国家重点基础研究发展计划(G1999016003)
- 作品数：19 被引量：317H指数：9
- 相关作者：齐力旺张守攻杨传平韩素英宋文芹更多>>
- 相关机构：中国林业科学研究院东北林业大学南开大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学自然科学总论文化科学更多>>
- 植物抗旱相关基因研究进展被引量：8
- 2006年
- 遭遇极端温度、干旱、高盐等胁迫时,植物需要调控多种基因,通过多种途径来抵御非生物胁迫的伤害。综述了植物在干旱胁迫发生时,信号传导和转录因子相关调控基因以及在水分运输、抗脱水、渗透调节以调节气孔开关等功能相关基因克隆的研究进展,并提出了今后开展植物抗逆研究的建议。
- 史胜青齐力旺孙晓梅韩素英张守攻
- 关键词：干旱胁迫信号传导调控基因功能基因
- 木本植物老根老叶总RNA的提取方法被引量：8
- 2007年
- 对于含有大量多糖、酚、酯、萜类等其他二次代谢产物的木本植物的老根和老叶,要从它们的组织中提取高质量的RNA一般都比较困难。以小叶杨的老根、麻黄的老根、沙冬青的老叶、梭梭老根为材料提取出质量比较好的RNA。
- 周春娥段红英齐力旺
- 关键词：木本植物老叶
- 西伯利亚蓼甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的cDNA克隆与序列分析被引量：27
- 2007年
- 根据NaHCO3胁迫下西伯利亚蓼茎部消减库中甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(GAPDH)表达序列标签序列设计引物,采用cDNA末端快速扩增技术,从西伯利亚蓼茎中扩增出GAPDH的全长cDNA序列。该cDNA序列全长1331bp,完整阅读框1014bp,编码337个氨基酸。属于稳定蛋白,具有GAPDH保守功能域。氨基酸组成与其他已知高等植物来自细胞质中的GAPDH基因cDNA序列具有很高的同源性,最高可以达到96%。通过转酿酒酵母INVSC1的NaHCO3和NaCl胁迫试验表明,转基因INVSC1(pYES2-GAPDH)有明显的抗盐胁迫特性。在10%NaHCO3和4mol·L-1 NaCl胁迫下,转基因INVSC1(pYES2-GAPDH)菌株存活率明显比INVSC1(pYES2)高,可以推测GAPDH基因赋予INVSC1(pYES2-GAPDH)抗NaHCO3和NaCl的能力。该基因的cDNA序列在GenBank中登录号为DQ922680。
- 李晓泽刘关君杨传平
- 关键词：西伯利亚蓼基因克隆
- 利用体细胞胚胎发生体系进行落叶松遗传转化技术的研究
- ＜正＞目前,落叶松等针叶树成功遗传转化的报道较少,主要是由于外源基因转化及整合困难、再生体系不完善等的限制。本研究采用农杆菌介导法,以预培养7—10d 的落叶松胚性细胞系 Y 为受体,利用体细胞胚胎发生与再生体系,进行了...
- 张守攻王静韩素英张文元齐力旺
- 文献传递
- 耐盐基因Bet-A转化小黑杨的研究被引量：85
- 2001年
- 本研究建立了小黑杨 (Populussimonii×P .nigra)组培再生体系 ,确定小黑杨芽分化最适宜培养基、生根培养基 ,然后进行卡那霉素敏感性试验。以小黑杨无菌苗叶片为转化受体材料 ,通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefacien)介导法将外源基因Bet A(编码胆碱脱氢酶 ,催化胆碱生成甘氨酸甜菜碱 )导入小黑杨(P .simonii×P .nigra)。对获得的 11株转化苗进行了PCR扩增检测和斑点杂交检测 ,其中 7株获得了 1 7Kb特异性扩增条带和杂交斑点 ,表现为阳性。从斑点杂交检测的转化苗中选取 3株杂交斑点明亮的转化子进行Southern印迹杂交分析 。
- 杨传平刘桂丰梁宏伟张慧
- 关键词：甘氨酸甜菜碱小黑杨耐盐基因盐碱地改良
- 中国部分杨属植物的染色体数目被引量：22
- 2005年
- 对中国杨属PopulusL.5组14种(银白杨P.albaL.、河北杨P.hopeiensisHu&Chow、毛白杨P.tomentosaCarr.、欧洲山杨P.tremulaL.、小叶杨P.simoniiCarr.、辽杨P.maximowicziiHenry、大青杨P.ussuriensisKom.、青杨P.cathayanaRehd.、小青杨P.pseudo-simoniiKitag.、香杨P.koreanaRehd.、毛果杨P.trichocarpaTorr.&Grog.、大叶杨P.lasiocarpaOliv.、欧洲黑杨P.nigraL.、胡杨P.euphraticaOliv.),3变种(新疆杨P.albaL.var.pyramidalisBge.、箭秆杨P.nigraL.var.thevestinaBean.、钻天杨P.nigraL.var.italica(moench.)Koehne),3杂交种(小钻杨P.×xiaozhuanicaW.Y.Hsu&Liang、北京杨P.×beijingensisW.Y.Hsu、加杨P.×canadensisMoench、晚花杨P.×canadensisMoenchcv.“serotina”、沙兰杨P.×canadensisMoenchcv.“Sacrau79”和意大利214杨P.×canadensisMoenchcv.“I-214”)进行了染色体计数。发现白杨组的毛白杨P.tomentosaCarr.、黑杨组的沙兰杨P.×canadensisMoenchcv.“Sacrau79”和意大利214杨P.×canadensisMoenchcv.“I-214”为三倍体(2n=3x=57),其余均为二倍体(2n=2x=38)。
- 张守攻陈成彬韩素英李秀兰任建中周玉权宋文芹陈瑞阳齐力旺
- 关键词：杨属染色体数目三倍体
- 运用cDNA-AFLP技术初步鉴定两种方法合成的cDNA的指纹图谱被引量：4
- 2006年
- 在植物基因克隆以及构建cDNA文库时,都需要合成高质量的双链cDNA,并要达到一定的数量。然而研究者经常受到试验样品量的限制。特别是比较稀少的植物材料,例如植物的根尖、茎尖或花的雌、雄蕊等,难以获得足够的RNA,以致影响cDNA的合成量,无法开展下游的实验。以PCR为基础合成第二链cD-NA的Smart技术(LD-PCR),能够以50ng的总RNA为反转录模板合成高质量的双链cDNA。但研究者对第二链采用PCR方法是否有些基因信息丢失或丰度上发生很大的变化存有疑虑。针对以上存在的问题,通过置换合成和长距离PCR(LD-PCR)两种方法合成3个月的梭梭幼苗茎尖双链cDNA,EcoRI和MseI限制性内切酶双酶切后,用16对选择性扩增引物对两种cDNA进行cDNA-AFLP的指纹图谱分析。结果表明,置换合成和LD-PCR两种方法合成的cDNA指纹图谱中,分别有条带约495条和470条。其中,相同的条带共计433条,不同的条带分别有62条和37条,分别为各自合成方法总指纹数的12.5%和7.87%,相同的指纹信息达87%以上。这说明两种方法合成的cDNA存在着较大的差异,合成方法对cDNA合成质量的影响较大,为研究人员选用何种cDNA合成方法提供了借鉴。
- 史胜青张守攻李春秀汪阳东齐力旺
- 关键词：CDNA-AFLP
- 毛白杨巯基蛋白酶抑制剂基因cDNA的克隆及序列分析被引量：3
- 2007年
- 为了发掘我国乡土树种毛白杨巯基蛋白酶抑制剂（CPI）基因资源,该研究在对已知植物巯基蛋白酶抑制剂氨基酸序列保守性和杨树表达序列标签（EST）序列分析的基础上,设计了1对简并引物和1对杨树特异性CPI引物,应用RT-PCR技术在毛白杨形成层中扩增出了一个696 bp的cDNA片段,将此片段连接到pGEM-T Easy载体上并测序.结果表明,该片段含有一个417 bp的开放阅读框,编码138个氨基酸残基.进一步对氨基酸序列分析表明,该氨基酸具有典型植物巯基蛋白酶抑制剂的保守区段,即靠近氨基端具有甘氨酸（G）残基和[LVI]-[AGT]-[RKE]-[FY]-[AS]-[VI]-x-[EDQV]-[HYFQ]序列,羧基端具有与酶活性有关的QXVXG结构和PW残基,说明毛白杨形成层中存在CPI基因并能够有效表达.氨基酸序列同源性分析表明,该基因与其他林木CPI的同源性在47%～68%之间.
- 张星耀覃庆锋贺伟梁军刘会香
- 关键词：毛白杨CDNA克隆
- 盐胁迫下西伯利亚蓼蛋白质双向电泳分析及质谱鉴定被引量：5
- 2007年
- 通过蛋白质双向电泳和质谱技术,对盐胁迫前后西伯利亚蓼的蛋白质组进行了比较分析.在pH 3～10范围内,在西伯利亚蓼地下茎蛋白表达图谱中发现23个蛋白质点胁迫后的表达量与对照有明显差异(±2倍以上),其中包括一个新增蛋白点.对表达量变化较大的11个蛋白点进行质谱分析,并通过数据库检索进行蛋白质鉴定与功能预测,确定了4种蛋白质.其中的两种蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase)和丙酮酸正磷酸二激酶(Pyruvate,orthophosphate dikinase)胁迫后高表达,说明地下茎细胞内正进行着旺盛的呼吸代谢,以提供维持植物生长发育以及抵抗外界胁迫所需的能量.
- 郑磊刘关君杨传平王大海
- 关键词：西伯利亚蓼盐胁迫双向电泳
- 小叶杨Δ~1-吡咯琳-5-羧酸合成酶(P5CS)基因克隆及在杂种落叶松中的转化被引量：13
- 2006年
- 以小叶杨为材料构建了干旱胁迫和正常生长条件下的cDNA文库,以特异性引物从中扩增出一条1 850bp大小的DNA片段,经序列分析证实该片段编码Δ1-吡咯琳-5-羧酸合成酶(P5CS)。将该片段构建入植物表达载体pBI121中,在落叶松杂交育种中利用花粉管通道法将带有该P5CS基因的植物表达质粒转化入杂种落叶松,收获球果取出种子,提取转化种子发芽长出幼芽的DNA,特异性PCR扩增和Southern,Western Blotting检测证实落叶松中已导入P5CS基因。
- 韩素英张守攻汪泉周春娥刘国华齐力旺
- 关键词：小叶杨P5CS基因转录因子杂种落叶松
