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人腺体激肽释放酶基因重组表达载体pPICZαChK2的构建被引量：1: 2004年; 目的 :构建人腺体激肽释放酶 (h K2 )基因的酵母表达载体。方法 :利用 RT- PCR法从人正常前列腺组织中扩增出 h K2基因 ,先将其克隆到 p GEM- T载体 ,进行序列测定和分析 ,然后将 h K2基因亚克隆至酵母p PICZαC表达载体上 ,进行鉴定。结果 :获得一个核苷酸长度为 738bp的基因 ,同源比较结果表明 ,与 Gen Bank(NCBI:AF18874 6 )公布的 h K2的基因序列有 99%的同源性 ,序列分析表明有一个氨基酸出现变异。酶切表明 h K2基因正确插入酵母表达载体 p PICZαC。结论 :成功构建出 h K2基因的酵母表达载体 p PICZαCh K2。; 路英丽张家颖邹冬辉张媛媛李丹地王忠山; 关键词：基因表达

成年糖尿病大鼠重要器官组织SOD、MDA含量变化被引量：15: 2005年; 目的研究成年糖尿病大鼠重要器官组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化。方法测定对照组(C)、胰岛素治疗糖尿病组(ID)、糖尿病组(D)大鼠重要器官组织SOD活力、MDA含量。结果大鼠心、肝、肺、脾、胰组织D组与C组比较,SOD活力下降(P<0.05、P<0.01),肝、脾、胰组织ID组与C组比较,SOD活力下降(P<0.05),肺D组与ID组比较,ID组SOD活力提高(P<0.05),肾组织SOD活力无变化;D组心、肺、胰、脾组织中MDA含量升高,与C组比较,有显著差异(P<0.05,P<0.01);ID组心、胰、脾组织MDA含量与C组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01),心、脾组织MDA含量ID组与D组比较,有显著差异(P<0.05,P<0.01),肝、肾组织MDA含量无变化。结论糖尿病大鼠重要器官组织抗氧化酶水平低下,经胰岛素治疗后,有提高趋势。; 李晓林李晓梅陆艳娟周磊王忠山范茹军; 关键词：糖尿病 SOD MDA 成年大鼠

青春期糖尿病大鼠生殖腺内5α-还原酶(2型)的基因表达研究被引量：1: 2004年; 目的研究青春期糖尿病大鼠生殖功能障碍的可能分子机制。方法用链脲菌素复制青春期大鼠糖尿病模型,实验分正常对照(C)组、糖尿病(D)组及糖尿病+胰岛素治疗(ID)组,以Northernblot检测睾丸、附睾、前列腺内5α-还原酶(2型)的mRNA水平。结果附睾头部,D组和ID组大鼠的2型酶mRNA水平低于C组(P<005)。结论附睾2型5α-还原酶mRNA水平低下可能使双氢睾酮生成减少,从而影响青春期大鼠生殖系统的发育与功能。; 刘素嬛王忠山许宗革辛暨丽左文静; 关键词：糖尿病氧化还原酶类生殖

IL-10对小鼠肺泡巨噬细胞清道夫受体及CD14表达的影响被引量：10: 2003年; 本研究旨在观察IL 10对肺泡巨噬细胞 (AM)、清道夫受体 (SR)、CD14表达的影响 ,探讨IL 10在内毒素血症时防止AM由免疫防御向炎症效应转变中的作用。分离培养小鼠AM ,以不同剂量 (0 ,0 0 1,0 1,1,10 ,10 0 μg/L)IL 10刺激细胞 16h或以 10 0 μg/LIL 10刺激细胞不同时间 (0 ,2 ,4 ,6 ,8,12 ,16h) ,采用免疫细胞化学及RT PCR方法观察SR、CD14表达变化。结果显示低至 10 μg/LIL 10刺激 16h或 10 0 μg/LIL 10刺激 12～ 2 4h能显著增强SRmRNA并抑制CD14mRNA表达 ,SR蛋白表达也显著增强 ,但CD14蛋白表达无明显变化。IL 10刺激下对SR蛋白表达的增强能降低AM对LPS的反应性。; 单佑安秦文利蒋建新宁心刘大维朱佩芳周继红; 关键词：肺泡巨噬细胞 IL-10 清道夫受体 CD14

重组人前列腺特异性抗原纯化与活性鉴定: 2008年; 目的:纯化和鉴定重组人前列腺特异性抗原(PSA),为PSA的生物学特征研究、临床检测和治疗应用提供关键材料。方法:采用阳离子交换层析技术纯化重组PSA(rPSA),利用Western blotting鉴定其特异性,利用PSA底物S-2586检测rPSA活性。结果:最适甲醇诱导浓度为1.5%,经鉴定纯化的rPSA为人PSA。在不同反应条件下,在3.5h内酶活性与时间成正比,rPSA活性显著高于正常精浆PSA酶活性(P<0.05),酶活性的最适温度为30℃。结论:成功纯化出具有酶活性的rPSA。; 邹冬辉张家颖路英丽郭焱王忠山; 关键词：前列腺特异性抗原酶活性检测分离纯化

短期糖尿病雄性大鼠前列腺自由基和抗氧化水平变化研究被引量：20: 2003年; 目的 :研究短期糖尿病雄性大鼠前列腺氧自由基和抗氧化物酶的动态变化。方法 :4 8只Wistar雄性大鼠随机分为 6组 (每组 8只 )。1组腹腔注射枸椽酸缓冲液作为正常对照组 ,其余 5组腹腔注射链脲菌素 (STZ)制成糖尿病模型 ,分别观察 1d (D1)、3d (D3 )、5d (D5)、7d (D7)和 14d (D14 ) ,取前列腺组织制备组织匀浆 ,分别测定组织中超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)、谷胱甘肽转移酶 (GST)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -px)、一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)的水平。结果 :糖尿病组前列腺MDA ,GSH -px和NO水平显著高于正常组 ;SOD、GSH、GST和NOS水平呈现先升高后下降的趋势。结论 :短期糖尿病雄性大鼠前列腺组织处于氧化应激状态。; 王忠山邹冬辉赵慧许宗革刘颖丽; 关键词：糖尿病前列腺自由基

青春期糖尿病大鼠生殖腺内AR的基因表达和受体水平变化: 2002年; 目的观察青春期糖尿病大鼠生殖腺内雄激素受体的基因表达及蛋白水平变化。方法用STZ诱导青春期大鼠糖尿病模型,实验分正常对照组、糖尿病组及胰岛素治疗组,分别以Northern blot及放射配基法检测睾丸、附睾、前列腺内雄激素受体的mRNA及蛋白水平。结果mRNA水平:生殖腺内各部位的雄激素受体mRNA表达三组间均无差异;蛋白水平:生殖腺内各部位糖尿病组的雄激素受体水平均显著低于正常组。结论糖尿病在翻译水平干扰了雄激素受体的合成,使受体水平下降。; 刘素嬛赵慧辛暨丽邹东辉王忠山刘毅杰; 关键词：青春期糖尿病生殖腺 AR 受体雄激素受体基因表达

成年糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内雄激素受体的表达研究被引量：6: 2005年; 目的:观察糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内是否存在雄激素受体(AR)的异常表达。方法:用链脲菌素(STZ)诱导成年大鼠糖尿病模型,实验分正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)及胰岛素治疗组(ID组),分别以Northern印迹及放射配基法检测睾丸、附睾和前列腺内AR的mRNA及蛋白质水平。结果:D和ID组血清睾酮水平低于C组(P<0.05);附睾内D和ID组AR的mRNA水平低于C组(P<0.05),睾丸和前列腺内D组AR的蛋白质水平低于C组(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内AR的表达降低,从而削弱了雄激素的生物利用度,这可能是导致患病大鼠性与生殖功能障碍的原因之一。; 刘素嬛王忠山; 关键词：雄激素受体糖尿病性腺雄性

短期糖尿病雄鼠睾丸氧自由基和抗氧化水平的研究被引量：23: 2003年; 目的　探讨大鼠睾丸组织在短期糖尿病状态下氧自由基和抗氧化水平的变化。方法　 4 8只Wistar雄性大鼠被随机分为 6组 ,每组 8只 :其中 1组腹腔注射枸橼酸缓冲液作为正常对照组 ,其余 5组腹腔注射链脲菌素 ,分别观察 1,3,5 ,7,14d。观察期满后断头处死 ,取睾丸 ,制备组织匀浆 ,分别检测组织中SOD、MDA、GSH、GST、GSH px、NO和NOS水平。结果　与正常大鼠相比 ,糖尿病大鼠睾丸组织中总SOD活力下降 ,MDA含量上升 ;GSH含量和GSH px 活力无显著性变化 ,GST活力下降 ;NO含量及NOS活力均下降。结论　睾丸组织的氧自由基 ,主要是O2 含量增加以及NO合成受抑制。; 王忠山赵慧邹冬辉许宗革辛暨丽; 关键词：雄鼠睾丸氧自由基抗氧化生殖功能障碍性功能障碍

人腺激肽释放酶2在毕赤酵母中的表达及活性测定: 2007年; 目的:利用在巴氏毕赤酵母细胞表达重组人腺激肽释放酶2(rhK2)。方法:构建表达载体pPICZαC-mhK2及具有3个表达盒子的pPICZαC-3mhK2。采用电转法,将重组表达质粒转染毕赤酵母X33细胞,甲醇诱导表达,离子交换层析纯化rhK2蛋白;检测rhK2的酶活性。结果:获得了高表达rhK2的酵母细胞株,其酶活性接近正常精浆中hK2的活性。结论:毕赤酵母能够成功表达具有天然活性的人腺激肽释放酶2(hK2)。; 路英丽赵慧邹冬辉李丹地郭焱王忠山; 关键词：毕赤酵母

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