湖南省自然科学基金(10JJ9018)
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 相关作者：谢红付田黎明杨婷李吉胡威更多>>
- 相关机构：中南大学南华大学华中科技大学更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- β联蛋白对过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞增殖活性及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响被引量：6
- 2015年
- 目的 观察高表达的β联蛋白对过氧化氢（H2O2）诱导衰老人皮肤成纤维细胞（HSF）增殖活性以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响.方法 实验分3组.HSF细胞分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/LH2O2处理2h.噻唑蓝检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,RT-PCR和Western印迹分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达.结果 HSF＋空载体组、HSF＋空载体＋H2O2组、HSF＋β联蛋白＋H2O2组细胞增殖活性分别为0.792±0.012、0.462±0.012、0.521±0.015,细胞凋亡率分别为（3.407±0.217）％、（24.555±1.793）％、（15.360±0.755）％,各组比较,差异有统计学意义（均P＜ 0.01）.HSF＋空载体＋ H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.333±0.003和0.336±0.004）明显低于HSF＋空载体组（分别为0.507±0.013和0.514±0.021）,两组比较,均P＜ 0.01.HSF＋β联蛋白＋H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平分别为0.404±0.006和0.411±0.005明显高于HSF＋空载体＋H2O2组,两组比较,均P＜ 0.01.HSF＋空载体＋H2O2组Bax mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.451±0.002和0.460±0.008）明显高于HSF＋空载体组,两组比较,均P＜ 0.01.HSF＋β联蛋白＋H2O2组BaxmRNA和蛋白水平（分别为0.339±0.012和0.346±0.013）明显低于HSF＋空载体＋H2O2组,两组比较,均P＜0.01.结论 高表达的β联蛋白能够提高衰老人皮肤成纤维细胞增殖活性.
- 田黎明谢红付李吉杨婷彭圆胡威
- 关键词：细胞衰老基因,BCL-2
- 氧化应激所致的人皮肤成纤维细胞衰老中β-连环蛋白的表达研究被引量：9
- 2011年
- 目的 观察β-连环蛋白在氧化应激所致的人皮肤成纤维细胞衰老中的变化,探讨其在应激诱导的皮肤衰老中可能的作用.方法 从儿童包皮分离培养原代成纤维细胞,H2O2：处理第2～4代人皮肤成纤维细胞,显微镜观察其形态学改变,β-半乳糖苷酶细胞衰老试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性,RT-PCR、Western印迹检测β连环蛋白mRNA和蛋白表达水平.结果 150 μmol/L H2O2：处理2 h后可以诱导人皮肤成纤维细胞衰老.在应激诱导的衰老（SIPS）细胞中β-半乳糖苷酶阳性率达到（37.67±1.53）%.而对照细胞中只有（2.97±0.25）%,两组差异有统计学意义（P〈0.01）.RT-PCR 结果显示,在对照细胞组β连环蛋白/GAPDH mRNA比值为0.59±0.04,SIPS细胞组为0.29±0.30,对照细胞组明显高于SIPS细胞组,两组差异有统计学意义（t=10.06,P〈0.01）.Western印迹结果显示,对照细胞组β连环蛋白/GAPDH蛋白比值为0.62±0.03,SIPS细胞组为0.31±0.01,对照细胞组明显高于SIPS细胞组,两组差异有统计学意义（t=14.97,P〈0.0）.结论 150 μmol/L H2O2：处理2 h可以诱导人皮肤成纤维细胞发生衰老改变,SIPS细胞中β连环蛋白表达水平明显降低,初步推测β连环蛋白可能是调控皮肤衰老的重要靶基因.
- 田黎明谢红付李吉杨婷王玮蓁胡耀华
- 关键词：成纤维细胞Β连环素细胞衰老
- β联蛋白对体外过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察高表达的D联蛋白对体外过氧化氢（H2O2）所致正常人皮肤成纤维细胞（NHSF）衰老表型的影响。方法NHSF分别转染pcDNA3．1-β联蛋白或空载体pcDNA3．1，然后150μmol／LH2O2处理2h。实验分为转染H2O2处理组（NHSF＋β联蛋白＋H2O2）、转空载体H2O2处理组（NHSF＋空载体＋H2O2）以及转空载体组（NHSF＋空载体）。用RT—PCR和Western印迹分析β联蛋白的表达，显微镜观察细胞形态，试剂盒检测衰老相关的β半乳糖苷酶（SA—β—gal）、细胞活性氧（ROS）以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。所有数据均用SPSS13．0软件进行统计分析，多组间比较采用ANOVA检验。结果pcDNA3．1-β联蛋白明显上调了NHSF中β联蛋白的表达。NHSF＋空载体＋H2O2组β联蛋白mRNA和蛋白水平（与GAPDHmRNA和蛋白的比值分别为0．2900±0．0195和0．3130±0．0171）明显低于NHSF＋空载体组（分别为0．5963±0．0400和0．6190±0．0090），两组比较，均P〈0．05；NHSF＋β联蛋白＋H2O2组β联蛋白表达水平（0．7953±0．0074）高于NHSF＋空载体＋H2O2组（P〈0．05）。SA—β—gal染色率在NHSF＋空载体组、NHSF＋空载体＋H2O2组、NHSF＋β联蛋白＋H2O2组分别为（2．9667±0．2517）％、（37．70±0.9539）％、（29．330±0．6359）％，各组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。NHSF＋空载体、NHSF＋空载体＋H2O2、NHSF＋β联蛋白＋H2O2组ROS活性分别为（50．9963±9．2688）％、（109．9190±11．5215）％、（75．1063±3．0138）％，SOD水平分别为（88．0856±3．9181）、（35．5585±3．4438）、（61．7029±3．1716）U／mg，各组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论高表达的β联蛋白能够抑制细胞衰老相关β-半乳糖甘酶（SA-β-gal）和细胞活性氧（ROS）的表达，同时上调了SOD的活性。
- 田黎明谢红付李吉杨婷胡威彭圆
- 关键词：Β连环素过氧化氢成纤维细胞氧化性应激细胞衰老
- β-catenin在不同年龄人群非曝光部位皮肤组织中的表达及意义被引量：1
- 2013年
- 目的检测β-catenin在不同年龄人群非曝光部位皮肤组织中mRNA和蛋白的表达水平,初步探讨β-catenin在人皮肤年代老化过程中的意义。方法收集62例急腹症手术患者非曝光部位的皮肤标本,根据年龄分为三组:即青年组(<20岁)、中年组(30~45岁)和老年组(>65岁),用RT-PCR及Western blot检测每例皮肤组织中β-catenin mRNA和蛋白的表达量,分析不同年龄组之间β-catenin表达水平的差异。结果青年组、中年组和老年组β-catenin/GAPDH mRNA的表达水平分别是0.603 8±0.012 1,0.513 9±0.015 4和0.256 2±0.011 4,三组间比较的差异均有统计学意义(P<0.01),青年组与中年组,青年组与老年组,中年组与老年组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);青年组、中年组和老年组β-catenin/GAPDH蛋白的表达水平分别是0.631 5±0.013 5,0.548 6±0.012 9和0.327 4±0.021 9,三组间比较差异均有统计学意义(P<0.01),青年组与中年组,青年组与老年组,中年组与老年组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论随着年龄的增长β-catenin的表达水平随之减少,推测人皮肤年代老化可能与β-catenin的表达下调有一定的关联性。
- 田黎明谢红付杨婷李吉胡威彭圆
- 关键词：Β-CATENIN皮肤
