卫生部科技专项基金(WKJ2005-2-032)
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 相关作者:丁义涛施晓雷朱章华仇毓东谢婷更多>>
- 相关机构:南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人骨髓间充质干细胞体外扩增并诱导为肝细胞的试验研究被引量:3
- 2010年
- 目的寻找人骨髓间充质干细胞(hBMSC)扩增并向肝细胞方向诱导分化的培养体系,并验证该体系的诱导效率。方法健康成人志愿者骨髓,经密度梯度离心分离人骨髓单个核细胞(hBMMNC),采用含表皮生长因子(EGF)和血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)的培养液进行扩增培养至1010数量级后,以含肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维样细胞生长因子4(FGF-4)、制瘤素(OSM)质量浓度各20ng/mL的培养液进行诱导培养,以RT-PCR、酶联免疫吸附分析(ELISA)、流式细胞分析、生物化学检测等方法检测其白蛋白、CK18、甲胎蛋白、尿素等的合成能力及氨代谢能力。结果培养液扩增hBMSC至1010数量级平均需(22.1±2.2)d,扩增后细胞表型特征仍符合hBMSC特征。扩增后的细胞经上述诱导体系诱导后,6d出现甲胎蛋白的合成,9~12d出现白蛋白的合成,18d达到高峰;对氨的代谢和尿素的合成功能在9~12d出现并持续存在。结论以含EGF和PDGF-BB的培养液扩增hBMSC快速,并能很好地保持干细胞的表型特征和诱导潜能。以含HGF、FGF-4、OSM质量浓度各20ng/mL的诱导培养体系,能成功地诱导经扩增后的hBMSC向肝细胞方向转化。
- 朱章华仇毓东施晓雷谢婷丁义涛
- 关键词:生物人工肝干细胞体外诱导肝细胞