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携带人血管内皮细胞生长因子基因细菌内重组腺病毒转染兔骨髓基质干细胞的表达被引量：1: 2007年; 目的应用高效细菌内同源重组系统pAd-Easy，制备含人血管内皮细胞生长因子121（VEGF121）基因的重组腺病毒，感染兔骨髓基质干细胞（BMSCs），并检测外源基因的表达，为其进一步应用于血管化组织工程骨组织的构建打下基础。方法自pCDNA-VEGF121质粒中切取VEGF121基因，将VEGF基因克隆到穿梭质粒，在BJ5183细菌内重组，在293细胞中构建携带VEGF基因的重组腺病毒，将腺病毒感染BMSCs，利用ELISA、免疫组织化学的方法检测VEGF121在BMSCs中的表达。结果通过pAd-Easy系统成功构建高滴度的携带VEGF121基因重组腺病毒pAd—VEGF，ELISA检测显示经转染的BMSCs中VEGF121的表达均明显增强，随着感染病毒MOI值的增高，VEGF121的表达量相应增高，差异有统计学意义（P〈0．01），免疫组化法显示经基因转染的BMSCs中有强阳性信号，未转染组出现阴性结果。结论 Ad—VEGF转染BMSCs后能稳定提高VEGF蛋白的表达。; 金丹马骊裴国献鲁峰胡稷杰张洪涛程文俊; 关键词：血管内皮细胞生长因子骨髓基质干细胞

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广州市科技计划项目(200421-E0031)