广东省自然科学基金(7001663)
- 作品数：8 被引量：66H指数：5
- 相关作者：李家平杨建勇黄勇慧范文哲陈伟更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人端粒酶启动子调控双自杀基因治疗肝癌的实验观察被引量：5
- 2011年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶的核心启动序列（hTERT）启动子驱动的双自杀基因系统CDglyTK真核质粒对肝癌细胞的特异性杀伤作用。方法利用PCR扩增hTERT启动子、SV40、yCD及TKgly基因片段，单独或共同连至pEGFP—CI质粒载体，分别构建pEGFP—hTERT-CD、pEGFP-hTERT—TK及pEGFP—hTERT—CDglyTK质粒，并转染SMMC7721肝癌细胞和HL7702正常人肝细胞，观察其转染效率并以RT—PCR、QPCR、Western印迹方法检测目的基因的表达，给予不同浓度的5-Fc及更昔洛韦（GCV）处理，在用MTT法评估杀伤效应和旁观者效应，TRAP-银染法检测杀伤前后细胞端粒酶活性，流式细胞仪检测细胞凋亡率，比较和分析联合基因与单基因疗效的差异。结果最终质粒的酶切产物所得片段与预期一致，RT—PCR、QPCR及Western印迹结果显示目的基因CD、TK及CDglyTK高表达；pEGFP—hTERT-CD、pEGFP-hTERT—TK及pEGFP—hTERT—CDglyTK转染效率分别为74．5％、76．3％、76．9％。转染pEGFP—hTERT—CDglyTK的细胞较单基因转染对前药具有更高的敏感性（P=0．020，P=0．015）、促细胞凋亡作用（P=0．023，P=0．017）及旁观者效应（P=0．012，P=0．001），可更大程度降低端粒酶活性（P=0．045，P=0．038）。HL7702细胞的转染及生长未受自杀基因系统的影响。结论本研究构建的hTERT启动子驱动的双自杀基因（CDglyTK）系统质粒，在体外实验中对人肝癌细胞具有特异性的高杀伤作用。
- 范文哲杨建勇陈伟黄勇慧王于张应强李家平
- 关键词：端粒末端转移酶自杀基因
- 前列地尔对肝缺血再灌注损伤保护机制的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨前列地尔E1（Lipo—PGE1）对肝脏缺血再灌注损伤（I／R）的保护机制。方法选择21只成年犬，随机分成3组，对照组、静脉用药组（Ⅳ组）和肠系膜上动脉用药组（SMA组），每组7只。动物被肝门阻断45min后再灌注60min建赢I／R模型。Ⅳ组和SMA组每只犬肝门阻断前5min和再灌注60min后各推注Lipo—PGE，一次，药量为1μg/k、速度为0．05μg·kg^-1·min^-1；对照组每只犬则在相应时间各缓慢推注0．9％氯化钠1次，用量为2ml／kg。各组首次用药或0．9％氯化钠前30min及再次用药或0．9％氯化钠后30min依次行CT灌注成像（CTPI）、门脉自由压（FPP）、门静脉血氧含量（CpvO2）、肝脏氧输送量（HDO2）、肝功能酶学指标ALT、LDH、TB的测定和比较，同时运用光镜和电镜观察样本肝组织与细胞的形态学变化。结果（1）I／R后对照组的肝灌注量减少幅度最大（P〈0．05），而SMA组的变化最轻，Ⅳ组的变化介于两者之间。（2）I／R前后各组CpvO2变化差异均无统计学意义（均P〉0．05），但SMA组有明显的增加趋势；I／R后各组HDO2下降（P〈0．05），但SMA组的下降程度最轻。（3）对照组I／R后FPP明显增加（P〈0．05），而SMA组、Ⅳ组的变化不显著（P〉0．05）。（4）I／R后对照组肝组织受损，肝功能水平下降，SMA组的肝损伤和功能下降状况明显减轻，Ⅳ组的变化介于两者之间。结论Lipo—PGE，对L／R肝损伤的保护机制在于改善微循环、缓解门脉压、增加门脉血氧含量和肝脏氧输送量，减轻细胞结构的损伤。
- 李家平王于黄勇慧李鹤平陈伟杨建勇
- 关键词：再灌注损伤体层摄影术X线计算机前列地尔
- 三丙烯微球联合碘化油治疗原发性肝细胞癌疗效探索被引量：6
- 2014年
- 目的:探讨三丙烯微球联合碘化油治疗原发性肝细胞癌的疗效价值。方法:入组56例原发性肝细胞癌患者,分为试验组(n=22)与对照组(n=34),试验组行三丙烯微球联合碘化油治疗方案,对照组行传统碘化油治疗方案,比较两组间疗效与出现各种不良反应的差异。结果:试验组与对照组在疗效上无统计学差异,试验组不良反应肝区重度疼痛与呕吐症状病例数试验组少于对照组,而发热病例数两组间无统计学差异,试验组不良反应持续时间短于对照组。结论:三丙烯微球联合碘化油治疗原发性肝细胞癌的疗效与传统碘化油治疗方案相当,但不良反应明显减轻,值得临床推广。
- 陈燕浩李家平谭国胜殷云志张树桐金朝林
- 关键词：原发性肝细胞癌碘化油
- 经肝动脉同种异体脂肪干细胞移植治疗小鼠自身免疫性肝炎的实验研究被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨同种异体脂肪干细胞经肝动脉移植对刀豆素A(Con A)诱导的小鼠自身免疫性肝炎的治疗价值。方法:Con A注射法建立小鼠自身免疫性肝炎模型。将40只小鼠随机分为4组:阴性对照组、经肝动脉移植组、经尾静脉移植组(移植脂肪干细胞2×106)和阳性对照组。阳性对照组应用环磷酰胺腹腔注射。观察移植前后肝脏组织病理病变情况、血清炎症指标和肝功能指标的改变。结果:经肝动脉移植组和经尾静脉移植组行脂肪干细胞移植后全部存活,未发生明显并发症;经肝动脉移植组血清炎症指标(IFN-γ、IL-4和IL-5)及血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶及碱性磷酸酶明显下降(P<0.05);经尾静脉移植组血清炎症指标及血清肝功能指标有所下降,但无显著差异。经肝动脉移植组及阳性对照组病理学上改善最明显,肝内炎症细胞浸润及肝细胞坏死均明显减少。结论:同种异体脂肪干细胞移植有助于改善Con A介导的小鼠自身免疫性肝炎,经肝动脉途径可提高脂肪干细胞肝移植的效能。
- 连帆王于范文哲杨岫岩许韩师陈伟杨建勇李家平
- 关键词：脂肪干细胞细胞移植
- 原发性肝细胞癌合并不同类型动静脉瘘的DSA表现与介入治疗被引量：7
- 2012年
- 目的:探讨原发性肝细胞癌合并不同类型动静脉瘘介入治疗的应用价值。方法:入组46例肝癌合并不同类型动静脉瘘患者,分别行肝动脉内化疗栓塞治疗或肝动脉内灌注化疗术,比较分析不同治疗方法的疗效、患者的生存率和对肝功能的影响。结果:DSA诊断肝癌合并动静脉瘘者46例,中央型动门静脉瘘14例,周围型动门静脉瘘24例,混合型8例,轻度动门脉瘘13例,中度动门脉瘘18例,重度动门脉瘘15例。其中同时合并肝动脉肝静脉瘘2例。38例行肝动脉内化疗栓塞术,8例行肝动脉内化疗术。术后所有患者肝功能均有不同程度好转,行肝动脉内化疗栓塞术中位生存时间,2个月、6个月、1年总体累积生存率均高于肝动脉内化疗术患者。结节型及巨块型肝癌中位生存时间,2个月、6个月、1年总体累积生存率相当,且均明显高于弥漫型肝癌。结论:周围型、轻中度动静脉瘘的患者较容易封堵瘘口,而中央型、混合型、重度动静脉瘘患者封堵瘘口难度较大,应尽量使用栓塞剂有效封堵瘘口血流后行经皮肤动脉化疗栓塞,如无法封堵瘘口,则仅行肝动脉内化疗术。
- 陈燕浩李家平谭国胜张树桐殷云志金朝林
- 关键词：肝细胞动静脉瘘
- 肝细胞癌中Survivin与NF-кB蛋白的表达及其临床意义被引量：6
- 2011年
- 目的初步探讨Survivin和NF—κB蛋白表达在肝细胞癌发生中的作用及其临床意义。方法对确诊的206例肝细胞癌组织标本及癌旁正常肝组织应用免疫组化法进行Survivin和NF—κB蛋白表达的检测，分析肝细胞癌中两种蛋白表达与病理参数及预后的关系。结果Survivin主要表达在细胞质，NF—κB主要表达在细胞核。206例肝细胞癌组织中Survivin和NF—κB蛋白的阳性表达率分别为78．2％和81．1％，均明显高于正常肝组织（11．7％和15．5％）（均P〈0．01）；肝细胞癌中Survivin蛋白表达与包膜侵犯、门静脉癌栓、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0．01）；NF—κB蛋白表达与门静脉癌栓、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0．05）。肝细胞癌中Survivin与NF—κB蛋白表达呈正相关（r=0．52，P〈0．01）；肝细胞癌组织中Survivin和NF-κB表达全阳性的患者1、3年生存率分别为70．3％和30．4％，均明显低于两者表达全阴性者（88．5％和61．5％）（均P〈0．05）。结论Survivin和NF—κB蛋白在肝细胞癌中高表达，两者在肝细胞癌的发展中相互促进，可作为预后的重要指标。
- 金亦邵春奎唐录英杨建勇黄勇慧李家平
- 关键词：肝细胞存活蛋白
- TACE联合经皮热消融治疗大肝癌的疗效及预后分析被引量：33
- 2011年
- 目的探讨经皮热消融[射频消融（RFA）及微波消融（MWA）]联合经动脉化疗栓塞术（TACE）治疗大肝癌的疗效及预后。方法2003年5月至2009年5月中山大学附属第一医院TACE联合热消融治疗45例5～10cm大肝癌患者，肝功能为Child-PutghA、B级，其中25例行TACE＋RFA治疗，20例行TACE＋MWA治疗。随访分析疗效、长期生存率及评估影响预后因素。结果所有患者的联合治疗成功率为100％（86／86），84个肿瘤完全灭活率为94．0％（79／84），并发症发生率为6．7％（3／45）。局部及远处复发率分别为66．7％（30／45）和71．1％（32／45），1、2年无瘤生存率为26．7％（12／45）、13．3％（6／45），1、2、3年总生存率分别为80．0％（36／45）、33．3％（15／45）、6．7％（3／45），中位生存期为25．0个月。单因素分析及Cox回归分析结果显示肿瘤〉7．0em、肿瘤多发、治疗不完全及术前甲胎蛋白（AFP）／〉200μg／L均是导致患者长期生存率差的因素。结论TACE联合热消融治疗无法手术切除的〉5．0cm的大肝癌安全有效，〉7．0cm的病灶建议行以TACE联合热消融为主的综合治疗。肿瘤大小、数目，疗效程度及术前AFP水平是影响患者预后的重要因素。
- 范文哲杨建勇吕明德谢晓燕殷晓煜黄勇慧匡铭李鹤平徐辉雄李家平
- 关键词：放射学介入性导管消融术
- 同种异体脂肪干细胞门脉移植对大鼠纤维化肝脏的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:研究同种异体脂肪干细胞肝内移植对大鼠纤维化肝脏的影响。方法:从SD大鼠腹膜脂肪组织提取脂肪干细胞,纯化、培养并稳定传代。雄性SD大鼠48只,成功建立大鼠肝纤维化模型。实验分为对照组(n=14)、门静脉组(n=11)和尾静脉组(n=14)。后两组分别经门静脉、尾静脉注射同种异体移植脂肪干细胞,观察移植前后大鼠肝血流动力学变化,并比较门静脉组和尾静脉组的疗效差异。结果:成功提取脂肪干细胞,纯化、培养并稳定传代。输注脂肪干细胞前后各组肝脏计算机断层扫描灌注指数显示,门静脉组肝脏血流灌注有明显改善,且以门静脉灌注量为主(P<0.05),尾静脉组仅有轻微改善。组织学肝硬化评分显示,门静脉组见肝纤维化、肝细胞脂肪变性、肝细胞变性坏死均明显改善(P<0.05);尾静脉组仅肝细胞脂肪变性有改善。免疫组化示门静脉组肝脏微血管密度较其它组明显减少(P<0.05)。结论:同种异体脂肪干细胞移植能改善肝纤维化SD大鼠的肝脏血流灌注及病理学改变;门静脉移植途径较尾静脉途径疗效更显著。
- 王于连帆谭国胜范文哲向贤宏陈伟杨建勇李家平
- 关键词：脂肪干细胞微血管密度肝血流动力学
