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国家科技支撑计划(2007BAD49B02-6)
作品数:
1
被引量:1
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相关作者:
郝文胜
贺秀芳
迟胜起
于嘉林
杨静华
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国家科技支撑计划
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张剑峰
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郝文胜
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2012
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二价核酶基因构建及对PLRV负链靶序列的体外切割研究
被引量:1
2012年
根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)中国分离株(PLRV-Ch)复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR;同时将包含核酶切割识别位点的PLRV-Ch复制酶基因cDNA近5'端的874 bp片段反向插入到pGEM-4Z中,构建了体外转录载体pGEM-4ZR5。以线性化的重组质粒pGEM-4ZDR和pGEM-4ZR5为模板,在T7 RNA聚合酶的作用下,分别转录获得核酶RNA和PLRV-Ch复制酶基因5'端负链RNA底物片段。将以上2种RNA转录物混合并经37℃保温后,检测结果表明,所得核酶RNA对PLRV-Ch复制酶基因负链RNA在体外具有较强的特异切割活性。
张剑峰
张鹤龄
于嘉林
迟胜起
贺秀芳
郝文胜
杨静华
关键词:
马铃薯卷叶病毒
复制酶基因
体外切割
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