广东省科技计划工业攻关项目(2008B030301080)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：曾爱红方建培郭明明邹德志欧阳颖更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学中山大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 造血干细胞移植患者人巨细胞病毒临床分离株对更昔洛韦的敏感性测定
- 2013年
- 目的测定8例造血干细胞移植术后人巨细胞病毒（HCMV）临床分离株对更昔洛韦（GCV）的敏感性，监测该类患者对更昔洛韦的耐药状况。方法收集8例造血干细胞移植术后发生HCMV感染而接受GCV治疗的患者血液或尿液标本，采用HELF细胞培养法分离并鉴定HCMV临床株，50％终点法测定各临床毒株的感染性滴度TCID50,并用MTT法测定各毒株对更昔洛韦的敏感性。结果8株HCMV病毒液的TCID50分别为：10^-4.12／0．1-10^-4.62／0．1ml；8株临床HCMV分离株对更昔洛韦的半数病毒抑制浓度IC卯分别为0．482～1．519mg／L。结论该实验HCMV临床分离株对更昔洛韦敏感性均较高，未发现临床耐药株。
- 曾爱红欧阳颖董德坤崔喜梅方建培
- 关键词：人巨细胞病毒更昔洛韦药物敏感性
- 青蒿琥酯体外分次给药对人巨细胞病毒的抗病毒效应被引量：2
- 2014年
- 目的 研究青蒿琥酯（ART）体外对人巨细胞病毒（HCMV）实验室标准株及耐药株的抗病毒作用，了解分次给药法是否能增强ART抗病毒效应。方法 1.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定ART的细胞毒性，计算ART对人胚肺成纤维细胞（HEL）的最大无毒浓度（TC0）与半数中毒浓度（TC50）。2.ART抗 HCMV 作用检测：以HCMV标准株及耐药株感染HEL后，再加入含有不同浓度 ART的新鲜培养基，设更昔洛韦（GCV）对照、细胞对照和病毒对照，培养7～10 d，待病毒对照组病变达＋ ＋ ＋ ～ ＋ ＋ ＋ ＋时，采用 MTT比色法测定OD490值，计算受试药物病毒抑制率，Probit回归法计算药物对HCMV的半数抑制浓度（IC50）。3.测定ART分次给药对HCMV AD169株的抗病毒效应：实验分3组，1组：药物总量一次性给予；2组：药物总量分3次，每天给药1次；3组：药物总量分6次，每天给药3次。以GCV组作为对照，MTT法测定各组OD490值，并计算各药物浓度组的病毒抑制率，采用SPSS18.0统计软件，对各组OD值进行单因素方差分析，比较各组间差异。结果 1.ART在62.5 μmol/L以内未见明显细胞毒性作用，TC0和 TC50分别为 62.5 μmol/L和 171.7 μmol/L。2.在5 μmol/L、15 μmol/L及30 μmol/L时，ART与GCV对 HCMV AD169株生长均有明显的抑制作用，二者比较差异无统计学意义，其中GCV IC50为3.49 μmol/L，而ART IC50为2.17 μmol/L，ART治疗指数为28.8，GCV 治疗指数为716.3。另外，ART对 HCMV耐药株生长仍有明显的抑制作用，而GCV抑制作用明显下降，二者比较差异有统计学意义，其中GCV IC50为44.4 μmol/L，ART IC50为2.5 μmol/L。3.在15 μmol/L 及30 μmol/L 浓度下，ART每天 2次给药较每天 1次给药及单次给药，对病毒的抑制率有显著提高，差异有统计学意义（P 〈0.01）；而GCV同样按上述方法给药，则对病毒抑制率影响不大（P 〉0.05）。结论 1.ART浓度在 62.5μm
- 曾爱红欧阳颖郭明明戴瑄邹德志方建培
- 关键词：人巨细胞病毒青蒿琥酯抗病毒效应
- 造血干细胞移植后巨细胞病毒药敏检测及UL97基因突变分析被引量：1
- 2014年
- 目的通过表型和基因型分析方法,初步了解造血干细胞移植术后巨细胞病毒(HCMV)感染患儿的耐药情况。方法采用人包皮成纤维细胞培养分离并鉴定HCMV临床株;Reed.Muench法测定其半数组织培养感染量(TCID50),空斑减数实验测定病毒对丙氧鸟苷的敏感性,同时以HCMV UL97基因为靶序列,用Nested-PCR扩增目的基因,并对PCR产物做直接序列测定。结果成功从患者尿标本中分离出HCMV临床病毒株,测得其TCID50为:10-4.618/0.1 ml;IC50值为5.847μmol/L,对丙氧鸟苷高度敏感;同时基因序列与AD169株的序列相比较,发现四个位点发生碱基突变,分别是1509 T→C、1575 C→T、1794 T→C、1815 C→G;上述突变的编码子分别为503,525、598和605,前3个位点的突变未导致相应氨基酸改变,第四个位点氨基酸则改变为D605E,未发现与耐药有关的基因突变。结论初步建立造血干细胞移植后HCMV耐药表型和基因型检测的实验方法,本次试验从临床标本中尚未发现HCMV耐药现象。
- 曾爱红董德坤崔喜梅郭明明邹德志方建培
- 关键词：人巨细胞病毒丙氧鸟苷基因突变
