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清远麻鸡禽白血病净化效果的观察被引量：6: 2012年; 为了研究清远麻鸡禽白血病的净化效果,试验选用某清远麻鸡祖代鸡场所有祖代鸡,于8周龄和20周龄时进行连续3个世代的泄殖腔拭子采样,使用BioChek公司禽白血病抗原检测试剂盒进行禽白血病抗原ELISA检测,及时淘汰阳性鸡,同时加强清远麻鸡祖代鸡群禽白血病净化的饲养管理和种蛋孵化过程管理,并比较3个世代禽白血病的净化效果。结果表明:该场清远麻鸡祖代鸡在第1世代(G1)阳性率较高,20周检测的阳性率为14.01%,其中公鸡的阳性率为19.04%,母鸡阳性率为8.16%;第2世代(G2)20周检测的阳性率为9.05%,其中公鸡的阳性率为15.52%,母鸡的阳性率为8.16%;第3世代(G3)20周检测的阳性率为4.15%,其中公鸡的阳性率为6.93%,母鸡的阳性率为3.40%。说明清远麻鸡祖代鸡群经过3个世代的净化取得显著效果。; 黄兴国高明超王政富蔡丽丽王俊峰黄淑坚; 关键词：清远麻鸡禽白血病 ELISA检测

一株基因Ⅸ型鸭源新城疫病毒F基因的克隆及序列分析被引量：6: 2012年; 从广东地区疑似患有新城疫的病死雏番鸭群中分离到1株新城疫病毒,命名为GD1002株。毒力测定结果表明,致死鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)、6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)分别为56.0h、1.64、2.29,符合强毒株的毒力判断标准。利用RT-PCR扩增了该分离株F基因的主要功能区片段,并进行了克隆与序列分析。该分离株F蛋白裂解位点的组成为112 R-R-Q-R-R-F117,具有典型新城疫强毒株的分子特征。F基因第47-420nt片段基因分型分析表明,该流行株属于基因Ⅸ型。相似性及遗传进化分析结果表明,该分离株与基因Ⅸ型毒株F48E9、JS/1/97/Ch和FJ/1/85/Ch株有较高同源性和较近的亲缘关系。; 袁远华王俊峰蔡丽丽黄兴国梁小英曹伟胜黄淑坚; 关键词：新城疫病毒 F基因克隆

新城疫流行株GX-08全基因序列分析及其对鸭的致病性研究被引量：1: 2011年; 2008年从患病免疫鸡群中分离到1株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)流行株,经致病指数测定为强毒株,编号为GX-08。致病性试验表明,GX-08株对鸭具有感染性和致病性。参照GenBank发表的NDV基因序列设计10对特异性引物,采用RT-PCR方法对GX-08株全基因组序列分段进行扩增。拼接后序列分析表明GX-08株的全基因组序列总长为15192 nt,包含6个开放阅读框,分别编码6种蛋白质NP、P、M、F、HN和L。F基因裂解位点处的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株氨基酸序列特点。F基因第47—420位片段基因分型分析结果表明,该流行株属于基因Ⅶ型。; 王俊峰蔡丽丽吴志新龚中贵黄兴国曹伟胜黄淑坚; 关键词：新城疫病毒致病性试验遗传进化分析

清远麻鸡禽白血病病理组织学观察和PCR诊断被引量：5: 2012年; 本试验选择临床症状明显、经禽白血病抗原检测为阳性的15只祖代清远麻鸡,采集肝脏、脾脏、肾脏等器官进行病理组织学观察和PCR诊断。结果显示,从病理组织切片中观察到肝脏、肾脏、脾脏、骨髓、腺胃、心脏、肺脏、胰腺和卵巢等组织中有大量的淋巴母细胞呈灶状增生或散在分布,以及少量的成髓细胞增生。禽白血病病毒主要侵害祖代清远麻鸡机体的内脏器官和骨髓,对大脑等神经组织损害较轻;PCR扩增结果表明,所采集的15份样品均能扩增出545bp左右的特异性片段,证明15份组织样品中均存在J亚型禽白血病病毒。; 黄兴国王政富高明超蔡丽丽王俊峰黄淑坚; 关键词：清远麻鸡禽白血病病理组织学 PCR

清远麻祖代鸡群禽白血病感染研究被引量：2: 2011年; 采用禽白血病抗原检测试剂盒对8、12、20和26周龄的同一清远麻祖代鸡群泄殖腔拭子样品各500份进行ELISA检测,结果显示:抽检鸡群在不同周龄的禽白血病阳性率分别为5.2%、9.4%、12.6%和8.6%,清远麻祖代鸡白血病的排毒高峰在20周龄,是进行禽白血病抗原检测的最佳时期。; 黄兴国王政富高明超蔡丽丽王俊峰黄淑坚; 关键词：禽白血病 ELISA 血清学调查

1株番鸭源新城疫病毒的分离鉴定及其部分生物学特性分析: 2013年; 从广东地区某养鸭场的患病雏番鸭群中分离到1株病毒,该病毒能凝集鸡红细胞,且这种特性可被ND标准阳性血清所抑制,但不能被减蛋综合征-76阳性血清以及禽流感H5、H7和H9阳性血清抑制。运用特异引物进行PCR扩增,能扩增出大约520bp长度的目的片段。毒力测定结果表明,MDT、ICPI、IVPI分别为56.0h、1.64、2.29,符合新城疫病毒强毒株的毒力判断标准。; 黄兴国王俊峰蔡丽丽王政富黄淑坚; 关键词：新城疫病毒番鸭生物学特性

新城疫病毒GX-08流行株对鸡和鸭的致病性研究: 2012年; 选取新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)GX-08株对26日龄雏鸡和20日龄雏番鸭进行人工感染试验,对体外细胞培养物进行致病性试验,并进行病理组织学观察。结果表明,以105.5 EID50的攻毒剂量对26日龄雏鸡和20日龄雏番鸭通过肌注接种,雏鸡的发病率和死亡率分别为100%和100%,雏番鸭的发病率和死亡率分别为70%和70%;通过点眼、滴鼻及口服接种,雏鸡的发病率和死亡率分别为80%和30%,雏番鸭的发病率和死亡率分别为20%和20%。感染鸡消化器官和部分呼吸器官病变严重,表现出典型的嗜内脏型NDV感染的病理变化特点;感染鸭则肝脏、脾脏和胰腺等实质器官病变明显,消化器官和部分呼吸器官病变较轻微。以200TCID50的剂量对单层鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸭胚成纤维细胞(DEF)接种,结果CEF和DEF均于24h左右开始出现病变,并分别于96和84h左右细胞单层完全被破坏。与CEF相比,DEF接种病毒后,细胞坏死、裂解过程迅速,合胞体形成现象显著,合胞体的数量及合胞体平均含有的胞核数较多,病毒接种后培养物上清的HA效价峰值也较高,表明GX-08株均可致CEF和DEF病变,且对DEF有更强的细胞融合能力。; 黄兴国蔡丽丽王俊峰王政富黄淑坚; 关键词：新城疫病毒病理变化细胞病变

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广东省科技厅农业攻关项目(2009B020418003)