国家自然科学基金(30100153)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
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- 秋水仙碱和长春新碱诱导L5178Y小鼠淋巴瘤细胞tk基因杂合性缺失分析
- 2006年
- 目的探讨秋水仙碱(Col)和长春新碱(V in)诱导tk基因分子突变类型及机制。方法挑选经Col,V in诱导的tk基因突变子(tk-/-)和自发突变体,提取基因组DNA,经等位基因特异性PCR扩增,杂合性缺失(LOH)分析等技术,分析其tk基因杂合性缺失。结果Col和V in诱导突变体的tk基因LOH发生率分别为91.5%和92.1%。由LOH分析结果显示,诱导突变体的LOH发生率在自发突变与诱导突变之间,大集落与小集落之间差异均没有显著性。结论Col和V in诱导的tk基因是以功能性等位基因缺失为主的分子突变。
- 袁健刘胜学刘晋祎曹佳
- 关键词：秋水仙碱长春新碱基因杂合性缺失
- 转基因鼠内外源基因比较的研究进展
- 2003年
- 转基因鼠在用于突变检测的同时 ,必须考虑外源基因突变在多大程度上代表内源基因的突变 ,即检测的一致性。本文综述了目前常见的几种转基因鼠 ,其内源性Hprt和Dlb 1基因与外源性LacI、LacZ和rpsL基因在突变频率、突变位点、突变类型等方面的比较结果 ,并阐述了转基因鼠在毒理学研究中的应用前景和亟待解决的问题。
- 袁健
- 关键词：转基因鼠
- 昆明山海棠总生物碱诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变的研究被引量：6
- 2003年
- 目的 :研究昆明山海棠 (THH)总生物碱对小鼠淋巴瘤L5 178Y细胞tk基因的影响。方法 :用抽提的THH总生物碱对L5 178Y细胞进行浓度梯度染毒 ,不同时间点进行单细胞微孔接种 ,计数阳性集落 ,测定细胞接种效率、相对存活率、相对悬浮增长率和突变频率。结果 :随着THH总生物碱作用剂量的增加 ,L5 178Y细胞相对存活率和相对悬浮增长率均明显下降 ;在 0 .1～ 2 .0 g·L-1范围内可诱导细胞tk位点的突变 ,诱发突变频率是自发突变频率的 2～ 9倍。在tk位点诱发了两种不同表型的突变集落 ,即大集落与小集落 ,但以大集落为主 ,这一现象可能与THH的作用机制有关。结论 :THH总生物碱对L5 178Y细胞具有肯定的细胞毒性与诱导基因突变作用。
- 刘胜学曹佳袁建黄萍帅培强本间正充
- 关键词：昆明山海棠总生物碱淋巴瘤细胞TK基因突变中药
- 高能微波辐射对小鼠淋巴瘤细胞的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究高能微波(HPM)对小鼠淋巴瘤L5178Y3.2.7c-tk+/-细胞的影响,以明确高能微波的致突变性和细胞毒性。方法微波频率为7.9 GHz,功率为10.0 mW/cm2,以不同的时间(0～75 min)辐照L5178Y细胞,分别进行细胞毒性、细胞接种效率、相对悬浮生长率和tk基因突变率的测定。结果随微波照射时间的延长,L5178Y细胞的相对存活率和悬浮生长率明显降低,照射75 min时分别降低51.4%和89.7%。最长照射时间诱导L5178Y细胞tk基因的突变率是阴性对照突变率1.5倍,尚未达到2倍,未见明显致突变性。结论HPM对L5178Y细胞具有明显的细胞毒性,但未见明显诱导tk基因突变。
- 袁健曹佳刘辉杨录军刘寒李奇惠熊燕
- 关键词：致突变作用L5178Y细胞
- 纺锤体毒剂诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 研究纺锤体毒剂长春新碱和秋水仙碱对小鼠淋巴瘤L5 178Y3 .2 .7c -tk+ - 细胞tk基因突变的影响。方法 使用长春新碱和秋水仙素对L5 178Y细胞进行梯度染毒 ,再分别进行细胞毒性 ,细胞接种效率 ,相对存活率 ,相对悬浮生长率和突变频率测定。结果 随着长春新碱和秋水仙素剂量的增加 ,L5 178Y细胞的相对存活率和悬浮生长率均明显下降。在长春新碱 0 .5～ 2 .5ng ml,秋水仙素 10～ 5 0ng ml范围内可以诱导细胞tk基因的突变率达到自发突变率的 1～ 3倍。结论 长春新碱和秋水仙素对L5 178Y细胞具有明显的细胞毒性 。
- 袁健刘胜学曹佳
- 关键词：长春新碱秋水仙素致突变作用L5178Y细胞
- 硝酸羟胺诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因杂合性缺失分析
- 2009年
- 目的探讨tk基因分子突变的类型,对不同剂量硝酸羟胺诱导小鼠淋巴瘤L5178Y3.2.7c-tk+/-细胞tk基因突变的杂合缺失进行分析。方法使用硝酸羟胺50～500mg/L剂量对L5178Y细胞进行梯度染毒,分别测定细胞毒性,细胞接种效率,相对悬浮生长率和突变频率。挑选经硝酸羟胺诱导的tk基因突变子(tk-/-)和自发突变体,提取基因组DNA,经等位基因特异性PCR扩增,杂合性缺失(LOH)分析等技术,分析其杂合性缺失的发生。结果大集落和小集落诱导突变体tk基因LOH发生率分别为62.2%和98.9%。由LOH分析的实验结果显示,诱导突变体的LOH在LC与SC之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论功能性等位基因缺失是HAN诱导tk基因分子突变的重要形式之一,在不同集落类型之间可能具有不同的突变机制。
- 袁健刘辉田原周林杨春梅贾庆军曹佳刘晋祎
- 关键词：硝酸羟胺杂合性缺失分析L5178Y细胞
- 小鼠淋巴细胞hprt基因突变检测的研究进展
- 2006年
- 肿瘤的发生、发展与突变事件密切相关。人类在环境中接触的突变剂的检出依赖于致突变试验。以次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(hypoxanthine-guaninephosphoribosyltransferase,hprt)基因为报告基因的hprt突变试验是几个重要的致突变试验之一,其优点在于不仅能检测出突变剂的致突变能力大小,还可以对突变体进行突变谱分析,并且能为多种与hprt基因突变相关的人类疾病提供研究资料。以小鼠啮齿动物为试验模型的淋巴细胞hprt基因突变试验近年来得到广泛应用,本文对其研究进展作一综述。
- 杨录军曹佳
- 关键词：HPRT突变突变谱淋巴细胞
