广东省中医药管理局基金(1060086)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：曾星黄羽张娴危建安周丹更多>>
- 相关机构：广东省中医院更多>>
- 发文基金：广东省中医药管理局基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 猪苓多糖联合卡介苗诱导的细胞外热休克蛋白对巨噬细胞功能的影响被引量：4
- 2009年
- 目的研究猪苓多糖联合卡介苗刺激T24膀胱癌细胞株后,细胞外HSP的表达及其对J774A.1巨噬细胞TLR2、TLR4,胞内钙离子(Ca2+)、一氧化氮(NO)和活性氧(ROS)表达的影响,探讨膀胱内灌注卡介苗治疗浅表性膀胱癌的免疫启动和免疫调节机制。方法用ELISA的方法检测猪苓多糖和卡介苗联合刺激T24膀胱癌细胞后胞外HSP90、HSP70、HSP60、HSP27的表达,胞外HSP作用于J774A.1巨噬细胞后,用流式细胞术检测J774A.1巨噬细胞表面TLR4和TLR2的表达,应用激光共聚焦扫描技术,检测J774A.1细胞内Ca2+、NO和ROS的动态变化。结果猪苓多糖和卡介苗联合作用组胞外HSP的表达明显高于猪苓多糖和BCG单独使用组(P<0.05),48h时胞外HSP的表达至峰值,且胞外HSP70呈优势表达;胞外HSP可上调J774A.1巨噬细胞TLR4的表达(P<0.05),对J774A.1细胞内Ca2+、NO和ROS有明显的调节作用(P<0.05)。结论卡介苗体外直接刺激人T24膀胱癌细胞后,可表达细胞外HSP90、HSP70、HSP60、HSP27,猪苓多糖和卡介苗联合使用可增加其表达。细胞外HSP对J774巨噬细胞有一定的免疫调节作用。
- 黄羽曾星孙景波张娴危建安
- 关键词：猪苓多糖卡介苗膀胱癌细胞热休克蛋白巨噬细胞
- 猪苓多糖/卡介苗诱导的热休克蛋白对巨噬细胞表面分子的影响被引量：7
- 2009年
- 目的:观察猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的细胞外热休克蛋白对J774A.1巨噬细胞TLR、共刺激分子、粘附分子、活化分子表达的影响,探讨猪苓多糖/卡介苗灌注治疗膀胱癌的天然免疫启动机制。方法:(1)ELISA检测猪苓多糖/卡介苗与T24膀胱癌细胞共培养上清中HSP90、HSP70、HSP60、HSP27的表达。(2)流式细胞术检测含HSP共培养上清(eHSP)对小鼠J774A.1巨噬细胞表面分子CD14、TLR2/4、MHCⅠ/Ⅱ;活化分子CD25;共刺激分子CD80、CD86、CD40;粘附分子CD44、CD62L、CD11b、CD18表达的影响。(3)用流式细胞术检测TLR4/MD2抗体复合物阻断J774A.1巨噬细胞表面TLR4后,eHSP对其表面分子MHCⅠ/Ⅱ、CD25、CD80、CD86、CD40、CD44、CD62L、CD11b、CD18的表达。结果:(1)猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的热休克蛋白呈剂量和时间依赖性,猪苓多糖(2mg/ml)和卡介苗(250μg/ml)作用48小时时HSP的表达至峰值,其中HSP70呈优势表达;(2)含HSP的共培养上清可上调J774A.1巨噬细胞TLR4、MHCⅠ、CD86、CD40、CD25分子的表达,增强粘附分子CD44、CD62L荧光强度;(3)含HSP的共培养上清作用于用TLR4/MD2阻断后的巨噬细胞,其表面分子CD86、MHCⅠ、CD40、CD25的表达降低。结论:猪苓多糖/卡介苗可诱导T24膀胱癌细胞产生危险信号热休克蛋白,并且热休克蛋白可通过激活小鼠J774A.1巨噬细胞TLR4信号通路,上调其表面分子的表达,启动抗膀胱癌天然免疫应答。
- 黄羽曾星张娴周丹
- 关键词：猪苓多糖卡介苗热休克蛋白膀胱癌巨噬细胞表面分子
- 卡介苗经TLR4介导对膀胱癌细胞株T739 NF-κB p65活性影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨卡介苗(BCG)对膀胱癌细胞株T739经Toll样受体介导的NF-κB p65活性影响。方法:采用SYBRGreen嵌合荧光定量Real Time-PCR,观察BCG(0.25g/L)刺激T739后不同时间点各个mRNA相对表达量(Ratio),设LPS和空白组作对照;采用转录因子结合DNA的ELISA方法检测NF-κB p65活性。结果:BCG刺激后T739细胞TLR2、CD14和MD-2mRNA表达均明显增加,Max.Ratio分别为5.3(2h),2.6(4h),7.4(2h),TLR4mRNA增加不显著,Max.Ratio为1.6(6h);BCG作用T739细胞后NF-κB p65活性显著增加,阻断TLR4后,NF-κB p65活性受到显著抑制(P<0.05);阻断TLR2后NF-κB p65活性却显著性增强(P<0.01)。结论:BCG作用T739后TLR2、CD14、MD-2和TLR4mRNA表达均不同程度增加,BCG可经TLR4使T739细胞NF-κB p65活性增强,不是经TLR2使T739细胞NF-κB p65活化。
- 危建安曾星韩凌黄羽
- 关键词：卡介苗膀胱癌核转录因子ΚBP65
