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蚕蛹粗提浸液致敏小鼠哮喘模型的建立被引量：2: 2014年; 目的建立蚕蛹粗提浸液致敏Balb/c小鼠哮喘模型,检测分析蚕蛹粗蛋白致敏性。方法以Balb/c小鼠为模型实验动物,分为阴性组、阳性组。阴性组腹腔皮下注射生理盐水;阳性组腹腔注射蚕蛹粗提浸液致敏,连续3次,每次间隔1周。然后滴鼻激发1周每天1次。末次激发后24 h内进行气道高检测,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并对细胞进行分类、计数。检测特异性抗体(IgE)、细胞因子(IL-4、IL-10、INF-γ)以及肺组织病理变化等指标对模型的构建进行评价。结果阳性组的小鼠肺部病理改变明显,呈明显炎症病理改变,灌洗液中细胞计数明显升高,嗜酸性粒细胞明显升高(P<0.01),灌洗液IL-4、IL-10升高,INF-γ降低;阴性组各项指标均无升高。结论蚕蛹粗提浸液能使Balb/c小鼠发生致敏性哮喘,且致敏性强,建模成功,为以后相关过敏疾病防治奠定科研实验基础。; 李维中詹政科杨成彬刘志强肖小军龚苗刘志刚; 关键词：蚕蛹肺泡灌洗哮喘

microRNA在过敏性哮喘中的作用被引量：6: 2014年; microRNA(miRNA)是一种短单链小分子RNA,与蛋白质一起形成RNA诱导沉默复合体,引起靶mRNA的降解或抑制其翻译,所以miRNA的变化可影响机体大部分基因的表达。自从在哺乳动物细胞中被发现后,miRNA在过敏性疾病中的重要作用近些年来正逐步得到研究者重视。该文综述了miRNA在过敏性哮喘中的功能,主要包括miRNA的生成、调节辅助T细胞极化、在炎性反应和组织反应中的变化,胞外miRNA作为过敏性哮喘诊断的生物指标;并对miRNAs在未来的研究和应用进行展望。; 蒋聪利刘志刚夏立新; 关键词：MICRORNA 过敏性哮喘辅助T细胞生物指标

家蚕过敏原CSP5克隆表达、纯化鉴定及分析被引量：2: 2016年; 克隆家蚕过敏原CSP5（chemosensory protein 5 precursor）基因，表达、纯化该蛋白，鉴定其免疫活性，并进行生物信息学分析。人工合成家蚕化学感受蛋白5前体CSP5基因，将其连接至pMD18-T克隆载体，用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达后进行纯化，用western blotting和ELISA鉴定其免疫学特性，并采用生物信息学方法预测CSP5蛋白的理化性质、三级结构、潜在B细胞抗原表位。本研究成功克隆了纯度较高的重组CSP5蛋白，测序鉴定蛋白分子质量约为14．25kD。重组过敏原CSP5能与家蚕过敏患者血清IgE发生特异性结合。生物信息学方法推导其潜在B细胞抗原表位为17～22、35～36、51～55、70～74、106～110、112～115。获得的重组蛋白CSP5具有与天然蛋白相似的免疫学活性，为以标准化抗原作为临床特异性诊断和治疗以及由家蚕引起的过敏性疾病的进一步研究奠定了基础。; 马一禾胡维梁志林王辉刘志刚; 关键词：家蚕表达纯化 WESTERN BLOTTING

去泛素酶复合体Ubp3/Bre5的制备及与Cdc48作用（英文）: 2015年; 泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆菌中成功表达并纯化重组Ubp3与Bre5单体及Ubp3/Bre5复合体,首次成功大规模制备重组Ubp3/Bre5复合体.通过一系列pulldown实验,检验Ubp3/Bre5与AAA家族中泛素选择性ATP酶Cdc48的相互作用模式,结果发现,Ubp3及Bre5无法单独与Cdc48结合,但Ubp3/Bre5复合体可以有效与Cdc48相互作用.提出了Ubp3/Bre5-Cdc48相互作用的新模式,制备了高质量重组Ubp3/Bre5复合体.该研究为通过生化及结构生物学进行分子机制探索奠定了基础.; 苏文成吕操时丽丽景晓飞盖园明张洁谭焕波王鹏举夏立新邹培建秦刚; 关键词：结合蛋白质

家蚕MBP-Bmlp7蛋白的克隆表达及免疫学鉴定被引量：3: 2017年; 克隆表达家蚕蚕蛹30 kD(1 kD=1 u)脂蛋白家族成员Bmlp7(Bombyx mori lipoprotein 7)的融合蛋白,鉴定其致敏原性.合成Bmlp7的基因后连接至载体质粒p MAL-C5e上,在大肠杆菌BL21中诱导表达出麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein,MBP)-Bmlp7,纯化后,利用Western blot鉴定MBP-Bmlp7融合蛋白与家蚕过敏患者血清中特异性免疫球蛋白E(immunoglobulins E,Ig E)的结合能力.结果显示,纯化得到了纯度较高的MBP-Bmlp7融合蛋白,且该融合蛋白能够与家蚕过敏患者血清特异性IgE结合,说明Bmlp7是家蚕中一种潜在的致敏原.; 曹会蔡德丰杨平常刘志刚夏立新; 关键词：免疫学家蚕表达纯化免疫印迹

基于核酸修饰新策略的抗肿瘤铂配合物设计被引量：2: 2016年; 肿瘤已成为严重威胁人类健康的重大疾病之一。以顺铂为首的铂类抗肿瘤药物一直是化疗首选药物。但是长期用药导致的一系列的毒副作用如肾毒性、耳毒性和耐药性等极大地限制了铂类配合物的发展与应用。本文针对目前铂类药物所处形势重点综述了新一代铂类药物的设计研发方法:(1)研发具有新颖结构的铂类药物,例如经过改造的反式铂类配合物、多核铂类配合物、Pt(Ⅳ)配合物等;(2)发展新的抗肿瘤靶点,例如以G-四螺旋DNA(G4-DNA)为靶点,为寻找更有效的铂类抗肿瘤药物提供新的思路。同时通过列举最新研究成果,分析药物的抗肿瘤机理及在克服顺铂耐药性机理方面的研究进展,提出铂类药物的设计研发方法,让读者了解铂类抗肿瘤药物的发展历程和未来的发展趋势。; 郑小辉夏立新毛宗万; 关键词：核酸抗肿瘤铂配合物

表观遗传机制和哮喘的发生被引量：13: 2016年; 支气管哮喘是由多种细胞,特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的最常见的慢性气道炎症疾病[1],易感者表现为反复发作性咳嗽、喘鸣和呼吸困难,并伴有气道高反应性的可逆性、梗阻性呼吸道疾病[2]。最近的数据表明,哮喘和过敏性疾病的患病率不断提高,过敏性疾病严重影响患者的生活、工作,同时也大大加重了患者家庭和社会的经济负担。; 幸鹏刘志刚喻海琼夏立新; 关键词：哮喘儿童表观遗传慢性气道炎症气道高反应喘鸣

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国家自然科学基金(81273275)