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猪流感病毒H1N1亚型天津分离株核蛋白、基质蛋白、非结构蛋白基因克隆与序列分析: 2014年; 从天津地区不同猪场分离到6株H1N1亚型猪源流感病毒(SIV)。根据GenBank发表的H1N1亚型SIV的核蛋白(NP)、基质蛋白(M)及非结构蛋白(NS)基因序列,分别设计3对引物,将RT-PCR产物克隆至pMD18-T载体,进行测序分析。遗传进化分析结果表明:A/swine/Tianjin/TJ2/2005(H1N1)与A/swine/Tianjin/TJ4/2006(H1N1)的NP、M及NS基因核苷酸序列在遗传进化树中均与A/swine/Guangdong/33/2006(H1N1)位于同一分支上,属于古典型H1N1猪谱系;A/swine/Tianjin/TJ3/2006(H1N1)与A/swine/Tianjin/TJ8/2006(H1N1)的NP、M及NS基因核苷酸在遗传进化树中均与A/Dunedin/2/2000(H1N1)组成一个大分支,可能起源于人谱系;A/swine/Tianjin/TJ6/2009(H1N1)与A/swine/Tianjin/TJ7/2009(H1N1)NP、M及NS基因核苷酸序列在遗传进化树中均与A/swine/Jiangsu/s15/2011(H1N1)位于同一分支上,属于类禽H1N1猪谱系。本试验对6株H1N1亚型SIV的NP、M及NS全基因序列进行分析,在一定程度上揭示了天津地区H1N1亚型SIV的基因进化与流行情况。; 孙英峰鄢明华路超李秀丽张莉韩伟任卫科田向学; 关键词：猪流感核蛋白基因非结构蛋白基因

羧甲基葡聚糖注射剂药效学研究被引量：1: 2014年; 试验旨在研究羧甲基葡聚糖(CMG)注射剂药效,从而为临床动物疾病防制提供试验依据。试验选取小鼠作为试验动物,进行急性毒性试验及体内抗金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染试验。另外,采用MTT方法测定了CMG对奶牛淋巴细胞转化率影响,并对CMG注射剂进行了奶牛临床初步应用试验。结果表明,小白鼠对CMG最大耐受量在240mg/只以上,且在4mg/只浓度下对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染的保护率分别为60%、62.5%、87.5%;CMG能明显提高奶牛淋巴细胞转化率,临床应用试验组比空白对照组隐性乳腺炎发病率下降26.8%。本试验结果表明,CMG注射液可作为潜在新型兽用免疫增强剂在动物临床应用。; 孙英峰王英珍池晶晶王东; 关键词：注射剂抗感染免疫增强

硫酸酯化酵母β-葡聚糖活性及其抗猪流感病毒机理研究进展: 2014年; 酵母β-葡聚糖是一类水不溶性免疫多糖,经硫酸酯化修饰后,所带有的亲水硫酸基团,不仅提高多糖水溶性,而且引起了生物活性的改变,表现出较强的抗病毒活性,其生物活性显著增强,属一类新型高效生物应答剂。论文综述了酵母β-葡聚糖经硫酸酯化修饰后生物学活性及其可能抗猪流感病毒机理,为进一步研究开发此类新型药物奠定基础。; 孙英峰路超杨春蕾田向学韩伟任卫科; 关键词：活性猪流感病毒

猪流感病毒LAMP检测方法的建立被引量：7: 2014年; 本试验针对猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)NP基因保守区域设计并合成6条引物,建立了SIV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,该方法可特异性检测H1N1、H1N2、H3N2、类禽H1N1亚型SIV及甲型H1N1流感病毒,但不能检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、日本乙型脑炎病毒;该方法的最低检测量为100拷贝/μL质粒DNA。结果表明建立的LAMP方法具有较高的敏感性和特异性,可用于SIV的快速检测。; 张莉鄢明华李秀丽路超王利丽韩伟孙英峰; 关键词：猪流感病毒环介导等温扩增

硫酸酯化酵母β-葡聚糖对H1N1猪流感病毒血凝作用和mRNA转录的影响被引量：2: 2015年; 为研究硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作用及对mRNA转录的影响,以猪流感病毒A/tianjin/1/TJ2(H1N1)感染MDCK细胞为模型,采用血凝抑制试验(HI)及SYBR Green Real-time PCR方法,探索硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作用及其对mRNA转录影响。结果显示,硫酸酯化酵母β-葡聚糖在浓度超过1.25 mg/m L时,能对猪流感病毒血凝产生抑制作用,且在5 mg/m L时对猪流感病毒mRNA转录具有抑制作用。因此,硫酸酯化酵母β-葡聚糖具有抑制流感病毒在MDCK细胞复制的作用,其作用机制可能与抑制流感病毒HA靶点及影响mRNA转录有关。; 孙英峰王利丽路超李秀丽张莉杨春蕾冯婧任卫科田向学; 关键词：H1N1 MRNA转录

硫酸酯化酵母β-葡聚糖抗H1N1猪流感病毒作用及对神经氨酸酶活性的影响被引量：1: 2015年; 研究硫酸酯化酵母β-葡聚糖对H1N1猪流感病毒的体外抑制作用及对神经氨酸酶活性的影响。采用细胞感染模型,应用MTT法检测药物对MDCK细胞的半数毒性浓度(TC50)、半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI),并结合神经氨酸酶抑制试验检测药物对其活性的影响。结果表明,硫酸酯化酵母β-葡聚糖对MDCK细胞最大无毒浓度为5.34 mg/m L,其半数抑制浓度(IC50)为0.58 mg/m L,治疗指数(TI)为18.0;当药物浓度≥1.25 mg/m L时,能明显降低H1N1猪流感病毒神经氨酸酶的活性。提示硫酸酯化酵母β-葡聚糖有确定的体外抑制H1N1猪流感病毒的作用,并能影响病毒神经氨酸酶的活性。; 孙英峰韩伟杨春蕾李秀丽张莉冯婧任卫科; 关键词：体外神经氨酸酶

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天津市应用基础与前沿技术研究计划(12JCYBJC20100)