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超滤膜分离纯化当归补血汤的研究被引量：19: 2010年; 目的:探讨应用超滤膜技术分离纯化当归补血汤的工艺,并且考察当归分别和黄芪、红芪配伍后对其主要有效成分的影响。方法:采用不同截留分子量的膜,对工艺参数进行正交设计,以当归补血汤中的主要活性成分阿魏酸和芒柄花素为指标,考察不同膜及工艺参数对膜分离效果的影响。结果:截留相对分子质量为100KD的膜具有较好的膜分离效果,选择压力0.04MPa、料液温度40℃、进料体积流量12L/min的操作参数工作效率更高。当归∶黄芪(1∶5)配伍主要有效成分阿魏酸和芒柄花素的含量低于当归∶红芪(1∶5)配伍中阿魏酸和芒柄花素的含量。结论:利用膜分离工艺制备的当归补血汤,能更好的分离纯化其有效成分,提高有效成分的含量。当归与红芪配伍要好于当归与黄芪配伍。; 樊秦李应东舒畅景明蔺兴遥; 关键词：当归补血汤红芪配伍膜分离

新生大鼠心肌细胞原代培养分离方法的改进被引量：9: 2009年; 目的探索并改进乳鼠的心肌细胞原代培养方法。方法以混合消化酶(0.08%胰蛋白酶加0.04%～0.06%Ⅱ型胶原酶等量加入的混合液)消化心肌组织,差速贴壁分离纯化后,加入5-溴脱氧尿嘧啶抑制成纤维细胞分裂增殖。结果本方法培养的心肌细胞12h后即出现单个细胞搏动,2d～5d可见明显搏动的心肌细胞和心肌细胞团,成纤维细胞无明显增殖。结论本方法是一种较为理想的乳鼠心肌细胞原代培养方法。; 关欣李应东马海彦刘凯; 关键词：心肌细胞原代培养乳鼠

当归红芪超滤膜提取物抑制过氧化氢诱导的大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达被引量：4: 2009年; 目的探讨当归红芪超滤膜提取物对心肌细胞凋亡相关基因bc l-2、bax蛋白表达的影响。方法用高浓度的过氧化氢(400μmol/L)在W istar乳鼠原代培养的心肌细胞上建立细胞凋亡模型,用不同浓度的当归红芪超滤物(3.75、7.5、15 g/L)进行治疗。光镜下观察细胞形态;逆转录-多聚酶链反应和蛋白印迹法检测bc l-2、bax蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果与正常对照组相比,高浓度过氧化氢损伤组bc l-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);bax mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05);bc l-2/bax比值显著降低(P<0.01),差异具有统计学意义。与损伤组比较,高浓度和中浓度药物治疗组bc l-2 mRNA及其蛋白表达显著增加(P<0.05);bax mRNA及其蛋白表达显著降低(P<0.05);bc l-2/bax比值显著增加(P<0.01),差异具有统计学意义。低浓度药物治疗组则对bc l-2、bax表达无显著改变。结论当归红芪超滤膜提取物可通过上调bc l-2/bax的比值抑制心肌细胞的凋亡,对心肌细胞具有抗凋亡的保护作用。; 马燕花李应东赵健雄王婷; 关键词：心肌细胞逆转录-聚合酶链反应蛋白印迹

当归黄芪超滤膜提取物预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤保护作用的研究被引量：6: 2009年; 目的探讨当归黄芪超滤膜提取物预处理对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤和氧化损伤的保护作用。方法体外培养原代乳鼠心肌细胞,不同分子量及剂量当归黄芪超滤膜提取物预处理24h后,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,测定细胞存活率(MTT法)、细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果在缺氧/复氧损伤模型和氧化损伤模型中,当归红芪超滤膜提取物预处理明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量。结论当归红芪超滤膜提取物预处理对缺氧/复氧损伤以及氧化损伤心肌细胞都具有明显的保护作用,其可能与防止氧自由基的产生或抑制氧自由基对心肌细胞的损伤有关。; 关欣李应东刘凯马燕花; 关键词：当归心肌细胞连二亚硫酸钠

超滤膜纯化当归多糖的研究被引量：8: 2009年; 目的研究超滤法分离纯化当归多糖组分的工艺。方法采用截留不同分子量的膜对当归多糖提取液进行超滤,并对操作参数进行正交设计,以当归多糖为检测指标优选膜分离工艺条件。结果当归多糖分别用相对分子量为200、100、50、20kD的超滤膜进行分离。超滤前多糖含量30.47%,超滤后200kD以下的多糖含量最高,为65.42%。试验确定超滤操作条件为:加1倍量的水,操作温度35℃,操作压力0.3MPa。结论该工艺简单可行,所得到的当归多糖纯度较高。; 樊秦李应东赵文君景明; 关键词：当归多糖超滤法纯化正交试验

当归红芪超滤膜提取物含药血清对辐射心肌成纤维细胞SOD和羟脯氨酸的影响被引量：8: 2010年; 目的观察当归红芪超滤膜提取物含药血清对辐射心肌成纤维细胞SOD和羟脯氨酸的影响。方法用胰酶-胶原酶消化法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞,建立体外培养体系,通过10万分子量的超滤膜提取物制备不同浓度和不同期限的含药血清。将已经过药物干预24 h的第2代细胞进行辐射剂量为10 Gy的辐射,继续培养24 h,黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,碱水解法检测羟脯氨酸含量。结果与空白组比较,模型组SOD活性显著下降,羟脯氨酸含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,药物组SOD活性显著升高(P<0.05或P<0.01),且药物组(7 d)显著优于药物组(3 d)(P<0.05),而羟脯氨酸含量下降并不显著(P>0.05)。结论辐射可引起SOD活性下降、羟脯氨酸含量增加,而当归红芪超滤膜提取物能去除氧自由基,并且长期疗效优于短期,但对羟脯氨酸含量并无影响。; 刘野李应东; 关键词：当归红芪心肌成纤维细胞 SOD 羟脯氨酸

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国家科技支撑计划(2006BAI06A20-04)