山东省自然科学基金(Z2008C08)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
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- 间充质干细胞体外对ITP患者T淋巴细胞分泌功能的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:体外观察间充质干细胞(MSCs)对特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者T淋巴细胞分泌细胞因子功能的影响。方法:采用Ficoll分离和体外贴壁、传代培养,扩增出骨髓MSCs;通过Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取ITP患者外周血T淋巴细胞。以经丝裂霉素(MMC)处理后不同数量(2×103、1×104、5×104cells/well)的MSCs作为基底层细胞,接种体外分离纯化的异体ITP患者T淋巴细胞,分别于2d、4d、6d后各自收集培养上清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法动态测定T淋巴细胞分泌白细胞介素2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化。结果:ITP患者T淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IFN-γ较正常人高(P<0.05),IL-4、IL-10较正常人低(P<0.05)。MSCs可显著抑制ITP患者或正常对照组T淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ(P<0.05),且随MSCs数量的增加,抑制增强(P<0.05),共培养4d、6d时作用明显强于2d时(P<0.05);MSCs可促进ITP患者T淋巴细胞分泌IL-4、IL-10(P<0.05),且随MSCs量的增加,促进作用增强(P<0.05),对IL-10的作用随时间延长而增强(P<0.05),但对IL-4的作用在培养第2d、4d、6d时无显著差异(P>0.05);在正常对照组,当MSCs数量>1×104可以促进T淋巴细胞分泌IL-4与IL-10(P<0.05),且随MSCs数量的增加,作用增强(P<0.05),共培养4d、6d时作用明显强于2d时(P<0.05)。结论:MSCs能够在体外调节ITP患者辅助性T细胞1(Thl)和辅助性T细胞2(Th2)反应平衡,可使ITP患者Th1极化状态部分改善。
- 马骥郭成山赵霞贺韦东王迎雪董巧凤赵敬杰
- 关键词：间充质干细胞特发性血小板减少性紫癜细胞因子类T淋巴细胞
- 间充质干细胞对原发免疫性血小板减少症患者T细胞分泌细胞因子及调节性T细胞水平影响的体外研究被引量：5
- 2013年
- 目的体外观察骨髓间充质干细胞（MSC）对原发免疫性血小板减少症（ITP）患者CD4＋CD25＋T细胞比例以及T细胞分泌IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10功能的影响。方法采用Ficoll分离骨髓单个核细胞，体外培养扩增MSC；采用Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取正常人及ITP患者外周血T细胞，应用流式细胞术（FCM）检测T细胞中CD4＋CD25＋T细胞比例；MSC经丝裂霉素（MMC）处理后分别以1×10^4、5×10^4、2×10^5／孔接种于培养板，然后分别接种体外分离纯化的异体ITP患者及正常人T细胞，共培养5d后用FCM检测CD4＋CD25＋T细胞比例，用ELISA法测定培养上清中IL-2、IFN—γ、IL-4、IL-10含量。结果2×10＋／孔MSC与ITP患者T细胞共培养5d后，CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋／CD4＋细胞均高于未加MSC的ITP患者T细胞[（4．56±0．70）％对（2．24±0．81）％，（9．91±1．18）％对（4．08±1．17）％]，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与未加MSC的ITP患者T细胞组比较，培养上清中IL-2、IFN-γ浓度减低l（97．21±12．07）pg／ml对（280．47＋17．33）pg／ml，（72．75±7．81）pg／ml对（129．33＋16．34）pg／ml]，IL-4、IL-10浓度升高[（37．98±4．05）pg／ml对（16．34±2．60）pg／ml，（113．77＋5．68）pg／ml对（54．78±5．62）pg／m1]。结论MSC在体外可抑制ITP患者Thl细胞分泌IL-2、IFN-γ，促进Th2细胞分泌IL．4、IL-10，上调CD4＋CD25＋T细胞比例，进而诱导ITP患者免疫耐受形成。
- 赵霞丁慧芳郭成山路希敬徐敏邢健韩芳王椋鲁光刘国强
- 关键词：间质干细胞血小板减少调节性白细胞介素类干扰素Γ
- CXCR3及其配体与自身免疫病的相关研究被引量：1
- 2011年
- 趋化因子是一种小分子量蛋白，参与T细胞分化、白细胞迁移、血管再生、肥大细胞脱颗粒等多种免疫功能。趋化因子受体为一种7次跨膜G蛋白耦联受体，趋化因子受体与趋化因子密切联系，共同构成生理及病理情况下复杂的网络系统，参与多种炎症性疾病以及自身免疫性疾病的发生与发展。趋化因子受体CXCR3及其配体，在系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）、干燥综合征（SS）3种自身免疫性疾病中发挥着重要作用。
- 周淑芬郭成山
- 关键词：趋化因子趋化因子受体CXCR3自身免疫性疾病
- 原发免疫性血小板减少症患者脾脏趋化因子受体CXCR3和CCR5的表达
- 2012年
- 目的探讨趋化因子受体CXCR3和CCR5在原发免疫性血小板减少症（ITP）患者脾脏中的表达及其临床意义。方法以10例ITP患者（ITP组）为研究对象，并以8例创伤性脾破裂患者脾切除标本作为正常对照。应用免疫组化法检测脾脏组织CXCR3、CCR5阳性表达率，用Westernblot法检测脾脏组织中CXCR3和CCR5的蛋白表达水平，逆转录聚合酶链反应检测CXCR3和CCR5mRNA表达水平。结果免疫组化结果显示ITP患者脾脏组织CXCR3、CCR5阳性表达率（90％、100％）均高于对照组（75％、87．5％），差异均有统计学意义（P〈0．05）；ITP患者脾脏组织CXCR3蛋白、mRNA表达量分别为对照组的3．0倍、3．5倍；CCR5蛋白、mRNA表达量分别为对照组的1．2倍、1．7倍，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论CXCR3及CCR5的高表达可能在ITP患者脾脏免疫紊乱中起着一定的作用。
- 周淑芬马骥贺韦东曲惠廷刘宗堂王涓冬窦爱霞张妮郭成山
- 关键词：免疫性血小板减少症CXC趋化因子受体3脾脏
- 间充质干细胞体外对ITP患者CD4^+CD25^+T细胞影响被引量：3
- 2013年
- 目的:体外观察间充质干细胞(MSCs)对免疫性血小板减少症(ITP)患者CD4+CD25+T细胞比例的影响。方法:采用Ficoll分离骨髓单个核细胞,通过体外培养,扩增出MSCs,通过Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取正常人及ITP患者外周血T淋巴细胞,并应用流式细胞术检测T细胞中CD4+CD25+T细胞比例;MSCs经丝裂霉素MMC处理后按不同数量(2×103、1×104、5×104个细胞/孔)接种培养板作为基底层细胞,然后分别接种体外分离纯化的异体ITP及正常人T淋巴细胞,于2、4、6天后各自收集T淋巴细胞及培养上清,用流式细胞术检测接种于骨髓MSCs的ITP患者CD4+CD25+T细胞比例。结果:ITP患者外周血CD4+CD25+T细胞数量及CD4+CD25+/CD4+比值均明显低于正常对照组(P<0.05);在PHA作用下,数量>1×104的骨髓MSCs与T淋巴细胞共培养4天后,与正常对照组相比,MSCs可显著上调ITP患者及正常人T淋巴细胞中CD4+CD25+T淋巴细胞比例及CD4+CD25+/CD4+比值(P<0.05),且随MSCs量的增加,作用增强(P<0.05)。体外骨髓MSCs对ITP患者CD4+CD25+T淋巴细胞具有上调作用,以上这种机制可使ITP患者的细胞因子及CD4+CD25+T淋巴细胞逐渐接近于正常人但仍达不到正常人水平(P<0.05)。结论:MSCs在体外可能通过上调CD4+CD25+调节性T细胞,进而诱导ITP患者免疫耐受形成。
- 赵霞丁慧芳刘国强郭成山邢健徐敏
- 关键词：免疫性血小板减少症CD4+CD25+T细胞免疫耐受
- 免疫性血小板减少症Th1和Th2趋化因子及其受体表达的研究被引量：2
- 2014年
- 目的免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是一种获得性自我免疫紊乱导致的出血性疾病,本文旨在研究ITP患者体内T-helper 1(Th1)趋化因子CCL5、CXCL11及其受体CCR5、CXCR3和Th2趋化因子CCL11及其受体CCR3的表达变化,以探讨趋化因子及其受体在ITP免疫异常中的作用。方法选择28名活动性ITP患者为研究对象,随机选取21名与ITP患者相匹配的健康人作对照组。以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测ITP患者和对照组血浆中CCL5、CXCL11和CCL11的含量,采用实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)CCL5、CXCL11、CCL11、CCR5、CXCR3以及CCR3 mRNA的表达。结果 Th1相关趋化因子CCL5和Th2相关趋化因子CCL11在活动性ITP患者血浆中含量均低于正常对照组(P<0.05),而Th1趋化因子CXCL11升高(P<0.05);ITP患者PBMC的CXCL11 mRNA表达高于对照组,CCL11 mRNA表达低于对照组(P<0.05),而CCL5 mRNA在ITP组与对照组差异无显著性(P>0.05)。ITP患者血浆中Th1相关趋化因子受体CCR5和CXCR3表达量高于对照组(P<0.05),Th2相关趋化因子受体CCR3降低(P<0.05)。经过糖皮质激素等治疗有效的22例患者,Th1趋化因子CXCL11、趋化因子受体CCR5和CXCR3均下降(P<0.05),血浆CCL5含量回升,但是仍低于对照组(P<0.05);而Th2相关趋化因子CCL11及其受体CCR3均回升(P<0.05)。结论 Th1/Th2相关趋化因子及其受体的异常表达可能参与了ITP的免疫紊乱,是ITP发病因素之一;阻断Th1相关趋化因子与其受体的作用途径,可望成为ITP的生物调控靶点。
- 刘宗堂马骥贺伟东张妮周淑芬张培艺刘文婷郭成山
- 关键词：免疫性血小板减少症趋化因子趋化因子受体
