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SCGB3A2基因启动子区单核苷酸多态性功能与Graves病易感性研究被引量：1: 2013年; 目的探讨SCGB3A2基因（secretoglobin family 3A member 2, SCGB3A2）启动子区单核苷酸多态性（single-nucleotide polymorphisms, SNPs）功能与Graves病（GD）易感性。方法应用荧光素酶检测、实时定量逆转录-聚合酶链反应、等位基因特异性定量转录等方法，对SCGB3A2基因启动子区（SNPs in promoter,pSNPs；SNP76、SNP75以及SNP74）进行体内外功能分析。结果 SCGB3A2基因启动子-荧光素酶报告质粒pGL3-（SNP76＋SNP75）、pGL3-（SNP76＋SNP74）以及pGL3-（SNP76＋SNP75＋SNP74）的荧光素酶活性均减弱。T等位基因能够竞争结合AG等位基因，比非易感等位基因AG有更强的结合转录因子能力。携带有SNP76＋SNP75和SNP76＋SNP74者SCGB3A2基因的表达低于不携带该变异者。体内外功能分析显示，SNP76＋SNP75和SNP76＋SNP74单倍型可使SCGB3A2基因表达下调。结论 SCGB3A2基因pSNPs（SNP76、SNP75以及SNP74）的功能与GD易感性相关。; 梁军王玉赵双霞施静艺彭永德高冠起潘春明袁国跃韩兵苏青高聆陈名道赵家军宋怀东; 关键词：格雷夫斯病

重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体被引量：1: 2007年; 背景与目的:构建UGRP1基因启动子的定点突变表达载体。材料与方法:以插入UGRP1基因正常启动子的质粒pGL3-UGRP1(-112G)为模板,用重叠延伸PCR定点诱变技术,对-112位点的碱基进行定点突变,并构建定点突变表达载体。结果:DNA测序表明,UGRP1基因启动子-112处的碱基已由G突变为A,成功实现定点诱变。结论:重叠延伸PCR定点诱变技术高效、简便。pGL3-UGRP(-112A)的成功构建,为进一步研究-112G/A多态性对该基因转录活性的影响奠定了基础。; 程烽盛燕施静艺陈漪徐潮刘智梁军潘春明朱忠勇宋怀东; 关键词：启动子重叠延伸PCR 定点诱变

Graves病相关的易感基因研究进展被引量：1: 2007年; Graves（graves’disease，GD）病是一种器官特异性自身免疫病，是一种由多个基因与环境因素参与的多基因病。尽管进行了大量的研究，GD的遗传学机制至今尚未阐明。与GD发病相关的候选基因主要分成两大类：①与机体免疫调节有关的基因：②与甲状腺生理机能调节有关的基因。现就GD易感性研究最多的基因点LM、CTLA-4、TSH-R及一些细胞因子作一简要综述。; 程烽宋怀东; 关键词：GRAVES病易感基因单核苷酸多态性易感性

SCGB3A2基因启动子区SNPs与Graves病相关性研究被引量：1: 2012年; 目的探讨SCGB3A2基因启动子区单核苷酸多态性（SNPs）与Graves病（GD）的相关性。方法对与甲亢发生紧密连锁的微卫星标志D5s2090周围3．0Mb区域内（上游及下游3．0Mb范围内）的179个SNPs进行病例对照分析，筛选出相关基因。结果对与甲亢发生紧密连锁的微卫星标志D5s2090周围3．OMb区域内的179个SNPs筛查。发现SNPrsl368408在病例组与对照组间的差异有统计学意义（P=3．69×10^-5），进一步通过精细定位，对该SNP位点附近的大量SNP进行关联分析，发现SCGB3A2基因启动子区的SNP76（P=4．11×10^-8）和SNP75（P=1．37×10^-8）与甲亢发生密切相关，回归分析发现这两个SNP位点可能是该区段的甲亢致病易感位点。结论提示SCGB3A2为GD相关基因。; 梁军王玉赵双霞施静艺彭永德高冠起潘春明袁国跃韩兵苏青高聆陈名道赵家军宋怀东; 关键词：格雷夫斯病启动子单核苷酸

甲状腺转录因子-1融合表达载体的构建及体外活性鉴定: 2007年; 目的:构建人甲状腺转录因子-1(TTF1)编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并观察其蛋白质体外转录翻译情况。方法:据已知的TTF1基因序列,应用巢式PCR技术,从人肺腺癌细胞株SPC-A1中扩增出TTF1基因,通过TA连接将其克隆入pGEM-T-easy载体,经测序鉴定后,双酶切插入真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)C中;重组质粒经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定后,进行蛋白质体外翻译观察TTF1体外表达情况,用电泳迁移率变动分析(EMSA)验证获得的体外翻译蛋白TTF1是否具有与下游靶基因UGRP1启动子结合的能力。结果:成功构建了含TTF1编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并能在体外表达TTF1蛋白。结论:能方便地获得TTF1体外翻译蛋白,为进一步研究TTF1蛋白与相应的DNA反应元件及其他转录因子的相互作用奠定了基础。; 程烽盛燕潘春明陈漪施静艺刘智白雪涛宋怀东; 关键词：甲状腺转录因子-1 真核表达

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国家自然科学基金(30530370)