见的病毒性疾病,主要通过虫蚊叮咬感染人类。登革病毒分为四个亚型,异型二次感染时引起登革出血热和登革休克,抗体依赖增强作用在体内外已被证实是登革二次感染导致严重病症的主要机制。prM抗体具有潜在的抗体依赖增强作用活性和低中和能力。本文主要讨论prM抗体在登革病毒抗体依赖增强作用中的研究进展。; 王淼王超张仁利; 关键词：登革病毒

硒代蛋氨酸对小鼠巨噬细胞增殖及硒蛋白K的影响被引量：2: 2014年; 目的探究硒代蛋氨酸(Selenomethionine,Se-Met)对小鼠巨噬细胞的增殖及巨噬细胞中硒蛋白K(Selenopro-tein K,Sel K)的影响,并观察Sel K在小鼠巨噬细胞中的定位。方法加硒代蛋氨酸(Se-Met)培养巨噬细胞,用CCK-8法检测巨噬细胞的增殖活力,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹技术检测Se-Met对小鼠巨噬细胞中Sel K m RNA和Sel K蛋白表达的影响;用细胞免疫荧光法观察Sel K在巨噬细胞中的位置。结果 Se-Met能促进巨噬细胞的增殖,其中浓度为1μmol/L Se-Met在处理巨噬细胞24 h和48h后,能显著性地促进巨噬细胞的增殖(P<0.01);1μmol/L Se-Met能使巨噬细胞中Sel K的m RNA含量显著增加(24 h处理组,P<0.05;48 h处理组,P<0.01),另外,Sel K蛋白的含量也有所增加(48 h处理组,P<0.05)。浓度为100μmol/L Se-Met在处理巨噬细胞48 h后,能极显著性地抑制巨噬细胞增殖(P<0.01)。结果还显示Sel K蛋白与内质网标志物KDEL都存在于巨噬细胞内的相同位置上。结论 Se-Met在促进巨噬细胞增殖的同时,使存在于内质网上的Sel K增加。; 满云翔李瑞敏傅玉才张仁利; 关键词：巨噬细胞增殖内质网

干扰SelK对小鼠巨噬细胞非特异性免疫应答的影响被引量：2: 2015年; 目的探讨硒蛋白K(Selenoprotein K,SelK)基因沉默(RNA silence,RNAi)对小鼠巨噬细胞增殖、吞噬和迁移的影响。方法制作并包装小鼠巨噬细胞SelK慢病毒干扰株,将细胞分为未转染正常对照组、空载体慢病毒转染组和慢病毒干扰组。建立稳定干扰的巨噬细胞株后,应用实时定量RT-PCR法和蛋白质免疫印迹法检测SelK的干扰效率,分别应用CCK8法、巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和Transwell法检测细胞增殖、细胞吞噬能力和细胞迁移能力。结果与空载体慢病毒转染组相比,SelK慢病毒干扰组巨噬细胞的mRNA和SelK水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);48 h后,与空载体慢病毒转染组相比,慢病毒干扰组巨噬细胞的增殖受到了明显的抑制,差异有统计学意义(P<0.01),同时慢病毒干扰组巨噬细胞穿过小室的细胞数显著低于空载体慢病毒转染组(P<0.05),慢病毒干扰组巨噬细胞能吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量显著较少。结论 Selk基因沉默能使小鼠巨噬细胞的增殖、吞噬和迁移能力降低,从而改变其抗感染免疫能力。; 黄飞雁满云翔傅玉才张仁利; 关键词：巨噬细胞增殖迁移

重组人干扰素α-2b对流感病毒的体外抑制试验被引量：7: 2015年; 目的研究重组人干扰素（IFN）α-2b对流感病毒的体外抑制作用。方法将甲型H1N1流感病毒和乙型流感B／Y病毒接种到体外Vero细胞中，并添加不同浓度的IFNα-2b和奥司他韦共培养。观察并计算病毒空斑数，同时利用荧光定量RT-PCR法比较IFNα-2b和奥司他韦对流感病毒的体外抑制效果，利用荧光显微镜观察病毒核糖核蛋白（RNP）复合物的输出。结果病毒空斑试验显示，10μg／μL的IFNα-2b和10μg／μL奥司他韦对甲型H1N1流感病毒具有明显的抑制作用，病毒空斑数分别为7．5×10^8和15×10^8PFU／mL，其中，奥司他韦对病毒的抑制作用较IFNα-2b更强；同样，10μg／μL IFNα-2b和10μg/μL奥司他韦对乙型流感B／Y病毒均具有明显的抑制作用，病毒空斑形成单位分别为1．1×10^8和1．5×10^8PFU／mL。荧光定量RT-PCR检测结果显示，加入10μmol／L IFNα-2b和10μmol／L奥司他韦的培养基中甲型HlN1流感病毒和乙型流感B／Y病毒核酸扩增循环阈值（CT）均明显高于流感病毒单独培养组，其中，甲型H1N1流感病毒单独培养组、IFNα-2b和奥司他韦共培养组的病毒核酸CT值分别为16、26和35，乙型流感B／Y病毒单独培养组、IFNα-2b和奥司他韦共培养组的病毒核酸CT值分别为18、27和31。荧光显微镜观察病毒RNP复合物的输出发现，10μmol／LIFNα-2b能够有效损害感染Veto细胞内病毒RNP复合物的输出。结论IFNα-2b在体外对甲型H1N1流感病毒和乙型流感B／Y病毒均具有明显的抑制作用。; 彭雁忠张仁利郑立运张崇远刘利成; 关键词：干扰素Α-2B 奥司他韦流感病毒A型流感病毒B型体外研究

基孔肯雅病毒的流行概况被引量：2: 2019年; 基孔肯雅病毒(CHIKV)是由伊蚊传播的甲病毒,感染之后可引起基孔肯雅热,主要症状是突发高热和关节疼痛。CHIKV于20世纪50年代在坦桑尼亚首次被分离,迄今为止已经影响了数百个国家和地区,数亿人面临着感染的风险,近年来因其快速传播到加勒比海及美洲地区而备受关注。系统发育分析将CHIKV主要分为四个基因型:亚洲型、西非型、东/中/南非型和印度洋型,2017年有报道将亚洲型毒株中的美洲流行株和法属波利尼西亚株鉴定为一个新的基因型别:亚洲/美洲型。本综述的目的是概述全球范围内的CHIKV流行情况,掌握其传播特点,从而为疾病的预防和治疗提供数据基础。; 李佳李佳万成松万成松; 关键词：基孔肯雅病毒流行病学

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

国家自然科学基金(81273075)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(81273075)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈