温州市科技局对外合作项目(H20110018)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：陈翔陈江帆黄托夫范海玲王小同更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第二医院美国波士顿大学波士顿大学更多>>
- 发文基金：浙江省“钱江人才计划”温州市科技局对外合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p-p38 MAPK在A_(2A)R敲除新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨p-p38 MAPK在腺苷A2A受体敲除(A2AR-/-)新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义。方法:采用改良Rice法建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型。A2AR-/-(KO)及同期野生型(A2AR+/+,WT)C57/BL6新生小鼠(7日龄)分别按照完全随机分组方法分成假手术组及模型组,模型组按HIBD后取标本时间不同又分为造模后1 d组、3 d组和7 d组,共8个实验动物组,每组取小鼠8只,共64只。采用TUNEL结合尼氏染色检测神经细胞凋亡,采用免疫组织化学法检测活化caspase-3及p-p38 MAPK表达。同时,KO及同期WT小鼠分别取假手术组(SKO和SWT,n=10)及模型组(MKO和MWT,n=30)于HIBD后1 d同时进行新生鼠短期神经行为学评定。结果:(1)缺氧缺血后皮层及海马CA1区神经细胞凋亡、活化caspase-3及p-p38 MAPK表达均增加,造模后1 d为高峰;(2)A2AR敲除导致神经细胞凋亡及活化caspase-3表达增加,与同一时点的WT小鼠相比均有显著差异(P<0.01);p-p38 MAPK表达增加,其中,1 d及3 d后2种基因型小鼠间均有显著差异(P<0.01);(3)Pea-son相关分析显示,活化caspase-3表达与p-p38 MAPK表达呈显著正相关(皮层:r=0.957,P<0.01;海马CA1区:r=0.939,P<0.01)。结论:p-p38 MAPK可能参与了A2AR敲除增加新生小鼠脑缺氧缺血后神经细胞凋亡、加重脑损害的过程。
- 任素伟崔志慧黄托夫范海玲陈江帆王小同陈翔
- 关键词：新生小鼠
- A2AR基因敲除对小鼠脑缺血再灌注后SVZ区星形胶质细胞激活的影响被引量：1
- 2013年
- 通过研究腺苷A2A受体(A2A receptor,A2AR)基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)星形胶质细胞(astrocyte,Ast)数目及形态的影响,为腺苷类药物在脑卒中类疾病中的应用提供实验依据。采用大脑中动脉栓塞法(middle cerebral artery occlu-sion,MCAO)复制局灶性脑缺血再灌注模型,动物分为假手术组(S)和模型组(M),其中M组根据基因类型分为A2AR基因敲除模型组(MKO)和A2AR基因野生模型组(MWT),MKO组和MWT组根据再灌注时间都分为1 d组、3 d组和7 d组,S组分为A2AR基因敲除假手术组(SKO)和A2AR基因野生假手术组(SWT),共8组;对实验小鼠进行神经行为学评分,脑组织用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triph-enyltetrazolium chloride,TTC)染色观察脑梗死灶,苏木素伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察脑组织大体形态,以及应用免疫荧光法观察SVZ区Ast的特异性标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein,GFAP)表达。结果显示,所有M组小鼠在脑缺血再灌注后均出现神经功能缺损症状,神经行为学评分显示MKO 3 d组低于MKO 1 d组(P<0.05);TTC显示M组小鼠脑组织均有白色梗死灶;免疫荧光结果显示S组小鼠SVZ区域仅有少量Ast表达,M组表达明显增多,MKO 7 d组Ast表达量低于MWT 7 d组(P<0.05);Ast表达与神经行为学评分呈显著负相关(r=–0.621,P<0.01)。结果证明,A2AR基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后,在急性期能够减轻肢体活动障碍,在恢复期能够调控Ast的激活,减少胶质瘢痕形成,是其促进后期神经再生的可能因素之一。
- 娄普黄婷婷冯小敏尹水贵黄托夫陈江帆陈翔
- 关键词：腺苷A2A受体脑缺血再灌注星形胶质细胞小鼠
- A2AR敲除对新生小鼠缺氧缺血脑区cyt C表达的影响被引量：1
- 2012年
- 腺苷(adenosine)A2A受体(A2A receptor,A2AR)作为腺苷四种受体亚型之一,对新生鼠脑缺氧缺血的作用尚存在争议,探讨其作用机制将有助于新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)的临床治疗。为此,该实验观察了新生鼠脑缺氧缺血后A2AR敲除对其神经行为学的影响;采用TUNEL技术结合HE染色检测神经细胞凋亡;采用免疫组织化学法检测活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)及胞浆中细胞色素C(cytochrome C,cyt C)的表达。结果发现,A2AR敲除损伤了新生鼠神经行为功能,使神经细胞的凋亡和胞浆中cyt C的表达增加、caspase3活化增强。其中,在脑缺氧缺血后的1,3,7 d,神经细胞凋亡和caspase 3活化较野生型显著增加(P<0.01),而胞浆中cyt C的表达仅在脑缺氧缺血后的1,3 d显著增加(P<0.01),且其表达与神经细胞凋亡、caspase 3的活化均呈显著正相关。这提示,A2AR敲除后可能通过促使cyt C由线粒体释放出来增加新生鼠脑缺氧缺血后神经细胞的凋亡。
- 任素伟高勇周定富范海玲陈江帆王小同陈翔
- 关键词：脑缺氧缺血新生鼠细胞色素C
