国家自然科学基金(81200004)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：陈玉宝陈菲菲邹春芳邵宏涛孙禾更多>>
- 相关机构：南京中医药大学南京医科大学南京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经生长因子在慢性阻塞性肺疾病大鼠血、肺组织、支气管灌洗液中的表达被引量：3
- 2020年
- 目的建立单纯香烟刺激诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,并观察神经生长因子(NGF)在香烟刺激COPD大鼠、戒烟1个月COPD大鼠中血、肺组织、支气管灌洗液中的表达变化。方法24只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、COPD组、戒烟1个月COPD组,采用6个月单纯香烟刺激建立COPD大鼠模型。通过观察肺组织病理变化、检测大鼠肺功能、对支气管肺泡灌洗液行分类计数评估COPD动物模型。并测定3组血、肺组织、支气管肺泡灌洗液中NGF蛋白、NGF mRNA表达。结果COPD组、戒烟1个月COPD组大鼠肺组织病理均显示肺气肿形成明显,相比正常对照组,肺顺应性和每分钟通气量均明显下降,气道阻力明显升高(均P<0.05)。COPD组、戒烟1个月COPD组支气管肺泡灌洗液的巨噬细胞总数显著多于正常对照组(P<0.05),但这两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。3组血中NGF表达差异无统计学意义(P>0.05),COPD组、戒烟个1月COPD组肺组织、支气管肺泡灌洗液中NGF蛋白、NGF mRNA表达较正常对照组明显升高(均P<0.05),但这两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过6个月单纯香烟刺激成功建立COPD大鼠模型,并且戒烟1个月后,停止造模干预,COPD病变仍持续存在。NGF持续性参与COPD的发生发展,即使戒烟,NGF仍参与肺局部炎症反应。
- 李渺苗邵宏涛李宁孔铖英孙丽蒋涛
- 关键词：神经生长因子慢性阻塞性肺疾病
- 烟曲霉孢子抑制人支气管上皮细胞早期凋亡的机制探讨
- 2014年
- 目的探讨烟曲霉孢子对人支气管上皮细胞(16HBE)早期凋亡的影响及其可能机制。方法采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导16HBE细胞凋亡,再分别用不同浓度的乳胶珠颗粒、灭活烟曲霉孢子和静息烟曲霉孢子刺激上述细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,免疫印迹法检测细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达。结果 TNF-α刺激后16HBE细胞的凋亡率明显增加(P<0.05)。静息烟曲霉孢子组细胞凋亡率明显下降(P<0.05),caspase-3表达明显减少(P<0.05)。静息烟曲霉孢子浓度越高,细胞凋亡率及caspase-3表达越低。乳胶珠颗粒与灭活烟曲霉孢子对16HBE细胞凋亡率及caspase-3表达水平均无明显影响(P>0.05)。结论烟曲霉孢子可通过调控caspase-3而抑制TNF-α诱导的16HBE细胞早期凋亡,且烟曲霉孢子浓度越高抑制作用越明显。
- 孙禾王权吴婷吴晓东苏欣施毅
- 关键词：肿瘤坏死因子Α半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 不同免疫抑制剂对小鼠罹患侵袭性肺曲霉病的影响被引量：1
- 2017年
- 目的比较两种免疫抑制状态造成侵袭性曲霉感染(IPA)后天然免疫反应的异同。方法清洁级雄性BALB/c小鼠,分别使用地塞米松(A组)及环磷酰胺(B组)预处理后气道接种烟曲霉孢子建立IPA模型。观察小鼠存活率,肺病理检查,评估肺部及肺外脏器真菌负荷;支气管肺泡灌洗液(BALF)检测促炎、抗炎细胞因子浓度。结果 A组小鼠平均生存期与B组比较有显著差异。病理提示A组小鼠肺组织有大量炎症细胞聚集;B组可见到典型的曲霉菌丝浸润性生长。B组小鼠肺部烟曲霉CFU、烟曲霉18srRNA较A组升高;B组肺外各脏器与A组比较均具有统计学差异。检测BALF中炎症因子:A组TNF-α未检测到,IL-10峰值在72h出现,IL-1α自第一天起即升高,第3天达峰值;B组TNF-α及IL-10在24h后均明显升高,于48h达峰值;IL-1α一直在低水平维持;B组与各组间比较,TNF-α、IL-1α及IL-10均有显著差异。A、B两组IL-1β表达在接种烟曲霉后均迅速升高,并一直在高水平维持,两组间无差异。结论不同预处理造成小鼠免疫抑制后建立IPA模型,激素组肺部出现明显的炎症反应;环磷酰胺组可出现显著的全身真菌播散。
- 陈玉宝陈菲菲邹春芳邵宏涛
- 关键词：侵袭性曲霉感染动物模型小鼠致病机制
- 烟熏对大鼠肺泡巨噬细胞Dectin-1受体表达及对烟曲霉感染应答的影响
- 2022年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对肺泡巨噬细胞(AMs)Dectin-1受体表达及对烟曲霉感染应答能力的影响。方法实验研究。大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383加入CSE后再使用烟曲霉静止期孢子(RC)刺激以建立烟曲霉体外感染细胞模型,流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、蛋白质印迹检测Dectin-1表达;siRNA沉默和慢病毒载体过表达Dectin-1后通过吞噬实验检测AMs对RC吞噬能力,定量实时聚合酶链反应、酶联免疫吸附试验检测相关细胞因子表达。结果激光共聚焦显微镜(15.29±2.88比24.56±4.01,t=11.75,P<0.05)及流式细胞仪(17.73±4.95比25.94±7.12,t=17.27,P<0.05)均显示CSE降低AMs表面Dectin-1受体的表达。RC体外刺激后Dectin-1 mRNA的表达出现时间依赖性增加,对照组在所有时间点都较CSE组显著增加(P值均<0.05);蛋白表达结果类似:对照组明显高于CSE组(18 h:0.755±0.035比0.360±0.047;24 h:0.968±0.035比0.552±0.049,P值均<0.05)。CSE降低AMs对RC吞噬能力(吞噬率:53.33%±9.95%比75.17%±8.66%;吞噬指数:2.17±0.58比7.67±1.53,P值均<0.05)。siRNA下调Dectin-1表达联合CSE可以进一步降低NR8383细胞对RC的吞噬力(P<0.05),但单纯下调Dectin-1表达对RC的吞噬能力差异无统计学意义(P>0.05)。Dectin-1介导细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-4的产生:TNF-α、IL-1β在对照组增加尤为明显,感染6 h后达峰值,每个时间点比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与之相反,IL-4在CSE组升高更为显著,每个时间点比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。IL-10表达也增加,但2组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。使用siRNA抑制/慢病毒过表达Dectin-1对4种细胞因子mRNA和蛋白产生同向作用。结论CSE可引起AMs Dectin-1受体低表达和功能障碍,导致烟曲霉感染后吞噬能力降低和细胞因子异常表达。CSE引起的AMs抗曲霉防御能力下降部分是通过Dectin-1介导的。
- 邵宏涛陈玉宝孙禾施毅
- 关键词：DECTIN-1烟曲霉吸烟
