国家自然科学基金(81071808)
- 作品数：24 被引量：122H指数：5
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- 细胞因子诱导的杀伤细胞基本特性及抗肿瘤效应研究被引量：1
- 2014年
- 目的建立培养细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞方法,并评价其基本特点、体内外抗肿瘤活性及安全性。方法使用抗CD3单克隆抗体、rhIL-2及rhIFN-γ刺激PBMC细胞,使其在体外大量扩增,利用流式细胞术、体外杀伤实验及荷人卵巢癌小鼠模型检测CIK细胞的特点及抗肿瘤活性;并检测CIK细胞中外源性因子污染情况及其急性毒性作用。结果体外培养21 d后,CIK细胞总数可达1010以上,其主要成分为CD3+CD8+T细胞及CD3+CD56+NKT细胞,CIK细胞在体外对Ho8910、A549、K562及HepG2细胞均有较高的杀伤活性,并对荷瘤小鼠具有治疗作用。同时在CIK细胞中未检测到外源性病原体污染。结论 CIK细胞在体内外均具有较高的抗肿瘤活性且无毒性作用。
- 程民陈稳毛菊王静程翠沈国栋卞庚徐婷娟徐维平沈干胡世莲
- 关键词：免疫疗法细胞培养技术细胞因子诱导杀伤细胞卵巢肿瘤
- 5-氮杂-2-脱氧胞苷及曲古抑菌素A对人胃癌SGC-7901细胞生长及CHFR基因表达水平的影响被引量：7
- 2012年
- 背景与目的:抑癌基因甲基化具有可逆性,相关药物可逆转甲基化使失活的基因重新表达。本研究观察去甲基化制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞活性及CHFR基因mRNA和蛋白表达水平的影响。方法:使用不同浓度的5-Aza-dC和(或)TSA处理SGC-7901细胞,分为对照组、TSA组(250 nmol/L)、5-Aza-dC组(5μmol/L)及TSA(250 nmol/L)联合5-Aza-dC(5μmol/L)组等4个组,采用台盼蓝染色法检测细胞活性,并利用RT-PCR及蛋白质印迹法(Westernblot)方法检测CHFR基因mRNA和蛋白表达的水平。结果:5-Aza-dC和TSA作用24、48、60和72 h后SGC-7901细胞活性均被抑制,且抑制率呈浓度和时间依赖性,两药联合作用更明显;SGC-7901细胞经5-Aza-dC单独或与TSA联合干预后,能提高CHFR基因mRNA和蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:5-Aza-dC和(或)TSA均能抑制细胞活性,提高CHFR基因mRNA和蛋白表达水平,两药联合的效果比单药明显增加,为临床胃癌患者的化疗方案提供了实验依据。
- 刘林青胡世莲沈干徐维平沈建军姜晓东黄大兵黄毕林方中良王海唐杨琛
- 关键词：曲古抑菌素A胃癌SGC-7901细胞CHFR基因
- 5-AzadC联合TSA对人胃癌SGC-7901细胞生长及Reprimo基因表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨5-氮杂2-脱氧胞苷(5-AzadC)联合曲古抑菌素A(TSA)对人胃癌SGC-7901细胞生长及Reprimo基因表达的影响。方法 SGC-7901细胞分为对照组、5-Aza-dC、TSA、5-AzadC+TSA组,MTS法测定各组药物对其生长的影响,RT-PCR和Western Blot法分析SGC-7901细胞Rep-rimo基因mRNA和蛋白表达情况。结果 5-AzadC和(或)TSA分别作用24、48、60、72 h后均抑制细胞生长,两药联合组比单药组抑制率显著增强,并且随着药物浓度增加和作用时间延长,抑制率增强更加显著;5-AzadC和(或)TSA干预胃癌细胞72 h后,联合用药组和单药组比较,Reprimo mRNA和蛋白的表达显著增强(P<0.05)。结论 5-AzadC联合TSA干预可抑制SGC-7901细胞生长,抑癌基因Reprimo再表达发挥抑癌作用。
- 王海胡世莲沈干孙玉蓓沈国栋徐维平黄毕林方中良
- 关键词：曲古抑菌素ASGC-7901细胞
- 染料木素抑制HER2阳性人乳腺癌与卵巢癌细胞增殖作用的研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究染料木素对人HER2高表达乳腺癌与卵巢癌细胞增殖的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用流式细胞分析技术、western blotting及细胞增殖与凋亡检测试剂盒等检测方法,对染料木素作用于HER2表达阴性的MCF-7细胞与通过稳定转染HER2而获得的MCF-7-1以及BT-474、SKOV-3等HER2阳性表达细胞的效果进行了剂量或时间反应关系的研究。结果浓度为0.1～10μg/ml的染料木素对HER2表达水平低的MCF-7细胞增殖的影响不大,而对HER2高表达的MCF-7-1、BT-474和SKOV-3细胞的增殖有显著的抑制作用(与DMSO对照组相比,P<0.01),且表现出剂量依赖性反应关系。用10μg/ml的染料木素作用12～48 h可以诱导BT-474细胞凋亡或坏死(与DMSO对照组相比,P<0.01),且表现出时间依赖性反应关系。结论染料木素能够明显抑制HER2阳性肿瘤细胞的增殖,这一作用可能是通过下调肿瘤细胞HER2信号转导而介导的。
- 沈国栋王弦吴强刘兢肖卫华胡世莲
- 关键词：染料木黄酮
- 胃癌细胞株MKN-45裸鼠移植瘤模型的建立与应用被引量：1
- 2013年
- 目的建立低分化高转移性胃癌细胞株MKN-45裸鼠移植瘤模型,并观察该移植瘤对抗癌药物的敏感性。方法 5×106个MKN-45胃癌细胞接种于裸鼠右侧胁部脂肪垫下,观察成瘤情况。接种2周后,分别将荷瘤小鼠分为生理盐水对照组与化疗药物组,其中化疗药物组给予1 mg·kg-1紫杉醇与5 mg·kg-1氟尿嘧啶,1周1次,连续3周;生理盐水对照组则给予生理盐水。实验结束后采用HE染色观察移植瘤病理组织学特点,采用免疫组化法检测移植瘤的核增殖抗原Ki-67与波形蛋白(vim-entin)及钙黏蛋白(E-cadherin)表达情况。结果接种的12只裸鼠均荷瘤成功,且移植瘤成瘤时间早,肿瘤大小及形状较一致,并保持了原发肿瘤vimentin高表达与E-cadherin低表达等重要的生物学特征。使用临床抗癌药物紫杉醇与氟尿嘧啶联合处理3周,结果与生理盐水对照组相比,化疗组肿瘤生长速度明显放缓,肿瘤体积明显缩小,肿瘤组织Ki-67表达下降,新生血管减少,肿瘤细胞凋亡明显,但vimentin与E-cadherin表达变化不明显。结论胃癌细胞株MKN-45裸鼠移植瘤模型建立成功,为开展胃癌发病机制及治疗药物药理作用等研究提供了理想的实验平台。
- 卞庚赵文英杨志敏叶晓斌陈冬云陈景华耿飚沈国栋程民
- 关键词：胃癌MKN-45动物模型钙黏蛋白波形蛋白
- ITF2的表达水平与胃癌转移相关被引量：1
- 2016年
- 目的探讨免疫球蛋白转录因子2(ITF2)在胃癌中的表达水平和临床意义。方法收集42例胃腺癌和20例良性胃黏膜组织蜡块,应用免疫组化SP法检测临床标本中ITF2的蛋白表达水平,并分析其表达量与患者临床病理各参数之间的关系。另以胃腺癌细胞HSC44-PE与44As3以及人胃黏膜上皮细胞系GES-1为研究对象,使用Western blot法检测细胞中ITF2表达水平,划痕实验方法检测HSC44-PE与44As3细胞的转移能力。结果恶性组织中ITF2蛋白表达强度明显高于良性组织,两者间差异有统计学意义(Z=-2.401,P<0.05);伴随有淋巴结转移的胃癌组织中ITF2表达量明显高于无转移病例,且随着肿瘤浸润深度、TMN分期的升高而升高(P<0.05);但与年龄、性别和肿瘤分化程度差异均无统计学意义;ITF2表达量高的胃癌细胞44As3转移潜能明显高于转移潜能较低的胃癌细胞HSC44-PE和正常胃上皮细胞GES-1(P<0.05)。结论ITF2在胃癌组织中呈高表达,尤其与肿瘤转移潜能相关,提示该蛋白可能参与胃癌的发生和发展,并可能成为胃癌进展的监测指标。
- 徐佳慧胡世莲沈国栋翁海燕徐婷娟沈干
- 关键词：胃癌
- 地西他滨联合化疗药物对胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2012年
- 目的:研究地西他滨单独或联合5-氟尿嘧啶/紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞株的抑制作用。方法:应用MTS方法检测地西他滨单独或联合5-氟尿嘧啶/紫杉醇作用于胃癌SGC-7901细胞株后,在不同浓度梯度和不同时间在490nm波长处的吸光度(A)值,并计算细胞增殖抑制率。同时,采用流式细胞仪检测中间浓度组各药物单独或联合应用在48h对细胞凋亡的影响。MTS检测时间分别选择细胞增殖12、24、36、48、60及72h,流式细胞仪检测时间选择48h。结果:地西他滨对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用均随着时间和浓度的递增而逐渐升高;地西他滨联合5-氟尿嘧啶或紫杉醇组对胃癌细胞的抑制率均较单药组升高(P<0.05)。在诱导细胞凋亡方面,地西他滨联合用药组48h的细胞凋亡率均高于单独用药组(P<0.05)。结论:地西他滨能增强5-氟尿嘧啶和紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用,能促进5-氟尿嘧啶和紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞的凋亡。
- 黄毕林胡世莲沈干沈国栋孙玉蓓徐维平黄大兵王海方中良
- 关键词：地西他滨SGC-7901细胞株5-氟尿嘧啶MTS
- Arg早期强化的EN对胃癌患者术后免疫功能的影响被引量：4
- 2015年
- 目的分析联合应用精氨酸(Arg)肠内营养(EN)对胃癌患者根治术后免疫功能的影响,以评价免疫营养对于胃癌患者的化疗疗效、不良反应、生活质量、无进展生存期(PFS)的影响。方法收集符合纳入标准(经PG-SGA评分筛选)的胃癌患者90例,随机分成三组:单纯化疗组(A组)、Arg联合化疗组(B组),术后Arg联合化疗组(C组),每组30例。检测免疫指标、不良反应及无进展生存期指标等。结果经营养治疗后,A、B、C三组的免疫营养状态均呈逐渐好转趋势,但免疫指标B、C组均明显高于A组(P<0.05),B、C组中位无进展生存期高于A组(P<0.05)。结论早期给予精氨酸强化的肠内营养,可增强胃癌患者机体免疫功能,以提高临床化疗效果,明显改善患者生存质量。
- 姜晓东王峰胡冰季楚舒何义富黄大兵胡世莲
- 关键词：精氨酸胃癌肠内营养
- 转录因子7类似物2在胃癌中的表达及其与铂类药物耐药性的关系被引量：3
- 2018年
- 目的研究转录因子7类似物2(TCF7L2)基因在胃癌中的表达情况及其与胃癌化疗耐药的关系。方法采用qRT-PCR方法检测15例胃癌及其癌旁组织中TCF7L2的mRNA量,western blot实验检测胃癌细胞株SGC-7901、HSC44、44AS3、N87、MKN45、MGC803与永生化正常胃黏膜上皮细胞GES-1中TCF7L2蛋白表达量。通过基因稳定转染技术构建高表达TCF7L2的SGC-7901/TCF7L2细胞株和SGC-7901/CON(对照组)细胞株,用细胞计数法分别检测两者对顺铂和卡铂的耐药情况。结果 TCF7L2在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,在胃癌细胞株中的表达水平也明显高于对照细胞GES-1。高表达TCF7L2的SGC-7901/TCF7L2细胞株对顺铂与卡铂的耐受性明显强于对照细胞株。结论 TCF7L2基因表达与胃癌的发生发展有正相关关系;TCF7L2高表达可能是胃癌对铂类药物化疗耐受的原因之一。
- 付翠群丁西平沈国栋侯冠峰戴朦沈干胡世莲
- 关键词：TCF7L2药物耐受性卡铂
- 吉西他滨联合顺铂与紫杉醇联合顺铂/卡铂治疗非小细胞肺癌疗效的系统评价被引量：48
- 2016年
- 目的:比较顺铂/卡铂联合紫杉醇方案(TP/Tcb)与顺铂联合吉西他滨方案(GP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效及安全性。方法:检索Cochrane图书馆,Pubmed,EMbase,CBM,CNKI,万方等数据库,纳入随机对照试验,检索的截止日期为2010年5月8日,采用Cochrane系统评价方法进行评价。结果:共纳入7个研究1 872例患者,TP/Tcb方案在有效率,临床获益率及远期生存期方面(1年生存率、2年生存率)与GP方案差异无统计学意义;在安全性方面,TP/Tcb方案的血小板减少及贫血(Ⅲ-Ⅳ级)的发生率低于GP方案([RR=0.22,95%CI(0.09,0.55),P=0.001],[RR=0.44,95%CI(0.33,0.59)],P<0.000 01)。结论 :TP/Tcb方案与GP方案治疗NSCLC疗效相当,但TP/Tcb方案毒副反应轻。
- 赵卫刚胡世莲丁西平殷实黄毕林方向刘卉卉
- 关键词：顺铂卡铂紫杉醇吉西他滨
