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山东省自然科学基金(2004ZX06)
作品数:
2
被引量:6
H指数:2
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曹莉莉
李杰
时昌文
赵霞
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丙戊酸钠诱导肝癌细胞HepG2凋亡及其机制探讨
被引量:2
2007年
目的观察丙戊酸钠对肝癌细胞系HepG2的诱导凋亡作用并通过检测Caspase3、Caspase8、Caspase9的活性及蛋白表达探讨其诱导凋亡的机制。方法经0.75~4.0mmol/L丙戊酸钠诱导后,流式细胞仪Annexin V/PI双标法分析细胞凋亡的变化;分光光度法检测Caspase3、Caspase8、Caspase9活性;流式细胞仪间接免疫荧光法定量分析Caspase3、Caspase8、Caspase9蛋白表达。结杲丙戊酸钠可明显诱导HepG2细胞凋亡,并且此作用呈时间、剂量依赖趋势;经过丙戊酸钠诱导,Caspase3、Caspase9活性及蛋白表达被上调,较对照组明显升高(P〈0.001),Caspase8活性及蛋白表达未见明显改变(P〉0.05)。结论丙戊酸钠可明显诱导HepG2肝癌细胞凋亡,此作用通过激活内源性凋亡途径实现。
时昌文
赵霞
李杰
曹莉莉
孙京杰
关键词:
肝肿瘤
肝癌细胞系
凋亡
应用丙戊酸钠调节组蛋白乙酰化修饰抑制肝癌细胞增殖的作用及机制
被引量:4
2008年
目的观察应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠调节染色体组蛋白低乙酰化水平对肝癌细胞增殖的作用,并进一步检测Cyctin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Waf/cip1蛋白及mRNA表达变化,探讨其分子作用机制。方法应用0.75~4.0mmol/L丙戊酸钠作用于肝癌细胞系HepG2细胞后,MTT法检测细胞生长抑制、细胞克隆形成试验观察克隆形成率、碘化丙啶标记流式细胞术检测细胞周期、间接免疫荧光法分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Waf/cip1蛋白表达,RT—PCR检测分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Waf/cip1 mRNA表达。结果0.75~4.0mmol/L丙戊酸钠作用24、48、72、96h,观察组出现了时间-剂量依赖趋势的生长抑制,同时细胞克隆形成率显著降低,对照组细胞增殖周期G1、S、M期所占比例未见明显改变,而观察组则随药物浓度、作用时间的不同而出现不同程度的细胞增殖周期G1期阻滞,G1期比例由55.4%~82.8%不等,差异有统计学意义(P〈0.01)。观察组Cyclin A、Cyclin D1蛋白及mRNA表达均被明显下调而P21^Waf/cip1蛋白、mRNA表达则被明显上调,与对照组比较差异均有统计学意义(均P〈0.01);而Cyclin E蛋白和mRNA表达变化则未见明显差异(P〉0.05)。结论通过应用特异性组蛋白脱乙酰酶抑制剂调节组蛋白乙酰化修饰可明显抑制肝癌细胞生长、抑制细胞克隆形成、阻滞细胞增殖周期于G1期;丙戊酸钠作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂可明显抑制肝癌细胞增殖,其作用机制是通过上调P21^Waf/cip1 mRNA蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin A mRNA蛋白表达分别和/或协同实现。
时昌文
赵霞
李杰
于振海
孙京杰
曹莉莉
关键词:
肝肿瘤
丙戊酸钠
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