新疆维吾尔自治区自然科学基金(200821169) 作品数:5 被引量:21 H指数:3 相关作者: 苏艳 王世民 张向新 石庆华 周军 更多>> 相关机构: 新疆农业大学 新疆畜牧科学院 更多>> 发文基金: 新疆维吾尔自治区自然科学基金 新疆维吾尔自治区高校科研计划科学研究重点项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
新疆奶牛乳源大肠杆菌毒力相关基因eaeA的克隆及序列分析 被引量:6 2011年 从采自新疆乌鲁木齐市周边的5个奶牛场疑患隐性乳腺炎奶牛乳样,分离、纯化、鉴定出34株牛乳源大肠杆菌。根据GenBank发表的大肠杆菌16S rRNA序列和eaeA基因序列,用Oligo 6.0软件分别设计两对特异性引物,对分离菌株进行复检,并利用聚合酶链式反应(PCR)对eaeA基因进行扩增,结果10株为阳性,阳性率为29.4%(10/34)。将阳性样品进序列分析,结果与已发表的序列同源率为65%以上。与FJ609802株同源性较高,同源性75%。将阳性菌株用大肠埃希氏菌O抗原定型血清标定,以O21血清型的菌株eaeA基因阳性率较高。 王世民 苏艳 吐尔洪.努尔关键词:奶牛乳腺炎 金黄色葡萄球菌纤连结合蛋白信号肽的生物信息学分析及其真核分泌表达 被引量:3 2012年 参考GenBank中收录的金黄色葡萄球菌FnBPA(fibronectin-binding protein A)基因和牛IFN-γ序列进行了信号肽序列的分析。分析结果显示,牛IFN-γ信号肽序列相关指标优于金黄色葡萄球菌FnBPA基因自身的信号肽序列。在此基础上利用重叠延伸PCR法以牛IFN-γ信号肽序列取代金黄色葡萄球菌FnBPA基因的信号肽序列,并构建分泌型真核表达载体PV-SFn。该重组表达载体转染BHK-21细胞后经ELISA及Western-blot检测证实可有效分泌表达目的蛋白。 王世民 苏艳关键词:金黄色葡萄球菌 生物信息学分析 新疆奶牛乳源大肠杆菌Irp2毒力岛的克隆及序列分析 被引量:3 2010年 采集新疆奶牛隐性乳腺炎乳样,经分离、鉴定,从中得到乳源大肠杆菌,并将大肠杆菌菌株用大肠杆菌O因子血清标定。根据GenBank已发表的Irp2基因序列,用Oligo 6.0生物软件设计一对特异性引物。对分离得到的大肠杆菌菌株提取基因组DNA,利用聚合酶链式反应(PCR)进行扩增。结果表明,所分离大肠杆菌中Irp2基因阳性率为35.3%(12/34),阳性样品的测序结果与已发表的Irp2基因序列高度同源,同源率在98%以上。同时发现Irp2基因的阳性率与血清型并没有相关性。 吐尔洪.努尔 王世民 苏艳关键词:甜菜碱 牛乳腺炎 进化树 新疆奶牛乳腺炎致病性金黄色葡萄球菌FnbpA基因的克隆与序列分析 被引量:6 2010年 采集新疆奶牛隐性乳腺炎乳样,经分离、鉴定,从中得到金黄色葡萄球菌,参考GenBank中发表的FnbpA基因序列,用Oligo 6.0软件设计一对特异性引物。提取分离株中的基因组DNA,经PCR扩增得到1 654 bp的目的片段FnbpA,将其插入PMD18-T克隆载体中构建PMD18-FnbpA重组质粒,将其转入到大肠杆菌DH5α中,并进行测序分析。结果表明,克隆的FnbpA基因片段全长1 654 bp,共编码314个氨基酸。分析表明,FnbpA蛋白基因潜在的蛋白质抗原决定簇有17个,抗原性很强,与16株FnbpA基因标准序列的同源性为77.1%-100%,本研究所克隆的FnbpA基因与AM990992株亲缘性最近。 张向新 石庆华 王世民 苏艳关键词:金黄色葡萄球菌 克隆 致病性大肠杆菌微胶囊口服疫苗的制备及对其免疫功能的评价 被引量:5 2009年 通过喷雾-界面配位改良法制备了大肠杆菌微胶囊口服疫苗,平均直径为10μm,包被率为65%;并通过体外试验证实了本疫苗能避免胃酸的破坏且肠溶性良好;利用淋巴细胞转化实验、玻板凝集试验、ELISA试验测定了其免疫效果,试验数据表明,大肠杆菌微胶囊口服疫苗能有效激活细胞免疫、体液免疫、黏膜免疫,可产生大量的IgA和IgG,并且使用方便,安全有效。 黄嘉驷 苏艳 周军 阿哈提 钟世勋 杨武干 钟先江 陈伟丽关键词:大肠杆菌 口服免疫 免疫功能