国家科技支撑计划(2007BAD40B06)
- 作品数：19 被引量：81H指数：6
- 相关作者：罗建勋殷宏任巧云刘爱红李有全更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家自然科技资源平台项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 微小牛蜱Bm86基因的原核表达与表达条件的优化被引量：3
- 2009年
- 根据微小牛蜱Bm86基因序列设计引物,在重组质粒pMD18-T-Bm86中克隆,并将其定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)株,用不同浓度异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在不同时间进行诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测结果表明,37℃条件下经1mmol/LIPTG诱导8h后,目的重组蛋白表达量最大,表达相对分子质量(Mr)约为94000的包涵体蛋白,与预期大小一致,目的蛋白约占蛋白总量的29%。蛋白质印迹(Western blotting)分析表明,该重组蛋白可被兔抗微小牛蜱全蜱阳性血清所识别。
- 马米玲关贵全李有全刘爱红任巧云牛庆丽殷宏罗建勋
- 关键词：微小牛蜱
- 羊泰勒虫病血清学调查被引量：6
- 2009年
- 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对我国部分省(区)的羊泰勒虫病进行了血清学调查,以便了解近年来我国羊泰勒虫病的流行现状。2004-2005年间,在我国部分省(区)总共采集到1 170份绵羊和山羊血清,并用间接ELISA检测抗羊泰勒虫抗体。结果显示,在5省13个县中除甘肃景泰县无羊泰勒虫病,其他地方均有羊泰勒虫病,且甘肃临洮感染率最高为93.8%,表明羊泰勒虫病在我国北方羊群中流行仍相当严重。此外,从2001年4月至2002年3月,从野外采集青海血蜱感染3只绵羊,收集1年的血清,采用ELISA方法,对羊泰勒虫血清抗体水平动态进行了评定,结果表明,实验室人工感染的抗羊泰勒虫抗体水平在感染后40 d最高,按此结果推算,在野外蜱的出现时间是4月份,收集血清应在5月中旬。
- 马米玲罗建勋关贵全刘志杰李有全高金亮刘爱红刘军龙任巧云殷宏
- 关键词：血清学调查羊泰勒虫病ELISA
- 小亚璃眼蜱4D8基因的克隆与原核表达被引量：6
- 2008年
- 根据GenBank上登录的边缘革蜱4D8基因序列设计1对引物,采用PCR技术自半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺cDNA表达文库中扩增获得了4D8基因;将其连入pMD18-T载体,构建重组克隆载体pMD18-Hyaa4D8。测序分析表明,克隆的小亚璃眼蜱4D8基因与边缘革蜱4D8基因的核苷酸序列的同源性为89.2%。将此片段定向亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Hyaa4D8,表达并纯化重组蛋白,通过免疫印迹试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示,该重组蛋白是分子质量为45ku的融合蛋白,且表达产物能被半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺抗原免疫兔血清识别。
- 赵金国曾巧英殷宏刘爱红李有全罗建勋
- 关键词：克隆原核表达
- 微小牛蜱4D8基因原核表达及免疫原性分析
- 2009年
- 按GenBank已知微小牛蜱的4D8基因核苷酸序列设计1对表达引物。提取微小牛蜱幼蜱总RNA,反转录合成双链cDNA,用设计的表达引物扩增出4D8基因,扩增得到的核苷酸长486 bp,编码161个氨基酸,该蛋白预计分子质量为18 ku。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX4T-1,构建重组原核表达载体pGEX4T-1-4D8,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,可成功表达。重组融合蛋白分子质量为45 ku左右,与预期大小一致。Western blot显示,兔抗微小牛蜱唾液腺、肠道和卵巢抗体能够识别重组表达蛋白。
- 刘军龙关贵全李有全马米玲刘爱红任巧云殷宏罗建勋
- 关键词：微小牛蜱原核表达
- 蜱的生物防治
- ＜正＞蜱（Tick）是动物体表常见的一类外寄生虫,广泛分布于世界各地,并可作为许多疾病的传播媒介,给人类健康和动物生产带来极大的威胁。随着人们对药物残留和环境污染等问题的关注,加之某些蜱耐药性虫株的产生,人们越来越重视对...
- 任巧云殷宏罗建勋
- 文献传递
- 硬蜱生防真菌制剂的研究及应用被引量：3
- 2012年
- 昆虫病原真菌作为一种很有潜力的生物控制因子,已在农业害虫生物防治领域得到广泛的应用,而在兽医外寄生虫病防治的研究才刚刚起步。针对目前用于蜱化学药物防治的药效持久期短的技术难点,建立和改进蜱虫的防治体系,降低环境污染,减少或禁用化学农药势在必行,开发高效、稳定的生物农药已成为当务之急。作者等结合蜱生物防治的初步研究成果,特别是针对栖息土壤环境中的昆虫病原微生物对蜱的致病力筛选及其生防制剂进行探讨,以促进这一研究领域的可持续发展,这对于保护环境、维持生态平衡、发展无污染的绿色畜牧业产品以及对畜牧业的可持续发展具有极为重要的意义。
- 孙明王晓燕罗建勋
- 关键词：昆虫病原真菌生防制剂
- 蜱类防治研究进展被引量：8
- 2009年
- 从化学防治、遗传防治、免疫防治和生物防治等方面介绍了蜱的防治概况。
- 任巧云罗建勋殷宏
- 微小牛蜱Bm91基因的原核表达被引量：2
- 2010年
- 根据GenBank收录的微小牛蜱Bm91基因序列设计一对表达引物,以微小牛蜱幼蜱总RNA反转录合成的cDNA为模板,扩增获得了Bm91基因,其长度为1 908 bp,包含一个大小为1 833 bp的完整开放阅读框,编码611个氨基酸,该蛋白预期分子质量为83 ku。将Bm91基因片段亚克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组原核表达载体pET-30a-Bm91,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,发现在0.8 mmol/LIPTG,诱导时间2 h,温度37℃条件下,目的重组蛋白表达量最大,约占蛋白总量的20%。SDS-PAGE检测表明,表达产物为分子质量为83 ku的融合蛋白,与预期大小一致;Western blot分析表明,表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别。
- 马米玲刘军龙关贵全刘志杰郝雪峰王玙李有全刘爱红任巧云牛庆丽殷宏罗建勋
- 关键词：微小牛蜱原核表达
- 蜱的化学和免疫学防治研究进展被引量：16
- 2008年
- 蜱既是常见的吸血外寄生虫,又是人和动物许多重要疾病的传播媒介。大量的蜱叮咬宿主动物可导致宿主消瘦、贫血,同时也使动物皮革的质量降低。作为传播媒介,蜱由于可传播原虫、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、细菌和病毒等,在世界范围带来了很大的经济损失。有很多蜱的防治策略,但均存在不足之处,目前主要以化学和免疫学防治为主。利用化学防治较为普遍,但由于使用不当已造成了蜱的耐药性和环境污染。蜱的免疫学防治主要是开发抗蜱疫苗,接种商品化的抗蜱疫苗被证实是一种可行的防治策略,因此疫苗将在未来对蜱的防治中起举足轻重的作用。
- 郝雪峰殷宏罗建勋
- 关键词：化学防治免疫防治疫苗
- 八种杀蜱药物与球孢白僵菌分生孢子的生物相容性被引量：3
- 2009年
- 为探索绿色高效的杀蜱新制剂,采用营养液萌发法和平板生长法测定了8种杀蜱药物与球孢白僵菌分生孢子的生物相容性。结果显示,这8种药物与白僵菌的相容性和药物浓度呈负相关,次亚致死剂量的苦皮藤素、灭幼脲和溴氰菊酯与白僵菌的相容性良好,萌发率均在85%以上;用浸渍法测得白僵菌孢子浓度在1×107/mL时对蜱的致死率可达100%。结果表明,所试验的8种药物中,苦皮藤素、灭幼脲和溴氰菊酯可与白僵菌配伍使用;白僵菌的最佳使用浓度为1×107/mL。
- 任巧云关贵全李有全马米玲刘爱红刘军龙牛庆丽金玉荣王子坚罗建勋殷宏
- 关键词：球孢白僵菌生物相容性
