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国家自然科学基金(81071883)

作品数：12 被引量：39H指数：4
相关作者：张继民王绮雯刘剑叶钿均高庆更多>>
相关机构：广州医学院第二附属医院广州医科大学中山大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 12篇医药卫生

主题

  • 12篇肠癌
  • 9篇胸苷
  • 9篇胸苷磷酸化酶
  • 9篇细胞
  • 9篇磷酸
  • 9篇磷酸化
  • 9篇磷酸化酶
  • 8篇结肠
  • 8篇结肠癌
  • 6篇直肠
  • 6篇结直肠
  • 5篇直肠癌
  • 5篇肿瘤
  • 5篇结直肠癌
  • 4篇直肠肿瘤
  • 4篇尿嘧啶
  • 4篇转染
  • 4篇嘧啶
  • 4篇细胞株
  • 4篇结肠癌细胞

机构

  • 6篇广州医学院第...
  • 6篇广州医科大学
  • 1篇中山大学

作者

  • 12篇张继民
  • 9篇王绮雯
  • 5篇叶钿均
  • 5篇刘剑
  • 4篇高庆
  • 2篇邹湘才
  • 2篇刘影
  • 2篇刘奇
  • 2篇方耿
  • 1篇但操
  • 1篇方瑞
  • 1篇董栋
  • 1篇杜军
  • 1篇游伟
  • 1篇崔博
  • 1篇谢志红
  • 1篇李爱群

传媒

  • 2篇中华胃肠外科...
  • 2篇实用医学杂志
  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇中华外科杂志
  • 1篇广东医学
  • 1篇中国肿瘤临床
  • 1篇中华普通外科...
  • 1篇国际外科学杂...
  • 1篇中华肿瘤防治...

年份

  • 1篇2018
  • 1篇2017
  • 3篇2015
  • 4篇2013
  • 3篇2012
共 12 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
维生素E琥珀酸酯联合5-氟尿嘧啶和5′-脱氧氟脲苷促进人结肠癌细胞凋亡被引量：5
2018年
目的探讨维生素E琥珀酸酯(VES)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和5′-脱氧氟脲苷(5′-DFUR)对人结肠癌细胞株LS174T凋亡的影响。方法 LS174T细胞常规培养,分6组(0,20μmol/L VES,1μmol/L 5-FU,2μmol/L 5′-DFUR,20μmol/L VES+1μmol/L 5-FU,20μmol/L VES+2μmol/L 5′-DFUR),处理24 h,倒置显微镜观察细胞形态,MTS法检测细胞的增殖情况;Western blot法检测细胞bid、bax、bcl-2蛋白的表达情况;流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。结果 VES分别与5-FU、5′-DFUR联合能够抑制人结肠癌细胞的增殖,增强bid、bax蛋白的表达,降低bcl-2蛋白的表达,促进细胞发生凋亡。结论 VES分别与5-FU、5′-DFUR联合作用时能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,其中VES+5′-DFUR联合作用效果最为显著。这可能与细胞中促凋亡蛋白bid、bax表达的增加、抗凋亡蛋白bcl-2表达的降低有关。
王绮雯张继民李爱群邹湘才
关键词：维生素E琥珀酸酯5-氟尿嘧啶凋亡
结直肠癌组织中成纤维细胞激活蛋白的表达及临床意义被引量：3
2012年
目的探讨成纤维细胞激活蛋白（FAP）在结直肠癌组织中的表达及其与各病理学指标之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测55例结直肠癌组织和50例正常结直肠组织中FAP的表达，观察阳性细胞在不同组织中的分布数量，结合肿瘤分期、有无淋巴结转移及不同浸润深度等病理学指标，评价FAP表达与结直肠癌病理特征的相关性。结果正常结直肠组织中几乎无FAP表达，少数癌细胞有微弱表达。FAP阳性细胞主要为结直肠癌间质组织中的肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）。TNMⅢ～Ⅳ期标本中FAP阳性细胞为（40．1±15．9）个，多于Ⅰ-Ⅱ期的（18．3±7．7）个（P〈0.01）；且阳性细胞数量与分期程度相关（r=0．544，P〈0．01）。淋巴结转移组中阳性细胞为（44．4±13．3）个，多于无淋巴结转移的（18．5±8．1）个（P〈0．01）；且阳性细胞数量与有无淋巴结转移相关（r=0．793，P〈0．01）。不同浸润深度T2、T1和T4组标本中FAP阳性细胞数分别为（25．2±8．9）、（32．4±19．3）和（29．2±16．5）个（P〉0．05）；阳性细胞数量与浸润深度无关（r=0．003，P〉0．05）。结论FAP在正常结直肠组织中无表达．而主要表达于结直肠癌组织中的CAFs中。FAP阳性细胞与结直肠癌的TNM分期及淋巴结转移相关。
崔博王绮雯方瑞杜军张继民
关键词：结直肠肿瘤成纤维细胞激活蛋白肿瘤相关成纤维细胞
转染胸苷磷酸化酶基因对5＇-脱氧氟脲苷抗结肠癌细胞株活性的影响被引量：4
2013年
目的 探讨人结肠癌细胞系SW480和LOVO细胞株转染胸苷磷酸化酶（TP）基因后转化5′-脱氧氟脲苷（5′-DFUR）为氟尿嘧啶（5-FU）能力的变化及5′-DFUR抗癌细胞株活性的变化.方法 构建包含TP cDNA的真核表达载体,用慢病毒包装后转染结肠癌细胞株SW480和LOVO.转染5代后以免疫荧光法和流式细胞技术检测转染效率;RT-PCR和Western blot法分别检测2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达.然后以高效液相色谱法（HPLC）检测2株细胞转染前后转化5′-DFUR为5-FU的量;MTT法检测5′-DFUR对2株细胞转染前后半数抑制浓度（IC50）.结果 转染TP基因后SW480-TP与LOVO-TP 5代细胞转染效率稳定在95％左右.2株转染细胞的TP mRNA表达分别比野生型细胞增加（695±172）倍（t=-7.00,P=0.002）和（282±87）倍（t=-5.61,P=0.030）,Western blot显示TP蛋白表达也明显增强.转染后的SW480-TP与LOVO-TP在培养基中分别使5′-DFUR转化为5-FU的量增加（t=19.406 ～66.921,P＜0.01）.5′-DFUR对SW480的IC50由（1641±53） μmol/L降至（587±17） μmol/L（t=-32.59,P＜0.01）;对LOVO的IC50由（1607±57） μmol/L降至（1088±89） μmol/L（t=-8.52,P＜0.01）.结论 慢病毒载体能够高效地将TP cDNA转染至人结肠癌细胞SW480和LOVO并稳定传代,转染后2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达明显增高,使5′-DFUR转化为5-FU的量增加,对结肠癌细胞株SW480和LOVO的抑制作用增强.
刘剑张继民高庆王绮雯叶钿均刘影
关键词：结肠肿瘤胸苷磷酸化酶氟尿嘧啶
5’-脱氧氟尿苷联合干扰素对转染TP基因结肠癌细胞株裸鼠实验模型的影响被引量：1
2017年
背景与目的:人结直肠癌细胞基本无胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)表达。本实验主要探讨人结肠癌细胞株LS174T转染TP基因后,在裸鼠肿瘤组织中对抗癌药物5’-脱氧氟尿苷(5’-deoxy-5-fluorouridine,5’-DFUR)、氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和干扰素-α2a(interferon-α2a,INF-α2a)干预效果的影响。方法:以慢病毒为载体转染TP基因至结肠癌细胞株LS174T,得到稳定传代的高TP表达株。将96只BALB/c裸鼠分成2组,分别应用野生型及转染TP基因后的LS174T细胞株接种裸鼠背部皮下,制成结肠癌TP低、高表达模型。每组再随机分为6组,分别应用0.9%Na Cl溶液、INF-α2a、5-FU、5-FU+INF-α2a、5’-DFUR和5’-DFUR+INF-α2a干预5 d,2周后处死裸鼠,分离肿瘤称重后,分别应用鼠抗人CD34、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和抗PD-ECGF单克隆抗体进行免疫组织化学染色。判定是否有TP表达及对微血管进行计数。结果:在野生型LS174T裸鼠荷瘤模型中,使用抗肿瘤药物的3~6组肿瘤质量与对照组相比均明显降低,抑癌率分别为48%、27%、48%和57%,差异有统计学意义(P<0.05)。其中5’-DFUR组(48%)与5’-DFUR+INF-α2a组(57%)、5-FU+INF-α2a组与5’-DFUR+INF-α2a组(27%与57%)相比,抑癌率差异有统计学意义(P<0.05)。在LS174T-TP细胞株裸鼠模型中,5’-DFUR组和5’-DFUR+INF-α2a组抑癌率分别为27%和48%,而使用5-FU的两组未显示出良好的抗肿瘤效果(7%和3%)。免疫组织化学染色显示,野生型LS174T接种形成的肿瘤组织中TP表达阴性,微血管数目较少,而转染TP基因后,肿瘤组织中TP表达明显上升,微血管密度明显增多(P<0.05)。结论:结肠癌细胞株LS174T转染TP基因后,在裸鼠实验肿瘤模型中,TP表达明显增加,使细胞内激活抗癌药物5’-DFUR的抗癌作用明显增强,联合应用INF-α2a能进一步增强这种抗癌作用。而转染TP基因或联合应用INF-α2a对常规抗癌药物5-FU的抗癌效
方耿王绮雯张继民
关键词：胸苷磷酸化酶干扰素-Α2A
基于基因转染法的胸苷磷酸化酶高表达结肠癌细胞株的建立被引量：3
2015年
目的构建表达高度胸苷磷酸化酶(TP)活性并可以稳定传代的结肠癌细胞株。方法合成包含TP c DNA全长的真核细胞表达载体,用慢病毒包装后转染人结肠癌细胞株SW480、LOVO、HT29和LS174T,流式细胞仪检测转染效率,实时荧光定量RT-PCR方法检测TP的m RNA表达,蛋白印迹法(Western blot)检测TP蛋白表达。结果转染TP c DNA后,SW480、LOVO、HT29与LS174T在传代5代后转染效率仍稳定在95%左右。与未转染TP基因的亲代细胞相比,SW480-TP、LOVO-TP、HT29-TP与LS174T-TP的TP m RNA的表达分别提高了(694.56±171.53)、(282.46±86.85)、(8.45±0.15)和(2 615.02±253.97)倍,差异有统计学意义(P<0.05);并且TP蛋白的表达水平也显著提高。结论慢病毒载体能够高效地将TP c DNA转染至人结肠癌细胞SW480、LOVO、HT29和LS174T中,所得克隆能够稳定传代,并能显著提高4株结肠癌细胞TP的m RNA和蛋白表达水平。
王绮雯刘剑叶钿均张继民
关键词：胸苷磷酸化酶基因转染慢病毒结肠癌细胞株
慢病毒转染胸苷磷酸化酶基因增强5’-脱氧氟尿苷抗结肠癌细胞活性被引量：6
2015年
目的探讨5’-脱氧氟尿苷（5’-DFUR）和氟尿嘧啶（5-Fu）对人结肠癌细胞株HT29和LS174T转染胸苷磷酸化酶（TP）基因前后抗癌效应的变化。方法构建包含TP基因的慢病毒载体，转染结肠癌细胞株HT29和HLS174T。传代5代后，以流式细胞术检测转染效率。免疫组织化学染色和Westernblot检测转染TP基因前后HT29和LS174T细胞中TP蛋白的表达，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测细胞中TPmRNA的表达水平，四唑氮化合物法检测5’-DFUR和5-Fu对转染TP基因前后细胞株的半数抑制浓度（IC50），高效液相色谱（HPLC）法检测HT29和LS174T在细胞转染rrP基因前后转化5’-DFUR为5-Fu的水平。结果转染TP基因的HT29和LS174T细胞传代5代后，转染效率稳定在约95．0％。转染TP基因的HT29和LS174T细胞中TP表达阳性，而野生型细胞和仅转染病毒载体细胞中TP表达阴性；Westernblot结果显示，HT29和HLS174T细胞中’rP蛋白的表达明显增强。RT-PCR结果显示，转染TP基因的HT29和LS174T细胞中TPmRNA的相对表达水平分别为8．45±0．15和2615．02±253．97，与野生型细胞比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。5’-DFUR对转染TP基因的HT29-TP细胞和野生型细胞的IC50分别为（14．33±0．74）μmol／L和（707．66±5．66）μmol／L（P〈0．05）；对转染TP基因的LS174T—TP细胞和野生型细胞的IC50分别为（0．59±0．11）μmol／L和（239．20±21．83）μmol／L（P〈0．05）。5-Fu对转染TP基因的HT29-TP细胞和野生型细胞的Ic50分别为（5．42±0．75）μmol／L和（14．19±0．97）μmol／L（P〈0．05）；对转染TP基因的LS174T—TP细胞和野生型细胞的Ic。分别为（4．41±0．96）μmol／L和（16．42±2．12）μmol／L（P〈0．05）。转染TP基因后的HT29和HLS174T细胞培养基中，则检出大量转化的5-Fu，较转染前分别增加了12．2～23．6倍，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。�
叶钿均王绮雯张继民刘奇
关键词：胸苷磷酸化酶转染
转染胸苷磷酸化酶基因联合干扰素α2a增强5＆#39;-脱氧氟尿苷对结肠癌细胞株的细胞毒作用被引量：2
2015年
目的 利用慢病毒载体将胸苷磷酸化酶（TP）基因转染人结肠癌细胞株LOVO,然后应用干扰素-α2a（INF-α2a）处理转染前后细胞,分别测定5＇-脱氧氟尿苷（5＇-DFUR）和5-氟尿嘧啶（5-FU）对LOVO抗肿瘤效应的影响.方法 构建包含TP基因的慢病毒载体,转染结肠癌细胞株LOVO,以流式细胞技术和免疫荧光法检测在第5代LOVO中的转染效率;加INF-α2a培养24h后分别应用RT-PCR和Wester blot检测细胞的TP mRNA和TP蛋白表达;MTS法检测5＇-DFUR和5-FU对各组细胞的半数抑制浓度（IC50）;高效液相色谱法检测各组细胞转化5＇-DFUR为5-FU的量.结果 转染TP基因的效率达95％.LOVO＋INF-α2a组的TP mRNA表达是LOVO组的1.87倍,而LOVO-TP组和LOVO-TP＋ INF-α2a组TPmRNA表达则比LOVO组分别增加了18.56倍和59.61倍（P＜0.01）.LOVO-TP＋ INF-α2a组和LOVO-TP组蛋白表达水平比LOVO组分别增加242.23倍和197.69倍（P＜0.01）.5＇-DFUR对LOVO-TP组细胞的IC50值仅为LOVO组细胞的37.2％,而LOVO-TP＋INF-α2a组的IC50则是LOVO组的18.2％.LOVO-TP组在加入100、200、400 μmol/L5＇-DFUR的培养基中检测的5-FU浓度比LOVO组分别增高了26.13％、33.23％、32.95％,而LOVO-TP＋ INF-α2a组比LOVO组分别增高了49.94％、61.66％、72.14％. 结论 转染TP eDNA能够明显提高LOVO细胞的TP mRNA及TP蛋白的表达水平,而INF-α2a则进一步增强这种上调作用.增高的TP表达使细胞外5＇-DFUR转化为5-FU含量增加,明显提高5＇-DFUR的细胞毒性.
刘奇王绮雯张继民方耿
关键词：胸苷磷酸化酶氟尿苷
结直肠癌合并原发性高血压病理学相关性分析被引量：7
2013年
目的:分析合并原发性高血压的结直肠癌患者与普通结直肠癌患者在临床分期、组织类型、淋巴结及远处转移、病理分化程度方面的相关性。方法:总结182例手术治疗的结直肠癌患者临床资料,对合并高血压的结直肠癌患者与正常血压结直肠癌患者临床分期、组织类型、淋巴结转移及远处转移、住院时间、术后并发症等资料进行统计学分析。结果:182例结直肠癌患者中同时合并高血压63例(34.6%),平均年龄74.9岁;正常血压患者119例(65.4%),平均年龄65.8岁;高血压组年龄高于正常血压组(P<0.01)。高血压组患者中Ⅰ～Ⅲ期44例,Ⅳ期19例(30.2%)正常血压组患者中Ⅰ～Ⅲ期102例,Ⅳ期17例(14.3%),高血压组Ⅳ期患者多于正常血压组(P<0.05),并且高血压与临床分期相关(r=0.236,P=0.029)。2组患者组织类型分布无统计学差异(P>0.05),但浸润深度差异具有统计学意义(P<0.05)。高血压组患者中有淋巴结或远处转移共36例(57.1%),而血压正常患者发生转移49例(41.2%),差异具有统计学意义(P<0.05)。高血压的结直肠癌患者与正常血压患者相比合并糖尿病、主动脉硬化病例多,手术并发症多、住院时间长(P<0.01)。结论:原发性高血压与结直肠癌患者临床分期相关,合并高血压结直肠癌患者更多发生淋巴结或远处转移,容易合并糖尿病、主动脉硬化等疾病。手术后并发症多,住院时间长。
高庆张继民刘剑
关键词：结直肠肿瘤高血压病理学淋巴结转移
胸苷磷酸化酶表达与结直肠癌关系研究进展被引量：4
2013年
胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)是嘧啶核苷合成与分解过程中的一个关键酶。目前认为TP与血小板源性内皮细胞生长因子(platelet-derived endothelial cell growth factor,PD-ECGF)具有同源性,其诱导血管形成和抗凋亡的作用与结直肠癌的生长、转移密切相关。同时TP也是使5'-脱氧氟尿苷(5'-deoxy-5-fluorouridine,5'-DFUR)等(5-fluorouracil,5-FU)前体药物转化为5-FU的关键酶,其活性与结直肠癌细胞对氟尿嘧啶类药物的敏感性及靶向治疗密切相关。因TP在肿瘤的生长、转移、治疗和预后方面均有重要作用,阐明其表达机制具有重要意义。本文将对近年TP在结直肠癌中的表达与肿瘤血管新生及与激活5'-DFUR发挥细胞毒作用、治疗结直肠癌的研究进展进行综述。
叶钿均张继民
关键词：胸苷磷酸化酶结直肠癌血管新生
结直肠癌组织胸苷磷酸化酶表达临床意义研究的现状被引量：11
2012年
目的:总结近年来关于胸苷磷酸化酶(TP)在结直肠癌组织中表达临床意义的研究现状。方法:应用PubMed、Elsevier Sciencedirect、CNKI及万方全文数据库检索系统,以胸苷磷酸化酶和结直肠癌为关键词,检索2005-01-2011-06发表的相关文献。纳入标准:1)TP在结直肠癌及转移组织中的表达及其促血管新生、抗细胞凋亡等生物学作用。2)TP与5-氟尿嘧啶(5-FU)前体类药物靶向治疗的关系。根据纳入标准分析文献29篇。结果:TP对于结直肠癌的影响是双重性的,其在肿瘤血管新生、转移、复发以及抗细胞凋亡等过程中均发挥重要作用,高表达TP的患者往往预后不良。另外,TP又在5-FU前体药物的化疗过程中起着关键作用,增加TP的表达很可能可以增强5-FU前体药物的化疗效果。结论:TP在结直肠癌组织中的表达对结直肠癌靶向治疗和预后有着非常重要的临床意义。
高庆刘剑张继民
关键词：胸苷磷酸化酶结直肠肿瘤巨噬细胞新生血管化病理性
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