北京市科委重大科技项目(SKW06-9-06)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 不同浓度A2E对离体猪视网膜色素上皮细胞的影响
- 2008年
- 目的评价体外合成的A2E对猪视网膜色素上皮(RPE)细胞的细胞活力和生物学特性影响,为进一步研究A2E在RPE细胞相关疾病中的作用提供细胞模型。方法利用全反式视黄醛和乙醇胺体外合成脂褐质荧光基团A2E。不同浓度的A2E(0,50,75,100μmol/L)作用第3代体外培养的猪RPE细胞30,45,60,90min,换10%FBS DMEM-F12培养液孵育24h后,倒置荧光显微镜观察荧光强度,IPP6.0软件灰度扫描定量荧光强度。采用MTT法检测A2E作用细胞各个时间段的吸光度值,应用SPSS11.0软件包对数据进行统计学分析,评价A2E的细胞毒性及RPE细胞活性。结果A2E被RPE细胞摄取后主要分布于细胞核周围,具有自发荧光。MTT实验及荧光灰度扫描结果显示,不同浓度的A2E被细胞摄取后细胞活力和荧光灰度扫描结果不同,以50μmol/L浓度A2E作用RPE细胞60min时,细胞内荧光强度高同时细胞活力强。结论体外培养的猪RPE细胞摄取体外合成的50μmol/LA2E 60min后细胞对A2E的摄取较多,A2E对细胞的毒性相对较低,该条件下进行A2E对离体猪RPE细胞的研究较好。
- 陈晓勇李颖黄琛王薇
- 关键词：视网膜色素上皮细胞细胞培养
