国家科技基础性工作专项(2008FY130100)
- 作品数：19 被引量：65H指数：5
- 相关作者：杨承槐李启红李俊平夏业才李慧姣更多>>
- 相关机构：中国兽医药品监察所北京出入境检验检疫局青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 蛋种鸡及其子代鸡新城疫抗体消长规律研究
- 2014年
- 为分析产蛋鸡及其子代鸡的新城疫抗体消长规律,对5、7、10、12月龄的海兰蛋鸡及其子代鸡在7、14、21和28日龄时的新城疫血凝抑制抗体进行了检测。结果表明,海兰蛋鸡在7月龄时新城疫HI抗体最高,为211.2,随后逐渐下降,12月龄时的HI抗体下降到29.5。子代鸡新城疫抗体水平随着日龄的增加而逐渐降低,21日龄时HI抗体效价在24左右;种鸡在7月龄时所产子代鸡的母源抗体最高。本研究为制定合理的新城疫疫苗免疫程序奠定了基础。
- 李启红李俊平李岭孙淼李慧姣杨承槐
- 关键词：新城疫抗体血凝抑制
- 鸭肠炎病毒AV1221株gI基因序列分析
- 鸭病毒性肠炎(Duck Virus Enteritis,DVE),俗称鸭瘟(Duck plague),是由鸭肠炎病毒(Duck EnteritisVirus,DEV)引起的鸭、鹅和其他雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传...
- 杨承槐李俊平李启红刘丹黄建华蒋桃珍李慧姣夏业才
- 文献传递
- 新城疫浓缩灭活疫苗的初步研究被引量：1
- 2012年
- 以103.0、104.0、105.0EID503个不同剂量接种非免疫鸡胚,收获鸡胚液,病毒含量测定结果显示,以103.0～104.0EID50剂量接种的鸡胚收获的抗原含量高。用该优化方法繁殖了一批新城疫抗原,采用截留分子量为100 kD的浓缩滤膜对新城疫抗原进行浓缩,对不同浓缩倍数的新城疫抗原制备疫苗进行了免疫效力试验。结果表明,以新城疫3倍浓缩抗原制备疫苗,以5μL剂量(现有相关产品效力检验的1/4剂量)免疫SPF鸡,即可达到现有同类产品的效力检验质量标准,高抗体水平至少可以维持35 d。本研究为进一步研制新城疫灭活浓缩疫苗用于低剂量免疫肉鸡提供了基础。
- 李俊平李启红杨承槐刘丹李慧姣蒋桃珍黄建华
- 关键词：灭活疫苗
- 兽用狂犬病灭活疫苗效力检验参考疫苗的研制被引量：1
- 2013年
- 将试制的狂犬病灭活疫苗效力检验参考疫苗分别采用NIH和ELISA方法进行了标定,并组织人员进行了协作标定,确定参考疫苗的效价为5.44IU。对标定后的参考疫苗进行了均一性和稳定性试验,结果参考疫苗的均一性好,在-20℃放置15个月和4℃放置2个月效价稳定,在37℃放置2个月效价大于2.00IU,符合我国和WHO对动物用狂犬灭活疫苗效力的要求。本课题为进一步自主研发检验用标准品提供了试验依据,同时也响应了WHO狂犬病委员会敦促各国研制和标定参考品的要求,填补了我国兽用狂犬病灭活疫苗效力检验标准品的空白。
- 李宁支海兵张伟薛青红李润印春生赵德明
- 关键词：效力检验标准品
- 鸡马立克病活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒检测方法的建立被引量：4
- 2014年
- 为建立鸡马立克病(MD)活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的间接免疫荧光检测方法,本研究通过向MD活疫苗中添加不同剂量的REV,用拟定的方法对样品检测REV。结果表明,Ⅰ型MD活疫苗、火鸡疱疹病毒活疫苗(Fc-126株)和MD二价活疫苗(HVT+CVI988株)中污染REV的最低检出量分别为每500羽份疫苗中污染5TCID50、10TCID50和15TCID50的REV。应用建立的方法对国内10家企业生产的43批MD活疫苗进行了检验,结果显示,2个企业生产的4批疫苗REV检测阳性。随机选取了5批IFA检测阴性样品和4批IFA检测阳性样品,按鸡检查法进行外源病毒检验,结果两种方法对REV污染检验结果的符合率为100%。因此,本研究建立的IFA法可替代鸡检查法,用于疫苗中REV污染的检验。
- 李启红杨承槐刘丹夏业才李慧姣李俊平
- 鸭肠炎病毒囊膜糖蛋白gE基因序列分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2014年
- 为探索鸭肠炎病毒（DEV）囊膜糖蛋白gE基因的相关特性和功能，应用PCR扩增了DEV的gE基因，全长1473bp，编码490个氨基酸，其中1～22位氨基酸为信号肽。gE基因与国内分离强毒CHv株、国内疫苗株同源性均为100％，与德国分离强毒2085株同源性达到99％，显示其高度保守。将gE基因完整开放阅读框（gE）和去信号肽的gE基因（gE’）分别克隆至真核表达载体pCDNA3．1．获得重组质粒pCDNA3．1-gE、pCDNA3．1-gE，然后应用脂质体法转染vero细胞。RT—PCR扩增证实gE、gE’均在细胞内进行了转录，而间接免疫荧光试验证实只有gE’基因在veto细胞中获得了表达，h研究gE蛋白的功能及研制鸭瘟抗体检测试剂盒奠定了基础。
- 文晶亮李启红李俊平刘丹李岭杨承槐李慧姣夏业才
- 关键词：鸭肠炎病毒真核表达
- 鸡抗REV血清的制备与检定被引量：7
- 2011年
- 用网状内皮组织增生症病毒(REV)HA9901株免疫SPF鸡,无菌采血制备鸡抗REV血清。通过ELISAI、FA、AGP、HI等方法对制备的血清进行检测,未检出禽类常见的其他17种(或亚型)病毒的抗体,该血清具有良好的特异性。通过测定,该血清用于间接免疫荧光试验(IFA)的效价为1∶2000,用于IFA检测REV的染色效果与REV单抗(11B18和11B54的混合物)相当。试验结果表明,该批血清1000倍稀释可作为一抗,用于REV的间接免疫荧光检测。
- 李俊平杨承槐李启红夏业才黄建华陈永忠
- 关键词：网状内皮组织增生症病毒抗血清间接免疫荧光试验
- 新型甲型H7N9禽流感病毒研究进展被引量：14
- 2015年
- 自2013年3月以来,我国华东地区上海、安徽、江苏、浙江、广东和香港等地先后发生不明原因重症肺炎病例,绝大多数患者曾有活禽鸟接触史,经病原体分离鉴定后,确诊为人感染H7N9禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）[1],由国家卫生和计划生育委员会（原卫生部）于2013年3月31日正式通报。截至2014年3月7日全国共确诊H7N9禽流感病例384例,死亡100例,目前病例均为散发，并未见人际间传播。这是H7N9禽流感病毒在人类中的首发，感染者发病急，致死率高；且H7N9禽流感病毒比其他H7亚型的流感病毒对人体具有更强地毒力和致命性[2]。该病毒对人体较好地适应性提示H7N9禽流感病毒对公众健康的威胁不容忽视。因此，我国相关医药卫生及兽医部门应及时做好防控应对措施，以免发生该型流感的广泛流行。
- 汪洋韩焘姜畔王敏杨承槐
- 关键词：病原学特征疫苗
- 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒核酸检测标准物质的制备研究被引量：8
- 2012年
- 针对目前口蹄疫病毒核酸扩增检测缺乏标准物质的现状,以口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型核酸为模板,分别设计引物扩增具有检测意义的5′端1nt～2208nt的片段(含完整的5′NCR)和3012nt～5155nt片段(含完整1D～2B区域),并克隆于pMD20-T。测序后采用体外转录方法制备2种RNA纯品,进行初步定量稀释后等量混合分装。采用荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验后,委托外部实验室对RNA片段进行拷贝数定值。结果显示,制备的标准品均匀性和稳定性良好。
- 吴亚琼高志强吴延功张鹤晓乔彩霞张利峰单虎尹燕博朱淑芬王慧珊
- 关键词：口蹄疫病毒核酸扩增标准物质
- 鸭肠炎病毒强毒参考株在感染鸭体内的动态分布研究被引量：1
- 2014年
- 为研究鸭肠炎病毒(DEV)强毒株在感染鸭体内的动态分布规律,根据DEV的g D基因序列设计检测引物RT-g DF和RT-g DR,建立了特异性强、敏感性高、重复性好的检测DEV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。应用已建立的方法,对DEV强毒参考株感染鸭的组织脏器进行了定量检测。结果显示,接种后6 h即可在所有受检组织中检测到DEV DNA,随着病程发展,DNA拷贝数持续升高,直至接种5 d后感染鸭全部死亡。其中结肠病毒DNA拷贝数为最高,达到1013.26copies/g,法氏囊、肝脏和盲肠次之,约1012copies/g。证实了DEV强毒对感染鸭的免疫器官、神经组织和消化系统均具有广泛的嗜性。
- 文晶亮李俊平李启红李岭孙淼李慧姣杨承槐夏业才
- 关键词：鸭肠炎病毒
