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排序方式：

绿色巴夫藻cDNA文库的构建及EST序列分析被引量：2: 2006年; 将绿色巴夫藻（Pavlova viridis）培养液逐种加入氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星3种抗生素处理，经检验后无杂菌污染。以该藻种为实验材料，以λTriplEx2为载体，利用SMART技术构建其cDNA文库。经测定文库滴度为6×10^6pfu／mL，重组率为98％。利用PCR方法检测cDNA文库插入DNA片段的大小，其长度为0．5～2kb，表明该文库达到建库要求，可用来筛选低丰度mRNA的基因克隆。对cDNA文库中的阳性克隆进行随机PCR扩增，挑选插入DNA片段较大的克隆，进行5’末端单向序列测定，测序结果与NCBI数据库进行BLAST比对，获得了200个有研究价值的EST序列和cDNA克隆，为进一步研究和开发绿色巴夫藻的功能基因奠定了基础。; 牛艳孔文涛杨婧孔健; 关键词：绿色巴夫藻多不饱和脂肪酸

一种适用于RT-PCR的微藻总RNA提取方法被引量：2: 2010年; 以绿色巴夫藻（Pavlovaviridis）为实验材料，在比较了Trizol试剂法和异硫氰酸胍一步法这两种常用RNA提取方法的基础上，建立了一种十六烷基三乙基溴化铵（CTAB）和酸酚相结合的改良的CTAB-酸酚法。此方法利用高浓度的β-巯基乙醇来防止RNA提取过程中多酚的氧化，然后利用CTAB并结合乙醇和醋酸钾同时使用的方法来有效去除多糖类物质对RNA的干扰。经琼脂糖凝胶电泳检测，所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮，无降解；其A260nm/A280nm值为1．968；200300nm全波长紫外扫描无多糖和蛋白吸收峰，表明提取的总RNA质量较好。对提取的总RNA直接进行反转录聚合酶链式反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT—RCR），能够清楚地获得目的基因的cDNA片段，进一步证实了改良的CTAB-酸酚法是一种高质量提取微藻总RNA的有效方法。; 杨婧牛艳张可炜孔健; 关键词：总RNA 反转录聚合酶链式反应

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国家自然科学基金(30370035)