山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2005BS03013)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：张师前周晓亮石琰吴喜梅张爱凤更多>>
- 相关机构：山东大学海口市妇幼保健院宁夏医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DAC对卵巢癌细胞株增殖及其MAGE、BAGE、GAGE基因表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的探讨5-杂氮脱氧胞嘧啶(DAC)对卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、COC1增殖及其肿瘤特异性抗原MAGE、BAGE、GAGE基因表达的影响。方法将对数生长期的卵巢癌细胞株与DAC共同培养,观察细胞生长指数,利用流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR技术检测卵巢癌细胞株在DAC作用前后MAGE、BAGE、GAGE基因的表达。结果DAC能使大多数巢癌细胞株阻滞在G0期,并使其MAGE、BAGE、GAGE基因表达增加。结论DAC能抑制卵巢癌细胞株的增殖,提高其肿瘤特异性抗原基因的表达。
- 韩风贤张师前周晓亮吴喜梅石琰
- 关键词：卵巢肿瘤
- 卵巢上皮癌中DNA错配修复基因启动子区甲基化状态研究
- 2007年
- 目的探讨卵巢上皮癌中 DNA 错配修复基因(hMLH1、hMSH2)启动子区甲基化状态及其在卵巢癌发生发展中的作用。方法用甲基化特异性 PCR(MSP)法检测20份正常卵巢组织,25份良性卵巢肿瘤,56份卵巢上皮癌中 hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态;同时检测5-氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理前后卵巢癌细胞株 SKOV3和3AO 中 hMLH1、hMSH2甲基化改变;逆转录(RT)-PCR 法检测5-Aza-CdR(1 μm/L)处理前后卵巢癌细胞株中 hMLH1和 hMSH2 mRNA 表达水平。结果正常卵巢癌组织中均未见 hMLH1、hMSH2启动子甲基化;良性卵巢肿瘤中 hMLH1和 hMSH2甲基化阳性率分别为4%(1/25)、8%(2/25);卵巢上皮癌中 hMLH1和hMSH2甲基化阳性率分别为30.4%(17/56)、51.8%(29/56);且与肿瘤细胞的分化程度和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。5-Aza-CdR 处理卵巢癌细胞株后,可逆转 hMLH1和 hMSH2启动子区的甲基化,细胞株的 hMLH1和 hMSH2 mRNA 表达均有不同程度的增加。结论 DNA 错配修复基因hMLH1、hMSH2甲基化为卵巢癌发生发展中的早期基因改变,有可能成为卵巢癌早期诊断、评价疗效和判定预后的分子生物学指标。hMLH1和 hMSH2甲基化与 mRNA 表达密切相关,是表达调节的重要方式之一,这种改变可被甲基化酶抑制剂所逆转。
- 张师前张爱凤张琳琳傅乐乐于浩
- 关键词：卵巢肿瘤DNA甲基化错配修复基因
- 肿瘤特异性抗原MAGE、BAGE、GAGE在子宫内膜癌组织中表达的研究被引量：7
- 2006年
- 目的:研究MAGE、BAGE、GAGE基因在子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中的表达,并探讨其肿瘤特异性抗原作为子宫内膜癌免疫治疗特异性靶位的可能性。方法:采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)技术,检测35例子宫内膜癌组织和15例正常子宫内膜组织中MAGE-1、MAGE-3、BAGE和GAGE1-2基因的表达情况,以-βactin作内参照。结果:35例子宫内膜癌组织中,MAGE-1、MAGE-3、BAGE、GAGE1-2表达阳性率分别为46%(16/35)、49%(17/35)、20%(7/35)和26%(9/35),有77%的标本至少表达其中一种基因。15例正常子宫内膜组织中MAGE-1、MAGE-3、BAGE、GAGE1-2基因表达均为阴性。结论:肿瘤特异性抗原MAGE、BAGE、GAGE基因在子宫内膜癌中有较高的表达,MAGE-1、MAGE-3、BAGE基因的表达与子宫内膜癌的病理分期及分级无相关性,GAGE1-2与子宫内膜癌的分期无关,与分级有关。其可作为子宫内膜癌患者免疫治疗的特异性靶点。
- 吴喜梅张师前周晓亮石琰
- 关键词：子宫内膜肿瘤肿瘤特异性抗原
- 卵巢癌患者RUNX3基因启动子区甲基化状态分析
- 2008年
- 目的 探讨人 RUNX3（runt-related transcription factor 3 gene）基因在上皮性卵巢癌组织中的甲基化状态及其在卵巢癌发生发展中的作用。方法用甲基化特异性PCR（MSP）检测32份卵巢癌组织、32份癌旁组织、36份卵巢良性上皮性肿瘤组织及10份正常卵巢组织中RUNX3基因启动子CpG岛的甲基化频率。培养2种卵巢癌细胞系（3AO，SKOV3），MSP法检测加入5-氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-2＇-deoxycytidine）前后RUNX3基因在卵巢癌细胞系中的甲基化水平。逆转录（RT）-PCR检测加入5-aza-2’deoxycytidine前后卵巢癌细胞株中RUNX3 mRNA的表达改变，及上述各卵巢组织中RUNX3基因mRNA的表达情况。结果卵巢癌标本中53．1％（17／32）发生了RUNX3基因启动子甲基化；癌旁组织RUNX3基因甲基化率为37．5％（12／32）；良性卵巢肿瘤组织中RUNX3基因甲基化率为16．7％（6／36）；10份正常卵巢组织均未检测到RUNX3基因甲基化。卵巢癌组织中甲基化率与临床分期、细胞分化程度无相关性。卵巢癌与良性卵巢肿瘤和正常组织间的甲基化率的差异有统计学意义（分别X^2=10．060,X^2=8．925，均P〈0．05）。2株卵巢癌细胞系中均发生了RUNX3启动子甲基化，经5-aza-2’deoxycytidine处理细胞株后，可部分或完全逆转RUNX3基因启动子甲基化。RUNX3基因mRNA的表达在卵巢癌中为16．7％（6／32）；癌旁组织为28％（9／32），良性肿瘤中为72％（26／36），正常组织中为80％（8／10），其表达在卵巢癌与良性肿瘤和正常卵巢组织中的差异有统计学意义（分别X^2=19．443,X^2=12．862，均P〈0．05）。经5-aza-2’deoxycytidine处理细胞株后，各细胞株RUNX3基因mRNA较加药前均有不同程度的表达增加。结论 卵巢癌组织中RUNX3基因启动子有较高的甲基化率，且在卵巢癌的发生发展中起重要作用；有可能成为卵巢癌早期诊断的分子生物学指标。RUNX3基因甲基�
- 张师前位玲霞
- 关键词：卵巢肿瘤DNA结合蛋白质类转录因子
- 5-氮-2′-脱氧胞苷对人卵巢癌细胞凋亡及DNA错配修复基因表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:观察5-氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,又称5-aza-CdR)对卵巢癌细胞SKOV3和3AO增殖凋亡及DNA错配基因hMLH1和hMLH2表达的影响。方法:以特异性甲基转移酶抑制剂5-aza-CdR0.5、5、50μmol/L处理人卵巢癌细胞SKOV3和3AO3d,继续常规培养7d后,采用MTT比色法观察细胞经药物处理前后的增殖活性,用流式细胞术分析5-aza-CdR对细胞凋亡影响,以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞经5-aza-CdR处理前后DNA错配修复基因hMLH1和hMSH2mRNA表达水平的改变。结果:人卵巢癌细胞SKOV3和3AO经5-aza-CdR处理后,与对照组比较,0.5、5、50μmol/L均能明显抑制肿瘤细胞生长,随着5-aza-CdR浓度增加,细胞增殖速度下降。SKOV3经5-aza-CdR0.5、5、50μmol/L处理后细胞的凋亡率分别为(10.59±1.57)%、(17.52±1.72)%、(34.10±1.45)%,3A0经0.5、5、50μmol/L5-aza-CdR处理后细胞的凋亡率分别为(11.11±2.21)%、(17.24±1.11)%、(26.53±2.00)%,与对照组相比均有统计学意义(P<0.01);且凋亡率与剂量成正相关(FSKOV3=227.6,PSKOV3<0.01;F3AO=108.4,P3AO<0.01)。经5-aza-CdR处理后的两株卵巢癌细胞中hMLH1和hMLH2的mRNA表达量有不同程度的增加(P<0.01),且与药物存在剂量依赖性。结论:在人卵巢癌细胞株SKOV3和3AO中,5-aza-CdR可部分逆转hMLH1和hMLH2的失活,恢复其生长调控功能,抑制肿瘤细胞生长,并诱导细胞凋亡。
- 张爱凤张师前吴喜梅张琳琳傅乐乐
- 关键词：卵巢癌错配修复基因甲基化凋亡
