解放军总医院科技创新苗圃基金(07MP36)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：陈凤玲胡仁明刘瑜王宣春李春霖更多>>
- 相关机构：复旦大学中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：解放军总医院科技创新苗圃基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- BTBD10基因的真核表达载体构建和亚细胞定位被引量：1
- 2009年
- 目的构建BTBD10重组真核表达载体,观察BTBD10在HEK293细胞中的定位。方法利用PCR方法扩增BTBD10全长,经HindⅢ和BamHI酶切后连接入pGFP-C3真核表达载体,构建pGFP-C3-BTBD10重组表达质粒,转染HEK293细胞,利用激光共聚焦显微镜观察BTBD10在细胞中的定位。结果经双酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的BTBD10读码框。激光共聚焦显微镜观察到空质粒pGFP-C3转染后,整个细胞内弥散绿色荧光,而转染pGFP-C3-BTBD10重组载体后,可见绿色荧光分布于HEK293细胞膜一侧的细胞浆中,提示BTBD10定位于细胞浆中。结论成功构建人BTBD10真核表达载体,BTBD10定位于哺乳细胞的细胞浆中,可能发挥蛋白之间的相互作用。
- 刘瑜王宣春陈凤玲李春霖胡仁明
- 关键词：真核表达转染
- BTBD10基因的细胞、组织mRNA表达谱研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究人BTBD10基因mRNA在不同组织、不同细胞系的表达水平。方法用DIG-11-dUTP标记人BTBD10编码区基因作为探针,利用Northern blot杂交观察BTBD10 mRNA在14种正常人体组织和5种细胞株的表达水平。结果BTBD10基因呈单一转录本,大小约为3 kb,BT- BD10基因表达较广泛,在各组织和细胞株中均有不同程度的表达,其中在脑、骨骼肌、脂肪、肝脏、主动脉、十二指肠、肺脏、胰岛β细胞株等表达较高,而胰腺、垂体、心脏中表达量低。结论人BTBD10表达广泛,可能在多种组织中发挥重要作用。
- 刘瑜王宣春陈凤玲胡仁明
- 关键词：基因表达
- 钾依赖钠钙交换蛋白6对人胚胎肾细胞钙离子浓度的影响
- 2009年
- 目的观察钾依赖钠钙交换蛋白6(NCKX6)对人胚胎肾细胞钙离子浓度的影响。方法RT-PCR克隆NCKX6基因全长,将NCKX6基因构建到真核表达载体pEGFP-C3,转染HEK293细胞,荧光分光光度仪观察细胞内钙离子浓度变化。结果重组真核表达载体pEGFP-C3-NCKX6构建成功,荧光分光光度仪观察到NCKX6过表达后HEK293细胞内游离Ca^(2+)浓度明显高于正常对照组,并有显著统计学差异。当细胞外145 mmol/L的Na+完全由145 mmol/L的Li+置换后,NCKX6过表达的HEK293细胞内Ca^(2+)浓度出现明显升高。结论NCKX6的双向转运模式主要以逆向转运模式即将细胞外Ca^(2+)转运入细胞内为主。
- 刘瑜王宣春陈凤玲胡仁明
- 关键词：真核表达钙离子
