国家高技术研究发展计划(2002AA241111)
- 作品数：42 被引量：416H指数：14
- 相关作者：陈晓阳柳参奎骈瑞琪赵杨杨晓红更多>>
- 相关机构：北京林业大学东北林业大学华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金黑龙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 植物显微及超微结构变化与其抗逆性关系的研究进展被引量：36
- 2008年
- 植物的形态结构总是与环境相适应。环境逆境影响植物生长,并可引起植物形态结构的相应变化,如干旱胁迫下根的皮层层数减少,以缩短水分横向运输的距离;盐胁迫使根表皮和皮层细胞中的线粒体数量增加,可为渗透适应补充能量。高盐下,茎皮层细胞叶绿体内淀粉粒数目显著增多,体积增大,既缓解了能量的短缺,保证细胞正常的生命活动,又可提高渗透压,利于水分的吸收与保持。有些旱生植物的叶子上常有浓密的表皮毛或白色的蜡质,这可能与减低蒸腾作用和反射强光有关。本文概括了不同逆境下植物根、茎、叶的显微及超微结构变化,并对这些结构变化与植物抗逆性之间的关系进行了分析,旨在为植物抗逆性机理研究和抗逆性品种培育提供有益的参考。
- 杨春雪卓丽环柳参奎
- 关键词：植物显微结构超微结构抗逆性
- 水稻碳酸酐酶基因5’端启动子不同区域对基因表达调控的研究被引量：7
- 2005年
- 根据水稻碳酸酐酶基因5'端序列,从4处不同位置设计上游引物,在碳酸酐酶基因ATG前0位点处设计下游引物。通过PCR扩增基因5'端1600bp、964bp、585bp、313bp片段,将以上目的片段克隆到以GUS为报告基因的植物表达载体pBI121上,通过农杆菌介导法转化烟草。转化植株GUS活性检测结果,发现-1600～0bp片段启动GUS在烟草的叶、茎中有GUS活性,而其余3段区域(-964～0bp,-585～0bp,-313～0bp)未检测出GUS活性,这些暗示了-1600～0bp启动子区域在控制基因表达时,具有在叶、茎中表达,在根中不表达的组织特异性。
- 阚彬彬于耸柳参奎高野哲夫
- 关键词：基因表达调控酶基因水稻启动子GUS活性转化植株
- 水稻NADP-苹果酸酶的原核表达、纯化和抗体制备被引量：4
- 2007年
- 构建了水稻NADP-ME_2基因cDNA的原核表达载体pQE30,并诱导表达出有生物学功能的融合蛋白。用Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化出NADP-ME_2融合蛋白,并测定了融合蛋白酶学特性(V_(max)、K_m、K_(cat)、底物特异性)。用纯化的NADP- ME_2融合蛋白免疫家兔,制备出抗水稻NADP-ME特异性抗体。全蛋白双向电泳后Western印迹表明水稻中至少有4个NADP-ME家族蛋白质成员。
- 程玉祥柳参奎
- 关键词：水稻原核表达酶学特性抗体
- 二色胡枝子组织培养的研究被引量：11
- 2006年
- 为探索建立植株再生系统技术,以二色胡枝子种子为材料,对该树种组织培养进行了研究。结果表明,以0.1%升汞对种子灭菌2 min,发芽率较高,污染率仅为5%;基础培养基为1/2 MS,直立苗比例达到80%以上,显著高于MS和B5培养基;在增殖培养中,BA对分化系数影响最大,NAA其次,ZT的作用不明显,适宜的增殖培养基为1/2 MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L,分化系数可达3.15;随着NAA浓度提高,对生根抑制作用加强,其浓度不宜超过0.5 mg/L,IBA对生根有促进作用,浓度以IBA 1.5 mg/L为宜。
- 陈佳陈晓阳李云
- 关键词：二色胡枝子
- 茶树叶糖蛋白分离及鉴定的初步研究被引量：4
- 2005年
- 茶叶是一种有益健康的保健食品,保健功能在于它有多种化学活性成分.近年来研究表明,茶叶糖蛋白可能是茶叶的保健因子之一.从茶树叶中提取了总蛋白、45%～70%硫酸铵分级总蛋白、分级蛋白Sephadex G-100凝胶层析分离出粗糖蛋白,根据糖蛋白糖链及蛋白的对照染色鉴定出多种茶树叶糖蛋白,并从SDS-胶上快速纯化了三种茶叶糖蛋白.ConA-Sepharose 4B亲和层析从茶树叶总蛋白中分离出16种天然活性糖蛋白.
- 程玉祥柳参奎
- 关键词：茶树叶SEPHADEX糖蛋白保健因子快速纯化天然活性
- NaHCO3胁迫下星星草根特异表达蛋白初步鉴定被引量：5
- 2008年
- 盐胁迫是影响全世界作物产量的主要非生物胁迫之一,东北松嫩平原的苏打盐碱土含有相对较高的碳酸盐(NaHCO3和Na2CO3)。与NaCl胁迫相比,碳酸盐胁迫对植物的影响具有更加复杂的特性,除Na+对植物的生长发育产生影响外,高pH也强烈抑制植物多种代谢过程。星星草是一种广泛分布于我国北方的天然耐盐碱植物,在含高Na+和高pH值的土壤中能够生长良好,本文中,我们以星星草为实验材料,对NaHCO3与NaCl胁迫下星星草根蛋白质的双向电泳图谱进行了初步的比较与分析,以水(CK1)、NaCl(CK2)为对照,初步探查了NaHCO3胁迫特异诱导表达蛋白。实验结果表明,大部分蛋白质点在凝胶上的相对位置和丰度变化不明显,有7个蛋白质点与NaCl胁迫相比为NaHCO3胁迫特异诱导表达蛋白,5个点在两种盐胁迫下丰度均上调,但在NaHCO3胁迫下上调更明显。这些蛋白参与基因表达调控及能量代谢等过程。
- 杨春雪罗秋香卓丽环柳参奎
- 关键词：星星草NAHCO3胁迫特异表达蛋白质
- 降低木质素、提高抗逆性的无标记植物表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 采用高保真酶用PCR方法从pMD18-BADH载体上扩增出目的基因BADH,替换pBI121质粒中的gus基因,构建pBI121-BADH植物表达载体。经过2对引物检测,证明pBI121-BADH载体构建正确。又从pBI121-BADH质粒中扩增出35s-BADH-nos片段,所用引物加上了Nhe I和Cla I接头,扩增片段经回收后插入到pUCm-T载体中测序。测序表明,所扩增的35s-BADH-nos片段与模版同源性为100%。将测序正确的质粒pUCm-35s-BADH-nos用Nhe I和Cla I酶切后连接到进行了相同酶切的pBI121-xylA载体上,用35s-BADH-nos片段取代pBI121-xylA载体上的npt II基因片段,构建pBI121-xylA-BADH双元植物表达载体,该载体经PCR检测和酶切检测,与预期结果相同。最后,用Pme I、Cla I从pBI121-xylA-BADH上切出片段35s-BADH-nos,将其连接到进行了相同酶切的pt4CL1-p载体上,使35s-BADH-nos片段取代pt4CL1-p载体上的npt II基因片段,构建了无选择标记的反义4CL-BADH植物双元表达载体。
- 杨晓红陈晓阳
- 关键词：甜菜碱醛脱氢酶基因无选择标记植物表达载体
- 木糖选择系统下xylA&BADH双价基因对二色胡枝子的遗传转化
- 2021年
- 【目的】建立安全、无抗生素的二色胡枝子遗传转化体系,通过基因工程技术进一步提高二色胡枝子的抗逆性。【方法】采用PCR法从大肠杆菌DH5α菌株中克隆木糖异构酶基因(xylA);构建含有xylA和甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)的植物表达载体pBI121-xylA-BADH;培养基中用木糖取代一定量的蔗糖建立二色胡枝子的木糖选择系统;以农杆菌介导法对二色胡枝子的子叶节进行遗传转化,通过PCR和Southern检测确定转基因植株;对转化植株及非转化植株进行0.5~2 g·L^(-1)NaCl胁迫,观测植株生长表现,测定1 g·L^(-1)NaCl胁迫下转化植株和非转化植株的甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素、电导率。提取转化植株及非转化植株组培苗叶片中的可溶性总糖,用高效液相色谱仪分析糖成分。【结果】测序结果表明,克隆的木糖异构酶基因与GenBank公布的大肠杆菌xylA核苷酸序列的同源性达到100%,PCR及酶切检测表明正确构建了pBI121-xylA-BADH植物表达载体。在二色胡枝子遗传转化过程中,应在纯木糖培养基上筛选抗性芽,在抗性芽增殖和生根过程中,可以采用蔗糖5 g·L^(-1)、木糖25 g·L^(-1)的糖类混合剂进行进一步筛选。在农杆菌介导的遗传转化中,外植体预培养1天后,采用LBA4404菌株侵染20~30 min,共培养3天,可以获得相对较多的木糖抗性芽。对获得的部分抗性芽进行PCR及Southern检测,得到2个转基因株系,二色胡枝子遗传转化率低于4.7%。耐盐性观测表明,转基因植株能够在含有2 g·L^(-1)NaCl的培养基上生长并生根,而非转基因植株在相同培养基上则叶子变黄、脱落,且不能生根。无盐胁迫时,转基因和非转基因植株在甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素含量和电导率方面无显著性差异;盐胁迫后,非转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性无明显变化,而转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性大幅度提升,且达到非转基因植株的8~10倍;盐
- 杨晓红陈晓阳
- 关键词：二色胡枝子甜菜碱醛脱氢酶基因木糖异构酶基因
- 干旱胁迫条件下胡枝子渗透物质的变化被引量：24
- 2006年
- 以胡枝子属中的6个种为材料,研究了干旱胁迫条件下脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白及热稳定蛋白的变化.结果表明,干旱胁迫对胡枝子脯氨酸含量变化有较大的影响.在土壤相对含水量从75%-80%下降到55%-60%时可溶性糖的含量增加较少,而当土壤相对含水量下降到35%-40%时则迅速增加.随着土壤相对含水量的下降,各个种可溶性蛋白含量均呈逐渐下降趋势.热稳定蛋白含量在土壤相对含水量从75%-80%下降到55%-60%时增加,而当土壤相对含水量下降到35%-40%时则迅速减少.研究结果认为在脯氨酸、热稳定蛋白与可溶性糖之间可能存在着互为补偿的作用.
- 杜金友胡冬南李伟刘艳芳杨晴陈晓阳
- 关键词：干旱胁迫脯氨酸可溶性糖可溶性蛋白热稳定蛋白
- 二色胡枝子组培再生体系优化的研究被引量：5
- 2009年
- 为了实现二色胡枝子高效再生体系的优化,以二色胡枝子为材料,研究了6-BA、2,4-D、NAA等因素对其子叶节再生、节段扩繁和试管苗生根的影响。试验结果表明:子叶节再生最佳培养基为MS+6-BA0.1 mg/L;最佳增殖培养基为MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.01 mg/L;IBA,NAA对二色胡枝子试管苗的生根作用有影响,最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L或者1/2MS+NAA0.1 mg/L。
- 黄天伟李伟李明陈晓阳
- 关键词：二色胡枝子再生体系优化增殖
