国家自然科学基金(39789010)
- 作品数：23 被引量：76H指数：5
- 相关作者：吴玉章贾正才周伟高杰英王祥智更多>>
- 相关机构：第三军医大学军事医学科学院第二军医大学更多>>
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- 与霍乱毒素A1亚基突变体相互作用蛋白的筛选
- 2001年
- 目的 寻找新的与霍乱毒素A1亚基 (CTA1)突变体 (S6 3F)相互作用的蛋白 ,来探讨CT佐剂活性的分子机理。方法 应用酵母双杂交技术 ,以CTA1(S6 3F)为诱饵蛋白筛选人脾细胞cDNA文库 ,并通过共转染、免疫共沉淀和Western杂交在哺乳动物细胞COS 7中确证诱饵蛋白和候选蛋白之间的相互作用。结果 筛选获得一个与HLAⅠ类分子α亚基高度同源的蛋白 ,这个蛋白在酵母核内以及COS 7细胞中都显示出与CTA1(S6 3F)的相互作用。结论 CTA1(S6 3F)与HLAⅠ类分子α亚基的相互作用可能导致HLAⅠ类分子进入“膜筏” ,引起膜筏不断聚集增大 ,聚集到一定程度后筏相关酪氨酸蛋白激酶活化 ,启动胞内信号的级联传递 。
- 杨淑静曹诚马清钧
- 关键词：霍乱毒素佐剂酵母双杂交突变体相互作用蛋白
- 小鼠MAdCAM-1分子剪切体的克隆及表达被引量：2
- 2000年
- 目的 获得小鼠粘膜血管定居因子 (MAdCAM 1)分子剪切体cDNA ,并在原核细胞中进行有效表达。方法 从BALB/c小鼠的肠系膜淋巴结中提取总RNA ,利用RT PCR方法获得小鼠MAdCAM 1分子剪切体cDNA ,构建原核表达载体并进行表达 ,纯化融合蛋白制备多抗。结果 核酸序列分析表明获得了正确的小鼠MAdCAM 1分子剪切体cDNA ;小鼠MAdCAM 1剪切体以融合蛋白的形式得到表达 ,主要以包涵体形式存在 ;免疫印迹分析表明 ,小鼠MAdCAM 1剪切体蛋白可被小鼠MAd CAM 1分子的标准单抗及自制多抗识别。结论 小鼠MAdCAM 1剪切体cDNA、表达蛋白及多抗的获得 ,为进一步研究该分子的生物学活性做好准备。
- 张慧英高杰英罗振革刘永全彭虹陈志华孔祥英
- 关键词：蛋白表达
- 农杆菌介导鼠源轮状病毒vp4基因转化马铃薯条件优化研究被引量：8
- 2002年
- 目的 获得马铃薯再生和农杆菌介导的遗传转化体系。方法 以马铃薯品种“台湾红”为受体材料 ,对其再生和农杆菌介导的遗传转化体系进行了研究。结果 诱愈培养基为MS + 0 1mg L 2 ,4-D + 1mg LBA ,出芽培养基为MS + 1mg LZT +5 0mg LGA3 ,卡那霉素浓度为 5 0mg L ,农杆菌液浓度为A6 0 0 =0 5。通过该体系将一鼠源轮状病毒外壳蛋白基因vp4导入马铃薯中 ,获得了具卡那霉素抗性的转化植株。经PCR验证 ,外源基因已导入马铃薯基因组中。结论 获得相对高效的马铃薯遗传转化体系 ,并成功地将外源基因转入马铃薯中。
- 李晋涛吴玉章费蕾牟芝蓉
- 关键词：VP4基因基因转化农杆菌马铃薯
- 乙肝治疗性多肽免疫刺激复合物的制备及鉴定被引量：5
- 2000年
- 目的 为有效提高小分子多肽在体诱导CTL应答的能力 ,制备了乙肝治疗性多肽免疫刺激复合物 (ISCOMs) ,并对其形成进行了鉴定。方法 乙肝治疗性多肽ISCOMs采用透析法制备获得 ,并经小分子多肽的SDS PAGE电泳法确定了复合物中小分子多肽的存在 ,采用Bradfords法测定了复合物中多肽的结合量。结果 在电镜下呈典型的蜂巢状亚微型颗粒结构 ,所制备的ISCOMs中多肽的结合量约为 0 .30mg/ml。结论 ISCOMs的成功制备 。
- 管孝鞠吴玉章贾正才石统东唐艳
- 关键词：免疫刺激复合物乙型肝炎
- 可食性转基因植物疫苗的免疫学特性研究被引量：10
- 2001年
- 转基因植物疫苗是疫苗研究的一个新热点 ,本文综述了转基因植物疫苗在体诱导的免疫学特点 ,包括实验动物和人免疫应答情况 ,讨论了未来转基因植物疫苗研究重点及将面临的问题和解决对策 。
- 李晋涛吴玉章
- 关键词：转基因植物疫苗免疫应答
- 粘膜抗原提呈的研究进展被引量：3
- 2000年
- 粘膜持续地暴露于大量种类繁多的抗原环境中 ,许多感染性病原体通过粘膜表面进入宿主 ,因此产生迅速有效的免疫反应对机体来说至关重要。大多数免疫反应产生的一个限制性步骤是抗原需通过辅佐细胞被提呈给T淋巴细胞 ,抗原的加工与提呈是免疫反应的一个中心事件。粘膜抗原可通过专职抗原提呈细胞和非专职抗原提呈细胞提呈。
- 王华
- 关键词：粘膜抗原提呈
- 噬菌体呈现疫苗诱导乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T细胞反应被引量：1
- 2000年
- 目的 研究噬菌体呈现颗粒作为亚单位疫苗是否能在体诱导乙型肝炎特异性细胞毒性T细胞反应。方法 构建呈现MHCI类分子 (H 2 d)限制性表位HBs2 8～ 39的噬菌体颗粒 ,小剂量、无佐剂接种BALB/c(H 2 d)小鼠。结果 重组噬菌体呈现颗粒在体诱导H 2 d 限制的HBs2 8～ 39特异性细胞毒性T细胞反应。结论 丝状噬菌体呈现疫苗有效诱导细胞毒性T细胞反应 。
- 万瑛吴玉章边疆王祥智周伟贾正才唐燕周丽芸
- 关键词：丝状噬菌体CTL表位
- 噬菌体呈现颗粒疫苗诱导抗肿瘤细胞毒性T细胞反应被引量：1
- 2000年
- 目的 构建呈现肿瘤相关抗原P815A的噬菌体颗粒 ,在体诱导针对肥大细胞瘤P815的特异性细胞毒性T细胞 (CTL)反应。方法 构建呈现CTL表位P1A35～ 4 3 的噬菌粒载体 ,大量制备呈现此表位的重组噬菌体颗粒 ,小剂量、无佐剂皮下免疫DBA/2小鼠 (H 2 d) ,采用51Cr释放法、ELISPOT观察针对肥大细胞瘤P815的CTL反应。结果 重组噬菌体呈现颗粒疫苗在体诱导了针对弱抗原P815A的CTL反应。结论 丝状噬菌体呈现疫苗增强肿瘤相关抗原的免疫原性 。
- 万瑛吴玉章边疆赵建平王祥智周伟周丽芸唐燕贾正才
- 关键词：肿瘤丝状噬菌体免疫治疗CTL
- 含CpG寡聚脱氧核苷酸对肿瘤抗原肽P815AB的免疫佐剂效应研究被引量：11
- 2000年
- 目的 以肿瘤抗原P815AB抗原肽为模式抗原 ,研究CpG寡聚脱氧核苷酸 (CpGODN)对该肿瘤抗原表位肽的免疫佐剂效应。方法 用 [3H ] TdR掺入法研究CpGODN体外刺激小鼠脾细胞增殖效应 ,用ELISPOT和 [3H] TdR释放法检测不同构成形式的疫苗在体诱发特异性CTL应答的效应。结果 ODN182 6在体外可刺激小鼠脾细胞显著增殖。经 4次免疫 ,在“肽 +ODN182 6 +IFA”组中 ,4/6的小鼠体内出现了特异性CTL应答 ;在“肽 +ODN182 6 +PBS”组 ,有 3只小鼠在完成 4次免疫前先后死亡 ,余 3只中有 1只体内也可检测到相应CTL反应 ;而对照“肽 +IFA”组 ,6只小鼠体内均未诱发出特异性CTL应答。结论 CpGODN对P815AB表位肽有较为理想的免疫佐剂效应 ,但疫苗构成形式对其免疫效果有着决定性的作用 ,“肽 +ODN182 6 +IFA”是本研究中最有效的疫苗形式 。
- 赵建平吴玉章万瑛贾正才周伟邹丽云刘月明
- 关键词：CPG寡聚脱氧核苷酸肿瘤抗原肽
- O-乙酰氨基半乳糖基化氨基酸的化学合成被引量：3
- 2000年
- 目的 为获得精确定位糖基化糖肽 ,合成O 乙酰氨基半乳糖基化氨基酸 ,作为糖肽固相合成的原料。方法 利用环状糖结构的半缩醛羟基可与含侧链羟基氨基酸的羟基形成糖苷键 ,用化学方法 ,使过乙酰化GalNAc与氨基被 9 Fluorenylmethoxycarbonyl (N α Fmoc)保护的丝氨酸或苏氨酸连接。结果 反应产物通过反相制备HPLC纯化后 ,可作为O 连接糖肽合成构建单位 (Buildingblocks)在固相多肽合成仪上合成所需的病毒或肿瘤相关糖肽 ,并可进一步研究其生物学活性。结论 本法相对易操作 ,重复性好 ,收益率也较高 ,更重要的是糖基化的均一性好 。
- 周吉军王祥智吴玉章贾正才周伟边疆
- 关键词：糖肽固相合成
