国家高技术研究发展计划(2002BA711A05)
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
- 相关作者：胡仁明杨志红王宣春刘瑜王继光更多>>
- 相关机构：复旦大学上海交通大学医学院附属瑞金医院复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 钾依赖钠钙交换蛋白-6(SLC24A6)的基因克隆与蛋白表达
- 2006年
- 目的:克隆和表达钾依赖钠钙交换蛋白-6(SLC24A6)基因,为进一步阐明其与胰岛素分泌的关系奠定基础。方法:利用RT-PCR观察SLC24A6基因在胰岛素瘤和正常胰腺组织中的表达,并克隆SLC24A6基因全长,将SLC24A6基因构建到原核表达载体pET32a,在大肠杆菌ROSSET菌(DE3)中诱导表达纯化;将SLC24A6基因构建到绿色荧光真核表达载体pEGFP-C3,利用共聚焦显微镜观察SLC24A6在小鼠胰岛素瘤β-TC3细胞中的定位。结果:SLC24A6基因在胰岛素瘤组织表达明显高于正常胰腺;成功获得原核表达纯化蛋白,大小约80kD;重组载体pEGFP-C3-SLC24A6转染后,定位于小鼠胰岛素瘤β-TC3细胞膜上。结论:SLC24A6可能与胰岛素分泌有关,SLC24A6全长原核表达为进一步研究SLC24A6的生物学功能和蛋白质晶体结构奠定了基础,SLC24A6在胰岛素瘤细胞的定位为进一步阐明其与胰岛素分泌的关系提供了理论依据。
- 刘瑜王宣春陈凤玲牟波胡仁明
- 关键词：胰岛素瘤
- 高糖对THP-1细胞及平滑肌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨高糖对单核/巨噬细胞系THP-1细胞及人主动脉平滑肌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)表达的影响。方法:用PMA孵育THP-1细胞,诱导其分化成为巨噬细胞。流式细胞仪检测成功诱导的巨噬细胞粘附分子CD11b及CD11c。采用不同糖浓度干预THP-1细胞,用Western blotting技术检测TRAIL-R4的表达。用25mmol/L高糖培养液在不同时点孵育人主动脉平滑肌细胞,观察TRAIL-R4蛋白表达的变化。用PKC激动剂干预THP-1细胞后,用Western blotting技术检测TRAIL-R4的表达。结果:佛波酯(PMA)孵育THP-1细胞48h可诱导其分化成为巨噬细胞。20mmol/L高糖明显上调人THP-1细胞TRAIL-R4的表达。高糖对人主动脉平滑肌细胞TRAIL-R4表达上调的影响随着刺激时间的增加而增加。PKC激活后THP-1细胞TRAIL-R4的表达明显上调。结论:高糖上调TRAIL-R4蛋白表达,TRAIL-R4通过抑制巨噬细胞及平滑肌细胞的凋亡促进动脉粥样硬化。
- 梁文昌李连喜杨志红张烁何敏金惠铭胡仁明
- 关键词：受体肿瘤坏死因子巨噬细胞
- 高糖对人大血管细胞钾依赖钠钙交换蛋白6表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的 观察钾依赖钠钙交换蛋白6（NCKX6）基因在人主动脉内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞的表达，以及高糖对大血管NCKX6表达的影响。方法 Western印迹检测正常血管组织和2型糖尿病血管组织NCKX6蛋白的差异表达，RT—PCR检测NCKX6基因在人主动脉平滑肌细胞（HASMC）、人主动脉内皮细胞（HAEC）和人血管巨噬细胞（THP-1）中的表达，Northern印迹杂交检测高糖作用HAEC细胞NCKX6mRNA的表达差异。结果 Western印迹初步显示NCKX6在2例糖尿病患者大血管中明显高表达，RT—PCR观察到NCKX6基因主要在HAEC细胞中表达，而HAMSC和THP-1细胞中表达量低。Northern印迹杂交进一步观察到随着培养液D-葡萄糖浓度的增加，作用72h后HAEC细胞NCKX6mRNA表达明显增高，30mmol／LD-葡萄糖作用下NCKX6mRNA表达量可增加5—6倍。结论 NCKX6主要在人主动脉内皮细胞中表达，并且受到葡萄糖的调控。提示NCKX6与糖尿病大血管病变有密切的关系。
- 刘瑜陈凤玲王宣春杨志红胡仁明
- 关键词：钠钙交换蛋白葡萄糖大血管主动脉
- 长期饮酒对浙江景宁畲族人群血压、血脂及肾功能的影响被引量：9
- 2005年
- 目的探讨长期过量饮酒对血压、血脂及肾功能的影响.方法在浙江省景宁畲族自治县随机选择6个自然村,运用水银柱血压计听诊法连续测量坐位右臂血压3次,取平均值用做统计分析.运用问卷收集饮酒、吸烟、高血压用药史.采集静脉血,全自动生化仪检测血脂及肾功能.结果 1 168例畲族受检者中包括648名(0.55)女性,372例(0.32)高血压患者,526例(0.45)有饮酒习惯,325例(0.28)每周饮酒超过300 g.和不饮酒者相比,饮酒者的收缩压(130.6比126.0 mm Hg)、舒张压(81.0比78.7 mm Hg)、脉压(49.6比47.2 mm Hg)、高密度脂蛋白胆固醇(1.48比1.33 mmol/L)、血尿酸(342比331 μmol/L)明显升高(P<0.01).在畲族男性中,收缩压及舒张压随饮酒量的增加呈线性增加(P<0.01);饮酒是高血压的一个独立的危险因素 (OR, 1.61; 95%可信区间, 1.05～2.47; P=0.03).结论长期过量饮酒可升高血压,增加高密度脂蛋白胆固醇及血尿酸水平.
- 李燕高平进王谷亮钱岳晟王继光朱鼎良
- 关键词：饮酒血压肾功能长期饮酒人群血压高密度脂蛋白胆固醇
- 高糖可上调肝脏超氧化物歧化酶2的表达被引量：1
- 2007年
- 赵晓龙周闻白何敏董雪红杨志红王宣春胡仁明
- 关键词：糖尿病肝脏超氧化物歧化酶高糖
- 尼克酰胺-N-甲基转移酶在链脲佐菌素致糖尿病猴胰岛中的高表达及意义被引量：2
- 2007年
- 目的:本文旨在明确尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)在链脲佐菌素(STZ)致糖尿病猴胰腺中的表达及其定位,进而分析NNMT在β细胞损伤中的重要作用。方法:应用基因芯片技术筛选STZ致糖尿病猴胰腺组织差异表达基因,选择NNMT作为研究对象。半定量RT-PCR及Western印迹法分别从mRNA及蛋白水平验证该差异,然后应用免疫组化技术观察该蛋白在胰腺内外分泌细胞中的表达情况。结果:NNMT在正常猴胰腺中仅有微弱表达,但在STZ致糖尿病猴胰腺中其mRNA及蛋白水平均明显上调。免疫组化结果显示该差异表达主要表现在胰岛β细胞分布区。结论:NNMT可以催化对维持细胞功能极为重要的尼克酰胺甲基化,其在糖尿病β细胞内表达上调可能会引起细胞内能量代谢障碍而导致β细胞损伤。
- 牟波杨志红赵家伟王宣春董雪红刘瑜胡仁明
- 关键词：链脲菌素糖尿病
- 浙江景宁人群中α-内收蛋白基因Gly460Trp多态性与外周及中心动脉血压的关系被引量：11
- 2005年
- 目的探讨在中国畲族人群中α-内收蛋白基因Gly460Trp多态性与外周及中心动脉血压的关系。方法在浙江省景宁县随机选择6个村,以核心家系为单位募集人群样本,运用水银柱血压计听诊法连续测量坐位非优势臂血压5次,取平均值用做统计分析。运用标准化问卷收集饮酒、吸烟、高血压用药史。采用SphygmoCor动脉脉搏波分析仪测量中心动脉血压。采集静脉血,分离DNA,以限制性酶切长度多态性方法检测α-内收蛋白基因的基因型。使用方差分析、广义估计方程(generalizedestimatingequations,GEE)进行关联分析。结果442例受检者中包括230例(52·0%)女性,116例(26·2%)高血压患者,其中49例(11·1%)服用抗高血压药物。α-内收蛋白GlyGly、GlyTrp、TrpTrp三个基因型的频率分别为21·3%、54·5%和24·2%。α-内收蛋白Gly460Trp多态性与肱动脉收缩压、舒张压及脉压无显著性关联,但在调整性别、年龄、年龄2、体重指数、有无吸烟、饮酒、抗高血压药物治疗等协变量前后,该多态性与中心动脉收缩压及中心脉压均有显著相关性(P<0·02)。GlyGly、GlyTrp、TrpTrp三个基因型的中心动脉收缩压分别为(122·5±3·5)mmHg、(114·1±1·5)mmHg、(109·1±1·8)mmHg(P=0·01)。相应的中心脉压值分别为(39·4±1·3)mmHg、(36·4±1·0)mmHg、(32·9±0·9)mmHg(P=0·002)。结论在浙江景宁畲族人群中,α-内收蛋白基因Gly460Trp多态性与中心动脉的收缩压及脉压有显著相关性,Trp等位基因可能对中心动脉血压增高有保护作用。
- 郭慧峰李燕王谷亮陆勇刚周怀发高平进朱鼎良王继光
- 关键词：血压Α-内收蛋白基因畲族动脉血压增高长度多态性蛋白基因
