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活的非可培养状态痢疾志贺菌感染细胞能力的研究被引量：3: 2011年; 目的研究处于活的非可培养(viable but nonculturable,VBNC)状态的痢疾志贺菌黏附Vero细胞和感染HT-29细胞的能力,探讨其潜在致病性。方法用低温寡营养诱导的处于VBNC状态的痢疾志贺菌血清型1型感染Vero细胞以研究其细胞毒性,感染HT-29细胞以研究其黏附性。结果处于VBNC状态的痢疾志贺菌血清型1型能使贴壁生长的Vero细胞丧失贴壁能力,能够黏附HT-29细胞。结论处于VBNC状态的痢疾志贺菌血清型1型具有细胞毒作用;具有黏附细胞的能力,具有潜在的致病能力。; 孙宗科郑萍张伟鲁波白雪涛陈西平; 关键词：痢疾志贺菌感染细胞

活性非可培养状态痢疾志贺菌蛋白分析研究被引量：1: 2011年; 目的研究处于活性非可培养状态(VBNC状态)的痢疾志贺菌血清1型蛋白表达情况。方法将低温寡营养诱导处于VBNC状态与处于对数生长期的痢疾志贺菌血清型1型全蛋白提取,用2D电泳将蛋白质分开,TOF/TOF二级质谱鉴定差异蛋白。结果共获得14个差异点,11个为酶,3个为具有酶活性的蛋白,这些蛋白质可调节细菌的能量代谢和物质合成。处于VBNC状态的痢疾志贺菌保持较高水平的代谢活性,有氧氧化和底物水平磷酸化水平较高,但是细菌蛋白表达能力下降,分裂能力下降。结论从蛋白水平证实了处于VBNC状态的痢疾志贺菌有活性,并解释了难于在常规培养基上形成菌落的原因。; 孙宗科高飞张伟鲁波郑萍白雪涛陈西平; 关键词：痢疾志贺菌蛋白表达

水中活的非可培养状态痢疾志贺菌荧光定量PCR检测方法研究被引量：8: 2012年; 目的建立活的非可培养（viable but noncuhurable state，VBNC）状态痢疾志贺菌逆转录荧光定量PCR（reverse transcription quantitative PCR，RT—qPCR）检测方法。方法低温寡营养诱导痢疾志贺菌进入VBNC状态，用平板计数法和荧光显微镜检法确定细菌的可培养数和活菌数，以痢疾志贺菌的志贺毒素基因stx（GenBank：M19437）、侵袭性毒力基因ipaH（GenBank：NC_007607）为目的基因设计引物，提取RNA进行RT—qPCR检测，研究检出限并建立标准曲线，用加标于环境水体中的志贺菌水样进行方法验证。结果建立处于VBNC状态的痢疾志贺菌RT—qPCR检测技术，检测时间少于6h，复杂环境水体中每500恤l水样可培养的痢疾志贺菌检出限为1—5cfu，VBNC状态的痢疾志贺菌3～25cfu。结论该方法检测快速，可实现对VBNC状态志贺菌的检测，可用于复杂水样的直接检测，适用于水体污染调查和应急反应时快速筛查志贺菌。; 孙宗科张伟鲁波郑萍王友斌丁培陈西平; 关键词：痢疾志贺菌

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中国疾病预防控制中心青年科研基金(2010A203)