国家自然科学基金(31160354)
- 作品数：10 被引量：19H指数：3
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- 链格孢菌毒素能诱导中国月季产生抗蚜活性的细交链孢菌酮酸（英文）被引量：2
- 2015年
- 目的:研究链格孢菌毒素能诱导中国月季植株产生对月季长管蚜的抗性,从而证实寄主植物介导的病虫互作关系的存在,并研究其互作机制。创新点:证实了一种对寄主植物和害虫均无毒性的真菌毒素能使寄主植物产生对昆虫的诱导抗性。方法:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基培养链格孢菌获得毒素粗品,大孔树脂纯化后配制成不同浓度的溶液,喷施到中国月季植株上。处理结束后接种月季长管蚜,与对照相比,计算毒素处理对蚜虫的抑制百分数。用高效液相色谱法(HPLC)结合标准品分析毒素中是否存在细交链孢菌酮酸(TeA),并测定其含量。TeA同法处理中国月季植株,测定TeA对蚜虫的抑制率,并与毒素粗品比较。再通过HPLC法测定植物体表和体内残留的TeA,以证明TeA能自然降解完全。结论:(1)链格孢菌粗毒素和对照品TeA均能使中国月季植株产生对月季长管蚜的系统诱导抗性,显著降低月季长管蚜对中国月季的危害;(2)链格孢菌粗毒素中的主要抗蚜活性成分是TeA,TeA有望成为中国月季上具有抗蚜活性的先导化合物;(3)粗毒素和对照品TeA对蚜虫和植物均无伤害作用,但能激活植物对虫害的诱导抗性(ISR)和系统获得性抗性(SAR),可直接证实二者间存在着寄主植物介导的间接的病虫互作关系。
- Fa-zhong YANGBin YANGBei-bei LIChun XIAO
- 关键词：诱导抗性
- 中国月季感染白粉菌后的蛋白质和糖类含量变化被引量：1
- 2016年
- 为了对寄主植物介导的间接病虫互作机理研究奠定基础,采用光度分析法研究白粉菌侵染中国月季植株对植物体内糖类和蛋白质含量的影响。结果表明:中国月季(Rosa chinensis)感染白粉菌(Sphaerotheca pannosa)后,随着感病时间的延长,蛋白质含量逐渐下降,而总糖含量则呈先升高后降低的趋势;白粉菌侵染对中国月季叶片蛋白质和总糖含量的影响均存在明显的时间效应,随着感病程度增加,蛋白质和总糖的含量均明显降低,蛋白质含量从73.52 mg/g降低至59.92 mg/g,总糖含量从17.84 mg/g降低至8.94mg/g。
- 杨发忠杨德强杨斌
- 关键词：中国月季白粉菌总糖蛋白质
- 白粉菌侵染中国月季对甜菜夜蛾幼虫乙酰胆碱酯酶活性的影响被引量：2
- 2015年
- 采用光度法研究中国月季感染白粉菌对甜菜夜蛾幼虫体内蛋白质含量和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,为寄主植物介导的间接的病虫互作机制研究提供依据。结果表明,中国月季感染月季白粉菌后对取食中国月季的甜菜夜蛾产生了不利影响,使幼虫蛋白质含量和乙酰胆碱酯酶活性降低。取食感病中国月季叶片9 d后,与取食健康叶片相比,幼虫体内蛋白质含量下降了81.77%(P<0.01),同时,AChE比活力为8.89μmol/(mg·min),下降了68.03%(P<0.01)。AChE的米氏常数(Km)和最大反应速率(v_(max))也受到明显影响,Km增大(P<0.001)、v_(max)减小(P<0.001),均表明AChE活性降低。从昆虫生理学角度证明,白粉菌侵染中国月季对甜菜夜蛾造成的抑制作用与幼虫体内蛋白质含量变化和AChE活性变化有关。
- 杨发忠杨德强杨斌孙浩
- 关键词：甜菜夜蛾中国月季白粉菌乙酰胆碱酯酶
- 中国月季上两株链格孢属真菌的分离鉴定及TeA毒素的测定被引量：3
- 2018年
- 细交链格孢菌酮酸(Te A)是链格孢菌毒素中最为重要的一种,其在适合的浓度对月季没有伤害而对月季长管蚜有趋避作用。从中国月季上分离纯化得到的两株链格孢属真菌,编号为0363和0645,经过培养性状对比、ITS和18S基因序列分析及显微形态观察,鉴定0363为链格孢(Alternaria alternate.Keissler),0645为细极链格孢(Alternaria tenuissima)。用有机溶剂对两株菌株的毒素进行提取,得到的毒素粗提物利用HPLC分析测定,结果表明,两株菌的毒素粗提物中均含有细交链格孢菌酮酸(Te A)。以上研究结果为中国月季病虫害的防治及寄主植物介导的间接病虫互作机理研究提供实验材料和理论依据。
- 李云仙李永梅李永梅李靖
- 关键词：中国月季链格孢菌毒素
- 中国月季感染白粉菌后矿质元素种类和含量的变化被引量：2
- 2016年
- 采用电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-OES)法测定了中国月季感染白粉菌前后矿质元素种类和含量的变化。测定的16种矿质元素,从健康中国月季中都能检出;而从感病后的中国月季中仅有14种检出,并且含量发生了明显变化。感病后K、Ca、Mg、Si、Na、Se等元素含量显著降低,其中Si含量降低程度最大,为62.62%;而Al、Cu含量增加程度最大,分别为810.71%、656.20%,且Al的含量高达528.12μg/g。结果表明,白粉菌侵染诱导了中国月季生理生化发生变化。分析了白粉菌侵染中国月季后对中国月季上昆虫甜菜夜蛾产生抑制作用的原因。研究结果为病虫互作关系及其互作机制的研究奠定了基础。
- 杨发忠董智森肖春
- 关键词：中国月季ICP-OES
- CYP74A2在白粉菌诱导月季对甜菜夜蛾产生抗性中的功能及其生物信息学分析
- 2023年
- 为明确CYP74A2基因在白粉菌诱导月季产生对甜菜夜蛾的抗性过程中的功能,并对CYP74A2作生物信息学分析,利用转录组测序获得的差异表达基因进行功能富集分析。结果表明,α-亚麻酸代谢产生的茉莉酸是白粉菌诱导月季产生对甜菜夜蛾抗性的主要挥发性成分之一,发现该通路中共有5个CYP74A2差异表达基因,分别是LOC112173678、LOC112172343、LOC112172188、LOC112173396和LOC112169957。采用qRT-PCR验证CYP74A2基因的功能,利用NCBI、KEGG等数据库找到CYP74A2同源蛋白并结合ExPASy-ProtParam、TMHMM、SignalP6.1、MEME、SOPMA、SWISS-MODEL、MEGA11等在线工具或软件对CYP74A2进行生物信息学分析。通过ExPASy-Protparam分析发现,CYP74A2蛋白分子量都在54.3ku左右,是一种稳定的亲水性蛋白。该类蛋白无跨膜结构和信号肽,亚细胞定位于细胞质和叶绿体中,少量分布于质膜和细胞核内。SOPMA预测结果表明该类蛋白以α-螺旋为主,SWISSMODEL对CYP74A2蛋白三维建模的结果与SOPMA预测结果一致。系统发育分析结果表明,月季CYP74A2蛋白与草莓CYP74A2蛋白亲缘性最近。MEME对蛋白的保守基序分析结果表明,CYP74A2蛋白具有底物识别位点SRS-1、P450s的保守序列、血红素结合域以及血红素结合域的Ⅰ型螺旋。研究结果为探明CYP74A2基因的生物学功能及白粉菌诱导月季产生对甜菜夜蛾抗性的生物分子学机制提供了依据。
- 杨琦刘思琪李云仙杨发忠
- 关键词：月季白粉菌甜菜夜蛾茉莉酸生物信息学
- ICP-AES法同时测定中草药叶上花中的微量元素被引量：4
- 2011年
- 采用HNO3-HF-HClO4系统湿法消解后,用ICP-AES法对中草药叶上花中16种微量元素进行了测定,含量从大到小的顺序为:Ca>K>Mg>P>Si>Fe>Na>Al>Mn>Zn>B>Cr>Pb>Se>Cu(其中Co未检测出)。该中草药接骨活性很可能与其中Ca、P、Fe、Mn、Zn、Se、Cu等元素有关。测定所用方法16种元素的线性相关系数在0.999 089～1.000 000之间,具有较高的准确度,并可多元素同时测定。
- 杨发忠杨德强杨斌赵宁周世萍
- 关键词：ICP-AES微量元素湿法消解
- 甜菜夜蛾触角全长cDNA文库的构建与分析被引量：3
- 2012年
- 目的:构建甜菜夜蛾触角全长cDNA文库。方法:利用TRIzol试剂提取甜菜夜蛾触角总RNA,以此为模板,通过SMAR-TScribeTM反转录酶反转录合成第一链cDNA,引物扩增获得双链cDNA,经Proteinase K消化、SfiⅠ酶切和CHROMA SPIN-400Column分级分离后,收集400～2 000 bp之间的片段重组于改造的pUC19载体并转化至大肠杆菌Escherichia coli DH5α,最终构建获得甜菜夜蛾触角全长cDNA文库。结果:对文库进行滴度测定和重组率分析,结果表明构建的cDNA初级文库滴度为1.6×107pfu/ml,重组率为94%,插入片段大小为0.5～3.0 kb,平均长度在1 kb以上,表明构建获得的文库是一个高质量的文库。结论:该文库的构建为今后克隆甜菜夜蛾嗅觉相关基因奠定了基础。
- 张丽芳朱家颖杨发忠赵宁杨斌
- 关键词：甜菜夜蛾触角全长CDNA文库SMART技术
- 中国月季感染白粉菌对甜菜夜蛾取食行为的影响及原因初探被引量：2
- 2015年
- 以月季白粉菌-中国月季植株-甜菜夜蛾三元系统为例,研究了月季白粉菌侵染中国月季对甜菜夜蛾的影响及其空间效应,并对产生影响的原因进行初探。结果表明,白粉菌侵染中国月季使甜菜夜蛾幼虫取食量下降(从989.1 mm2下降到198.5 mm2),对该虫产生了不利影响,这种影响存在明显的空间效应,并随着感病程度的增加取食量下降。这一变化规律与植物感病后水分含量变化(80.23%下降到60.59%)规律相符,说明白粉菌侵染植株导致植株水分含量变化是甜菜夜蛾幼虫取食量下降的重要原因。研究结果为病虫互作关系及其互作机理的研究奠定了基础。
- 杨发忠杨德强杨斌孙浩
- 关键词：甜菜夜蛾中国月季白粉菌取食行为
- 水杨酸诱导的月季对甜菜夜蛾的抗性及机理研究被引量：3
- 2021年
- 为探明外源水杨酸(SA)诱导月季产生的对甜菜夜蛾的抗性以及产生这种抗性的化学物质基础,采用双选生物测试方法测试了SA处理月季对甜菜夜蛾产卵行为的影响,用GC-MS分析了SA诱导的月季挥发性成分(VOCs)的变化,进一步研究了VOCs中的抗虫活性成分。1.0 mmol/L SA溶液处理月季植株可使甜菜夜蛾在植株上的产卵量显著减少(P<0.05),处理6、9、12 d后,总产卵量与对照相比分别减少了35.4%、38.9%、47.5%。进一步收集对照植株和处理植株顶空挥发性成分,分别配成溶液,喷施两组相同的未经处理的健康月季枝条,结果表明:在喷施了从处理植株上提取的挥发性成分混合物后,枝条上的产卵量与对照相比显著减少(P<0.05),处理6、9、12 d后,抑制指数分别为23.9%、25.4%、36.2%。GC-MS结果表明,SA诱导了月季挥发性成分显著变化。正常情况下2-乙基己酸、十四烷醇、棕榈酸甲酯、乙酸十六酯等化合物在健康植株中不会被合成,只有在SA诱导作用下才会被植株合成出来。SA对这4种化合物的诱导作用表现出明显的时间效应,并且它们对甜菜夜蛾产卵行为的抑制作用表现出明显的浓度效应。结果表明,外源SA处理使月季对甜菜夜蛾产生了诱导抗性,月季挥发性成分变化是这种抗性的重要物质基础。
- 唐敏程静许雁祥朱国磊杨发忠
- 关键词：水杨酸月季甜菜夜蛾诱导系统抗性
