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FRET检测tk基因诱导ACC-M细胞凋亡: 2007年; 研究肿瘤细胞凋亡是进行其药物筛选的重要方法之一。利用已构建的基于Caspase酶的指示剂CD3质粒与HSV-tk/ACV系统结合,通过荧光能量共振转移(FRET)技术研究了细胞凋亡,并采用ACV药物诱导表达了TK-GFP-CD3的ACC-M肿瘤细胞和CD3的ACC-M肿瘤细胞。结果表明,FRET成像检测分析出ACV药物能够诱导转有TK基因的人涎腺癌(ACC-M)肿瘤细胞凋亡,通过对仅转有CD3质粒的ACC-M肿瘤细胞没有影响。这种技术的结合可以用于细胞的凋亡药物的筛选。; 熊涛陈延平; 关键词：细胞凋亡

实时荧光定量RT-PCR检测糖皮质激素α-受体mRNA表达水平方法的建立: 2008年; 建立用荧光定量RT-PCR的方法检测人糖皮质激素α-受体(GR-α)mRNA水平的标准曲线.根据人糖皮质激素α-受体mRNA序列(GeneBank No.NM_000176)设计引物,反转录出cDNA,再插入到PMD18-T载体中.再根据cDNA设计引物和探针,采用Taq Man探针荧光定量RT-PCR的检测方法,构建人GR-α基因表达量的标准曲线.由PMD18-T-GR-α所构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含1×101-1×105拷贝数的人GR-α基因分子时,扩增反应Ct值与拷贝数的对数呈较好的线性关系)、灵敏度高(可检测出低于10个拷贝/μL的样品)、特异性强、准确可靠.; 熊涛曹政; 关键词：TAQMAN探针

应用光学成像监测肿瘤治疗及抗微生物感染的实时过程被引量：1: 2009年; 目的:探讨光学成像技术与基因标记技术结合的非侵入性在体分子荧光成像实时监测肿瘤治疗和抗微生物感染的过程。方法:利用绿色荧光蛋白(GFP)转染人涎腺癌细胞ACC-M,建立GFP标记肿瘤皮下肿瘤生长治疗模型,并对模型进行整体荧光成像的初步研究;同时也进行表达红色荧光蛋白(DsRed2)细菌的腹部感染及治疗模型的光学成像。结果:单克隆ACC-M-GFP细胞稳定高水平表达GFP。2只成瘤裸鼠右上侧皮下肿瘤随时间推移,荧光区域面积逐渐增加,在瘤内注射后荧光区域面积略变小。注射大肠杆菌12h后感染已有扩散发生,36h时荧光扩散至整个腹部,在48h后裸鼠死亡;同时注射卡那霉素者在12h时仅少许扩散,在36h时荧光没有扩散并且荧光强度减弱,在48h后荧光基本上已探测不到,裸鼠存活。结论:光学成像可以从时间上和空间上反映肿瘤生长及细菌消长的全过程,因而这两种模型同在体光学成像的结合为研究肿瘤治疗药物和抗生素筛选提供了一种研究平台。; 熊涛; 关键词：光学成像

日本血吸虫可溶性抗原基因的生物信息学分析: 2012年; 应用国际互联网生物信息学网站，分析整理了日本血吸虫（Schistosomasis japonicum）抗原基因编码的蛋白质序列。结果表明，在15个日本血吸虫抗原基因编码的蛋白中，等电点最高的是AF500622，最低的是AM26213；亲水性最高的是AF370036，最低的是AF50062。对日本血吸虫抗原基因编码的蛋白质进行生物信息学的整理分类，为进行抗原提取和可溶性研究奠定了基础。; 熊涛张枫卢利莎倪凤娥; 关键词：生物信息学基因

黄鳝抗菌肽hepcidin基因cDNA的克隆及表达分析被引量：6: 2009年; 根据已知鱼类抗菌肽hepcidin的同源性设计简并引物,利用同源克隆结合RACE法从黄鳝(Monopterus albus)肝脏中扩增得到了黄鳝hepcidin基因全长cDNA序列(GenBank accession number FJ436808).结果表明,黄鳝hepcidin基因cDNA全长712bp,5′端非翻译区有133bp,3′端非翻译区有306bp,包含1个273bp的开放阅读框,编码1个长90氨基酸的前体肽.同源性分析表明,黄鳝hepcidin推测的氨基酸序列与其他鱼类报道的hepcidin具有较高的同源性,并具有8个半胱氨酸这一典型特征,是hepcidin家族的1个新成员.采用半定量PCR法对该基因在健康成体不同组织的转录本和脂多糖(LPS)对该基因表达的影响进行了分析.结果发现,该基因在肝脏中表达量最高,其次是肾脏,在心脏、皮肤、脑、血液、小肠、脾脏和胃中的表达量较低,而在肌肉中没有检测到该基因的转录本;LPS注射24h后,各组织的hepcidin基因表达量都有明显升高.; 李伟孙文秀熊涛; 关键词：黄鳝抗菌肽 HEPCIDIN基因克隆

日本血吸虫未成熟虫卵的制备: 2011年; 从感染兔肝组织中分离、纯化具有生物活性的日本血吸虫虫卵,是分子生物学研究的基本需要。为改进日本血吸虫(Schistosoma japonicum)未成熟虫卵的制备方法,将感染血吸虫尾蚴30d的家兔剖杀后,于无菌条件下摘取肝脏,经匀浆、分级过滤、中速低温离心沉淀、反复洗涤,再将粗虫卵置于0.25%胰蛋白酶消化液中消化4h,当混杂组织被消化成单个细胞后,用PBS(pH 7.2)稀释,以360目分样筛过筛,截留未成熟虫卵,获得大量高纯度、具有活性的虫卵,毛蚴孵出率可达80%以上。此法经济简便、快速易行、效率高,适于大批量操作。; 熊涛万灿倪凤娥张枫; 关键词：虫卵纯化

南瓜脆片微波干燥工艺研究被引量：14: 2011年; [目的]研究南瓜脆片微波干燥的方法。[方法]对微波功率、切片厚度、处理时间和预处理后南瓜片初始含水率等因素对膨化干燥南瓜脆片的影响进行研究和比较。[结果]在微波功率为中高火,南瓜片的切片厚度为3 mm,预处理后南瓜片初始含水率为18%左右的条件下,可得到高品质的南瓜脆片,干燥390 s时膨化率高达220%。[结论]微波干燥很适合南瓜脆片的制作。; 熊涛龙娇; 关键词：南瓜片微波膨化干燥

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湖北省教育厅青年基金(Q200712005)