广东省自然科学基金(7001586)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 相关作者：许吕宏翁文骏方建培吴燕峰徐宏贵更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院中山大学附属第二医院河南科技大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 致敏血清干扰小鼠骨髓移植的作用研究
- 2009年
- 目的:研究致敏血清在小鼠骨髓移植中的作用,明确抗体介导的移植排斥作用。方法:在移植前1天将200μl致敏血清或非致敏血清注射到正常BALB/c小鼠中,移植受者经致死量照射后回输1×107 C57BL/6小鼠的骨髓细胞。应用补体依赖淋巴细胞毒性方法检测移植前受者的供者反应性抗体,并观察移植后受者的生存情况及植入分析。结果:致敏血清输注可促使供者反应性抗体存在于受者体内。骨髓移植后,接受致敏血清输注的受者80%于10天左右均死于骨髓衰竭,而接受非致敏血清输注的受者能长期存活。植入分析表明接受致敏血清输注的受者在移植后其血象及骨髓细胞随时间推移进行性下降,且供者细胞的嵌合百分比也进行性减少;与接受非致敏血清输注组相比,两组的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:致敏血清能介导小鼠的骨髓移植排斥,其中供者反应性抗体介导的体液免疫发挥重要作用。
- 许吕宏方建培翁文骏吴燕峰
- 关键词：骨髓移植
- 抗CD20单抗在致敏受者造血干细胞移植中应用的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的:寻找促进异基因造血干细胞在致敏受者植入的策略研究,探讨抗CD20单抗在致敏受者造血干细胞移植的作用。方法:分别于移植前第14d及第7d予BALB/c小鼠输注C57BL/6小鼠的脾细胞建立致敏模型。实验组于移植前第11d经尾静脉输注抗CD20单抗(美罗华)2mg/mouse,对照组于移植前第11d予输注RPMI-1640培养液0.2mL/mouse。于第0d(移植当天)取部分小鼠分离得血清及脾细胞,并检测供者反应性抗体及CD19+B细胞;部分小鼠予[^(60)Co]致死量照射,4h后予1×107C57BL/6小鼠骨髓细胞进行移植,观察生存情况及血常规恢复情况。结果:实验组与对照组血清细胞毒性指数分别为(37.00±3.46)%和(51.80±3.49)%,差异显著(P<0.01);2组的脾细胞CD19+B细胞百分比分别为(17.32±3.02)%和(34.26±2.87)%,差异显著(P<0.01)。照射移植后2组受者均于14d左右全部死亡,生存中位数分别为第13d及第11d,Log-rank检验2组间的差别无显著(P>0.05)。濒死动物血常规结果示三系减少,提示受者死于造血衰竭。结论:抗CD20单抗能杀伤受者B细胞,降低致敏程度,但实验中该单抗并不能有效促进异基因造血干细胞在致敏受者的植入。
- 许吕宏方建培Le Yi洪冬玲翁文骏魏菁
- 关键词：致敏受者抗CD20单抗造血干细胞移植
- 脾细胞输注致敏对异基因骨髓细胞损伤的机制被引量：1
- 2010年
- 【目的】探讨脾细胞输注致敏对异基因供者骨髓细胞损伤的作用机制。【方法】应用异基因脾细胞输注的BALB/c小鼠作为致敏模型,未致敏(正常)BALB/c小鼠作为对照,异基因供者骨髓细胞来源于C57BL/6小鼠。通过补体依赖细胞毒性反应(CDC)、细胞毒性免疫细胞杀伤作用、抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)、粒-单核细胞集落培养(CFU-GM)等实验研究致敏血清及致敏免疫细胞对异基因骨髓细胞的影响。【结果】与补体孵育30min或1hr后,致敏血清组死亡细胞百分比明显高于正常血清组,其差异有统计学意义(P<0.001);细胞毒性免疫细胞杀伤作用及ADCC实验中致敏组的细胞毒性指数均高于正常组,其差异亦有统计学意义(P<0.05);致敏血清与骨髓细胞孵育组的CFU-GM数量比单纯骨髓细胞组有所减少,但两者差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】致敏受者通过体液免疫及细胞免疫途径损伤异基因骨髓细胞。
- 许吕宏方建培翁文骏洪冬玲
- 关键词：脾细胞骨髓细胞
- 群体反应性抗体干扰脐血CD34＋细胞增殖、分化的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨血清特异性群体反应性抗体（PRA）对脐血CD34＋细胞增殖、分化能力的影响。方法取含PRA（经实验证实）的B地中海贫血患儿血清，与脐血CD34＋细胞、补体孵育，观察PRA对CD34＋细胞增殖、分化的影响，分A组（不加血清组）、B组（PRA血清组）、C组（PRA血清加补体组）、D组（补体组）、E组（PRA阴性血清组）共5组。孵育后以3H—TaR掺入法测定细胞DNA合成及流式细胞仪检测AnnexinV和CD95表达；并进行集落培养，于第10天计数集落。结果A组为（20．71±2．81）U／L，低于B组（64．28±5．12）U／L、C组（84．29±4．99）U／L，B组低于c组；D、E组均为（22．86±2．91）U／L和（22．86±2．91）U／L，均低于B、c组；各组氚每分钟8射线释放量（epm）：A组为（22629±3288），高于B组（4598±2178）和C组（1626±1192），A组和D、E组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）；A组的总集落数、粒-巨噬细胞集落形成单位（CFU—GM）、混合系集落形成单位（CFU-GEMM）及爆式红系集落形成单位（BFU—E）数均高于B、c组，B组的总集落数、CFU—GM及CFU—GEMM数均高于C组；D组和E组的各种集落数与A组的差异无统计学意义（P〉0．05）；各组CD34＋细胞AnnexinV及CD95表达百分率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论特异性PRA血清对脐血CD34＋细胞的增殖和分化有抑制作用，补体可增强上述作用；特异性PRA血清对脐血CD34＋细胞的凋亡无明显影响。
- 杨兴鸽方建培吴燕峰翁文骏徐宏贵许吕宏
- 关键词：脐血干细胞移植地中海贫血集落计数
- 致敏血清影响造血干细胞植入的实验研究
- 2008年
- 目的研究致敏血清对造血干细胞植入的影响及其作用机制。方法将致敏血清或正常血清与供鼠C57BL／6骨髓细胞在体外孵育，洗涤后回输到经照射后的BALB／c小鼠，观察移植后受体鼠的生存情况并进行植入情况分析。检测经孵育后骨髓细胞与羊抗鼠IgG二抗结合情况，并分析孵育后骨髓细胞Annexin V凋亡表达。结果骨髓移植后，接受经致敏血清孵育骨髓细胞的10只受鼠中7只于10d左右死于骨髓衰竭，而接受正常血清孵育骨髓细胞的受鼠能长期存活。植入分析表明，接受致敏血清孵育骨髓细胞的受鼠在移植后其血常规及骨髓细胞随时间推移进行性下降，且供鼠细胞的嵌合百分比也进行性减少。经致敏血清或正常血清孵育的骨髓细胞与羊抗鼠IgG二抗结合百分比分别为（90．3±5．1）％和（5．2±2．4）％，两组差异有显著统计学意义（P〈0．01）；但在凋亡检测中发现两组差异并无统计学意义（P〉0．05）。结论致敏血清能明显降低造血干细胞的植入能力，致敏血清中的抗体能与造血干细胞表面抗原结合，但不能诱导其凋亡。
- 许吕宏方建培徐宏贵翁文骏
- 关键词：造血干细胞植入
