国家自然科学基金(30530380)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：中国科学院中国科学院研究生院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- Sox1基因在爪蟾早期发育中的时空表达图式(英文)被引量：4
- 2007年
- 克隆了非洲爪蟾的Sox1基因并研究了它在非洲爪蟾早期发育过程中的时空表达图式,比较了Sox1—3基因在发育的脑和眼中的表达图式。序列比对分析显示Sox1—3蛋白在其HMG框结构域具有高度的保守性。通过RT-PCR方法分析了Sox1基因在爪蟾早期不同发育时段的表达情况,结果显示Sox1基因从未受精卵到尾芽期均有表达,但表达强度有所差异。原位杂交结果显示,在早期卵裂阶段和囊胚期,Sox1基因主要在动物极表达;从神经板期开始,Sox1基因主要在中枢神经系统和眼原基中表达。在蝌蚪期,Sox1与Sox2、Sox3在脑部和眼睛的表达区域有所不同。对于爪蟾Sox1基因时空表达图式的研究将有助于阐明SoxB1基因家族在脊椎动物神经系统发生过程中的作用。
- 马莉赵树华孔清华毛炳宇
- 关键词：非洲爪蟾表达图式
- Sox2基因3'非翻译区保守元件对基因表达的调控作用被引量：4
- 2009年
- 转录因子Sox2是脊椎动物早期发育中最早表达的神经系统特异性基因之一,同时在干细胞的维持中也起着关键作用。通过生物信息学分析,作者发现在脊椎动物Sox2mRNA3'非翻译区中存在4段非常保守的富含AU的区域。将这些片段按照不同的组合克隆到GFP和荧光素酶两种报告基因载体中,在非洲爪蟾胚胎和培养细胞中检测了这些片段对报告基因表达的影响。结果显示,Sox2的3'UTR可影响报告基因的表达水平,特别是其中的保守片段2可显著提高报告基因的表达水平,表明Sox23'非翻译区有可能参与Sox2表达的转录后调控。
- 马莉孔清华赵树华魏云虎毛炳宇
- 关键词：SOX2转录后调控非洲爪蟾
- 利用修饰的随机引物构建非洲爪蟾酵母双杂交定向cDNA文库被引量：2
- 2008年
- 描述了一种新的构建cDNA文库的方法,其中用来合成cDNA第一链的随机引物5′-端被加上碱基d(AC),在cDNA双链合成后所添加的连接头的末端含有碱基d(GTCG)。在cDNA双链3′-端,连接头连接上后会形成一个完整的SalI酶切位点d(GTCGAC),而在5′-端几乎不会形成SalI位点。在SalI酶切后利用形成的3′-粘性末端与5′-EcoRI粘性末端一起将cDNA双链定向导入线性化的质粒载体,再通过转化细菌获得cDNA文库。利用此方法构建了一个不同发育时期非洲爪蟾胚胎酵母双杂交cDNA文库。检测了文库中空载体的比例,插入片段大小和不同基因的表达水平几个指标,都符合预期,但是同时发现定位于mRNA的3′-端的插入片段比例比较低。这种倾向性符合文献报道,应该是实验系统的倾向性,不影响进一步的酵母双杂交实验。这些数据证明成功地构建了定向非洲爪蟾酵母双杂交cDNA文库。
- 武景阳李朝翠孔清华毛炳宇
- 关键词：非洲爪蟾酵母双杂交随机引物
