湖北省教育厅资助项目(2004D006)
- 作品数：4 被引量：20H指数：3
- 相关作者：张有顺胡礼仪周新黄玲戴宗晴更多>>
- 相关机构：武汉大学郧阳医学院附属东风医院长沙理工大学更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 环中的粗素理想与模糊粗素理想被引量：3
- 2005年
- 首次提出了环中的粗素理想与模糊粗素理想的概念。
- 肖旗梅张振良张金玲
- 关键词：同态
- 介导MDR1的RNAi腺病毒载体的构建被引量：2
- 2006年
- 目的介导MDR1的RNAi腺病毒载体,探讨RNA干扰MDR1基因对人肝癌细胞的作用。方法根据MDR1mRNA序列构建表达MDR1mRNA特异的shRNA的腺病毒穿梭质粒pshuttle-MDR1。与腺病毒载体体内重组为pAd-MDR1后转染人肝癌细胞SMMC-7721,以FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率,以共聚焦显微镜检测细胞内Rh123的潴留,WesternBlot检测P-gp蛋白量的变化。结果构建成pshuttle-MDR1经限制性酶切和PCR证实与设计一致,将pAd-MDR1转染肝癌细胞SMMC-7721后,FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率为22.9%和30.8%,远低于对照组(85.8%)。WesternBlot经病毒感染的SMMC-7721/R的P-gp含量明显低于对照SMMC-7721/R,而与SMMC-7721/S细胞接近。结论成功构建了pshuttle-MDR1腺病毒载体,并有效干扰了肝癌细胞细SMMC-7721MDR1的表达。
- 张志云郑启昌戴宗晴张有顺邹灿黄玲王菊
- 关键词：RNAI肝癌细胞多药耐药基因腺病毒载体
- 载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌耐药细胞MDR1表达的研究被引量：14
- 2004年
- 目的 :构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)表达质粒 ,观察对肝癌耐药细胞Bel 740 2 /R的MDR1mRNA的抑制作用。方法 :利用分子克隆技术 ,将含MDR1的双链DNA ,与经双酶切后的载体PGE 1连接 ,构建pshRNA MDR1重组质粒 ,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株Bel 740 2 /R ;RT PCR分析MDR1mRNA的表达 ,MTT法检测细胞对药物的敏感性 ,流式细胞仪检测细胞内罗丹明 12 3 (Rh12 3 )的潴留和P gp的表达。结果 :PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功 ,并能明显地抑制MDR1mRNA的表达 ;对盐酸表柔比星和顺铂的半数抑制浓度IC50明显降低 ,P <0 0 5 ;P gp的表达阳性率降低了 5 7 3 % ;细胞内Rh12 3的浓度显著增高 ,P <0 0 5。结论 :构建的pshRNA MDR1表达质粒能有效地降低肝癌耐药细胞MDR1mRNA和P gp的表达。
- 胡礼仪周新张有顺戴宗晴黄玲王菊
- 关键词：RNA肝肿瘤
- 抑制MDR1基因表达shRNA RNAi系统的构建被引量：6
- 2005年
- 目的构建抑制多药耐药基因(MDR1)表达的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体系统。方法根据MDR1基因已知序列,设计两段21个碱基的MDR1特异性靶序列,合成两对62nt并含有编码shRNA序列的寡核苷酸,双链退火后,克隆到经过BamHI和XbaI双酶切后线性PGE-1载体的U6启动子下游,重组构建RNA干扰(RNAi)质粒。结果对重新构建的pshRNA-MDR1载体经PCR扩增后行电泳分析,并对含有插入基因片段行测序分析。结果表明,62个碱基均成功插入到预计位点,并且序列完全一致。结论载体的成功构建为研究其对MDR1基因表达的抑制作用打下基础,同时使我们发展了在体内合成siRNA的方法。
- 秦维超张有顺周新胡礼仪黄玲
- 关键词：多药耐药基因RNA干扰真核表达载体
