中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX1-YW-11B2)
- 作品数：3 被引量：33H指数：2
- 相关作者：吴中柳裴小琼胡承张帅兵唐德芳更多>>
- 相关机构：中国科学院成都生物研究所中国科学院研究生院成都医学院更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目中国科学院“百人计划”四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 嗜热脂肪土芽孢杆菌木聚糖酶基因的合成及其在大肠杆菌中的表达(英文)被引量：1
- 2009年
- 来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的木聚糖内切酶XT6在工业上有着重要的应用,已经成功应用于工业规模的生产试验.本文作者在合成XT6基因全序列的同时对其密码子进行了优化,且构建重组质粒在大肠杆菌中高表达.通过优化表达条件,功能正常的XT6基因在大肠杆菌中成功过量表达,蛋白表达量占细胞中总蛋白的65%.重组表达的木聚糖内切酶XT6特性和天然酶相似,以桦木木聚糖为底物测定细胞提取物中木聚糖酶活性,最大活性高达3030U/mL.本文首次报道了来自嗜热脂肪土芽孢杆菌中木聚糖酶基因全序列的合成和在大肠杆菌中成功过量表达.
- 张志刚裴小琼吴中柳
- 关键词：木聚糖酶密码子优化
- 黑曲霉阿魏酸酯酶A的克隆、表达及快速酶活检测体系的建立被引量：16
- 2009年
- 阿魏酸酯酶是参与半纤维素降解的重要酶类.为了提高阿魏酸酯酶的活性和其它性能,本文作者采用RT-PCR技术从黑曲霉CIB423.1中克隆了编码阿魏酸酯酶A的cDNA,构建了外泌表达的质粒,并将其转化到毕赤酵母GS115进行表达.通过检测培养液上清中的酶活,表明阿魏酸酯酶已成功在这一体系表达.同时,本文还建立了快速、稳定的酶活检测体系,为后续对阿魏酸酯酶酶突变体活性进行高通量筛选奠定了基础.
- 张帅兵裴小琼吴中柳
- 关键词：黑曲霉高通量筛选毕赤酵母
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及表达被引量：16
- 2009年
- 从曲霉属10株试验菌中筛选得到一株产β-葡萄糖苷酶活性较高的黑曲霉FTA-008.该菌株在适宜的培养条件下,β-葡萄糖苷酶的最高活性达2.89U/mL,适宜产酶周期为3d.通过设计特异引物,以该菌株的总RNA为模板,采用RT-PCR技术获得大小为2511bp的cDNA片段,该序列与GenBank中AJ132386的β-葡萄糖苷酶序列相比,氨基酸序列同源性达96.8%.经毕赤酵母表达,β-葡萄糖苷酶比活力达7.85U/mg.
- 唐德芳裴小琼李晓璐胡承陈军吴中柳
- 关键词：黑曲霉Β-葡萄糖苷酶克隆RT-PCR毕赤酵母
