广东省科技计划工业攻关项目(2008B030301143)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李荣罗荣城梁继珍张军一谢剑明更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目南方医科大学南方医院院长基金中国临床肿瘤学科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 逆转录病毒介导的SHP-1基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的构建逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,获取重组逆转录病毒,并将SHP-1基因转导入乳腺癌MDA-MB-231细胞株。方法采用RT-PCR方法从高表达SHP-1的人乳腺癌细胞株MCF-7中克隆出SHP-1基因全长cDNA,构建重组逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,通过脂质体介导将其转染入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株,将病毒感染人乳腺癌细胞MDA-MB-231。采用Western blotting方法检测SHP-1基因在MDA-MB-231细胞中的表达情况。结果成功构建重组逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,转染包装细胞PT67,筛选出对G418具有稳定抗性的克隆PT67/SHP-1,获取重组逆转录病毒上清液,并感染人乳腺癌细胞MDA-MB-231。从蛋白水平证实,感染后的MDA-MB-231有SHP-1基因的表达。结论将SHP-1基因定向克隆入逆转录病毒载体的方法可成功获取重组逆转录病毒,感染MDA-MB-231细胞得到稳定表达SHP-1基因MDA-MB-231/SHP-1,为进一步研究奠定了基础。
- 梁继珍李荣张军一郑航罗荣城
- 关键词：SHP-1酪氨酸磷酸酶逆转录病毒
- SHP-1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖活性的影响被引量：3
- 2010年
- 目的初步观察转染SHP-1基因前后MDA-MB-231细胞SHP-1蛋白表达情况及转染SHP-1基因对MDA-MB-231细胞增殖能力的影响。方法构建真核表达载体pEGFP-C3-SHP-1,利用脂质体转染法转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,经G418筛选阳性克隆。用免疫细胞化学和Westernblot检测SHP-1基因在MDA-MB-231细胞中的稳定表达情况,并通过MTT法观察细胞生长曲线。结果蛋白水平证实,转染细胞内有SHP-1基因的高表达,转染后细胞增殖能力明显受抑制(P<0.05)。结论向无SHP-1基因表达的MDA-MB-231细胞内转染SHP-1基因并使其稳定表达,可以使MDA-MB-231细胞的增殖受到抑制,为以后进一步探讨SHP-1基因的功能打下了基础。
- 谢亚琳梁继珍刘斐烨张军一谢剑明罗荣城李荣
- 关键词：SHP-1基因酪氨酸磷酸酶MDA-MB-231细胞
