国家高技术研究发展计划(2011AA10A10401)
- 作品数：11 被引量：30H指数：4
- 相关作者：王茂林程文财赵云杨朋娜王浩杰更多>>
- 相关机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划四川省“十二五”农作物及畜禽育种攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 甘蓝型油菜2个BnPLDα基因的克隆与表达被引量：2
- 2014年
- 该实验采用同源克隆技术在甘蓝型油菜中克隆得到2个重复的编码磷脂酶D的PLDα基因,命名为BnPLDα1和BnPLDα2(GenBank登录号为KF113586和KF113587),两者核苷酸序列一致性为87.33%。对BnPLDα1和BnPLDα2编码蛋白进行序列比对分析发现,两者序列一致性为91.01%,大部分差异残基零散地分布于氨基酸全序列中,但在PLDα蛋白活性催化位点的第1个HKD基序紧邻的一段序列中,差异氨基酸残基数达到7个。此外,2个蛋白的三维结构预测结果也存在较大差异。对BnPLDα1和BnPLDα2基因进行表达分析发现,两者在生长旺盛的组织部位表达量较高;低温胁迫下BnPLDα1表达上调,而BnPLDα2表达不受影响;干旱和盐胁迫下,两者上调至最大作用时间点不同,BnPLDα1在盐胁迫信号转导中起主导作用,而BnPLDα2在干旱胁迫信号转导中起主导作用;高温胁迫下,两者表达均呈下调趋势。研究表明,BnPLDα1和BnPLDα2在甘蓝型油菜逆境防御系统中发挥作用,但表达模式的差异性可能会使两者呈现出异于原始基因的多样性功能。
- 李清赵云苏海峰杨华杨朋娜王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜重复基因基因克隆
- 甘蓝型油菜独脚金内酯相关基因的克隆与表达分析
- 2017年
- 独脚金内酯(strigolactones,SLs)是一类新鉴定的植物激素,参与抑制茎分枝.采用同源克隆技术自甘蓝型油菜中得到了三个SLs相关基因,分别命名为BnMAX4,BnMAX1和BnD14,其CDS各长1707,1593,804bp,推测编码的蛋白质功能分别为β-类胡萝卜素加氧酶,细胞色素P450,α/β水解酶.RT-qPCR表达分析显示在野生型甘蓝型油菜二叶及四叶一心期的各组织器官中,BnMAX4主要在二叶一心期的根中表达;BnMAX1无明显表达优势组织;BnD14在二叶一心期的叶中高表达.旱胁迫及盐胁迫处理时BnMAX4的表达趋势为骤降;BnMAX1旱胁迫处理时表达量降低,盐胁迫处理时先下降后上升,9h后又下降;BnD14旱胁迫处理时在3h与12h各有两个表达高点,盐胁迫处理时在3h表达量最高.
- 张璐宋验红解艳芳谢甜王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜基因克隆
- 甘蓝型油菜BnBRI1基因过量表达载体和RNA干扰载体的构建及遗传转化被引量：4
- 2016年
- 构建了含甘蓝型油菜BnBRI1基因过量表达载体pFGC5941-BnBRI1和RNA干扰载体pFGC5941-BnBRI1-Ri,以根癌农杆菌介导的方法转化甘蓝型油菜"W679"下胚轴外植体,经PCR鉴定,获得18株转基因阳性植株,其中1株为BnBRI1基因过量表达转基因植株,17株为BnBRI1基因RNA干扰转基因植株.经RT-PCR鉴定显示,在过表达转基因植株中BnBRI1基因表达量比野生型甘蓝型油菜高,而在RNA干扰转基因植株中表达量比野生型低,RNA干扰BnBRI1基因的表达导致了植株的矮化,矮化植株将可用于油菜株型的遗传改良,以培育适于机械化生产的中矮秆油菜新品种.
- 阳治国谢甜王浩杰张露欧阳钟鸣王茂林
- 关键词：RNA干扰
- 甘蓝型油菜均隆油5号特征指纹图谱构建和杂种纯度鉴定被引量：4
- 2014年
- 利用SSR和SRAP分子标记技术分别对甘蓝型油菜细胞质雄性不育均隆油5号亲本和F1代进行研究,从240对SSR引物、255对SRAP引物中分别筛选出11对和8对多态性好且子代含父母本特征条带的引物,从中选出5对SSR引物(CB10057、Na10-D03 A、Na 12-E 02、CB 10364、CB 10179)和5对SRAP引物(Me 1-Em 10、Me 6-Em 3、Me 6-Em 11、Me 6-Em 19、Me 6-Em 20)作为核心引物,用于F1代杂种纯度鉴定。结果表明,SSR和SRAP两种分子标记所测杂交种纯度分别为97.7%和100%,与田间纯度调查结果具有高度的一致性。从11个SSR标记和8个SRAP标记中分别选出5个SSR和3个SRAP标记组成分子标记组合,构建了均隆油5号油菜亲本、F1代及其它市售42份油菜品种的特征指纹图谱,实现了对不同品种的特异性鉴定。在此基础上建立的数字指纹图谱比对程序实现了对特定品种(品系)指纹图谱的比对分析,可作为杂种纯度分析及假冒伪劣种子判定的参考。
- 史慧娟赵昭阳治国杨朋娜王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜杂种纯度鉴定SSR标记SRAP标记指纹图谱
- 甘蓝型油菜BnCYP79B1基因的克隆与表达被引量：7
- 2013年
- 硫苷是十字花科植物的一种次生代谢产物,其合成途径受细胞色素P450的CYP79家族蛋白的调控,该实验采用同源克隆技术在甘蓝型油菜中克隆到了CYP79B1基因,命名为BnCYP79B1(GenBank登录号为JX535391.1)。BnCYP79B1基因cDNA全长1 625bp,编码一个含有541个氨基酸、理论等电点为8.88。序列对比结果显示,BnCYP79B1与花椰菜CYP79B1在DNA序列上的相似性为98.83%,推测蛋白氨基酸序列的相似性为99.26%。通过不同时期不同部位BnCYP79B1基因表达量的分析,发现BnCYP79B1基因在高秆高硫苷品系的根中表达量较高,而对矮秆高硫苷品系则是叶中表达量较高。在BnCYP79B1表达总量上,高秆品系较矮秆品系高,高硫苷品系较低硫苷品系高。
- 宋傲男程文财刘彩霞赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜基因克隆
- 甘蓝型油菜BnDHAR基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2017年
- 在甘蓝型油菜矮化突变体与其高秆亲本构建的消减杂交文库中,得到一长约230bp与编码脱氢抗坏血酸还原酶的DHAR基因核苷酸序列相似的DNA片段.采用同源克隆技术,在甘蓝型油菜中获得该基因的全长cDNA序列,命名为BnDHAR.BnDHAR与已公布的甘蓝型油菜基因组中的该基因核苷酸序列完全一致.对BnDHAR基因不同发育时期组织的表达分析的结果显示,BnDHAR基因在高秆油菜苗期的叶中表达量最高,是矮化突变体的5倍,在根、茎中表达极低,具有组织特异性.非生物胁迫显著影响BnDHAR表达,高温胁迫使其表达升高,盐胁迫处理9h时达最高,而干旱胁迫时表达量在处理12h时才达最高.
- 宋验红冯刚王浩杰张璐王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜基因克隆非生物胁迫
- 油菜BnCYP83B1基因的克隆与生长素相互作用的研究被引量：1
- 2014年
- 为了探寻油菜BnCYP83B1基因的序列特征以及是否在IAA生长素代谢途径中发挥作用.采用克隆测序技术获得BnCYP83B1基因序列,编码区序列全长1500bp,编码一个含有499个氨基酸残基的蛋白质,全长基因内含有一个152bp的非正常剪接GU-AG内含子.采用Real-time PCR技术检测经2,4-D生长素类似物处理的油菜种子内BnCYP83B1基因的表达水平,发现在2,4-D处理下与对照相比存在显著的表达差异.BnCYP83B1基因可能拥有其他十字花科植物相同的功能极其可能在IAA代谢中发挥重要作用.
- 程文财丁聪聪赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜IAA
- 利用野生甘蓝抗性遗传资源获得高抗菌核病甘蓝型油菜的抗性与分子标记初步分析被引量：3
- 2016年
- 菌核病是甘蓝型油菜最严重的病害之一,自身抗性低,而甘蓝野生资源中存在高抗遗传资源。以部分抗性的甘蓝型油菜中双9号和高抗性的甘蓝野生资源为亲本杂交得到F1(ACC),F1连续用中双9号回交6代,得到育性基本恢复正常植株自交,培育成了高抗菌核病材料,命名为F 6。染色体计数显示,F 6有38条染色体,和甘蓝型油菜(AACC,2n=38)一致。菌核病抗性鉴定实验结果说明F 6对菌核病的抗性高于中双9号而弱于甘蓝。通过在亲本和子代间比较229个分布于甘蓝型油菜19个遗传连锁群的SSR分子标记以及16个与甘蓝抗菌核病特异性位点有关的SSR分子标记,发现甘蓝抗菌核病主要特异性区段9号连锁群已渗入甘蓝型油菜基因组中。
- 王浩杰牛显飞宋验红王茂林
- 关键词：甘蓝甘蓝型油菜菌核病SSR标记
- 甘蓝型油菜BnBRI1基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2014年
- 以拟南芥油菜素内酯受体BRI1基因序列设计同源简并引物,利用同源克隆技术,克隆了甘蓝型油菜中编码油菜素内酯受体基因全长cDNA序列,命名为BnBRI1(GenBank:JX871217),该基因开放阅读框(ORF)大小为3591bp,与拟南芥中BRI1基因(GenBank:NM_120100)相似性为94.21%,编码1196个氨基酸,与拟南芥中BRI编码的氨基酸相似性为89.23%.采用实时定量PCR分析表明,BnBRI1基因在根、茎、叶中都有表达,但表达量存在显著差异.在两叶一心期和花期的根中表达量最高,四叶一心期和抽薹期的叶中表达量最高.
- 刘彩霞程文财王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜
- 甘蓝型油菜矮秆突变基因ndf1的分子标记连锁遗传作图被引量：3
- 2015年
- 利用240对SSR和672对SRAP分子标记,以甘蓝型油菜矮秆突变株系与高秆野生型杂交的回交一代(BC1)群体为材料,对甘蓝型油菜矮秆突变基因ndf1进行连锁遗传作图分析.结果表明:(1)在240对SSR引物中,有145对的扩增产物显示出突变株系与野生型间具有多态性,采用矮秆与高秆杂交F2群体集团分离分析法(BSA)筛选连锁分子标记,并利用BC1群体进行遗传连锁作图分析,发现位于13号连锁群上的Na12-E02和CB100572对SSR标记与矮秆突变基因ndf1位点紧密连锁,2对标记位于矮秆突变基因ndf1的同侧,连锁图距分别为6.34cM、8.77cM;(2)经过672对SRAP分子标记连锁遗传分析,获得了4对与矮秆突变位点连锁的SRAP标记:Me15em4-288、Me28em3-171、Me25em15-262和Me3em18-684,与矮秆突变位点的连锁图距分别为12.48cM、15.19cM、20.19cM和35.46cM,Me28em3-171和Me3em18-684位于矮秆突变基因ndf1的另一侧.
- 杨朋娜张璐史慧娟李清王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜矮秆突变体分子标记
